吸光光度分析tang

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1、第十一章吸光光度法§11.1吸光光度法概述吸光光度法是光学分析法的一种,也称为吸收光谱法。它是基于物质对光的选择性吸收而建立起来的分析方法。吸光光度法分类:比色法、可见光分光光度法、紫外分光光度法、红外光谱法和原子吸收分光光度法。吸光光度法意义:定性、定量分析吸光光度法的特点(1)灵敏者度高可用于测定微量组分的含量,测定下限可达10-5-10-6mol·L-1。(2)准确度较高比色法的相对误差为5%-20%,分光光度法的相对误差为2%-5%。(3)简便快速吸光光度法所使用的仪器设备简单,价格便宜,一般实验室都能具备。(4)应用范围广几乎所有的无机离子和有机化合物都可直接或间接的用

2、分光光度法进行测定。第二节基本原理一、光的本质与溶液的颜色二、光的吸收定律三、吸收光谱曲线一、光的本质与溶液的颜色区域波长范围跃迁类型光谱类型x射线10-3~10(nm)内层电子跃迁x射线吸收、发射、衍射,荧光光谱、光电子能谱远紫外10~200(nm)价电子和非键电子跃迁远紫外吸收光谱,光电子能谱紫外200~400(nm)紫外-可见吸收和发射光谱可见光400~750(nm)近红外0.75~2.5(μm)分子振动近红外吸收光谱红外2.5~1000(μm)分子振动红外吸收光谱微波0.1~100(cm)分子转动、电子自旋微波光谱,电子顺磁共振表11-1电磁波谱各种色光的近似波长范围光的

3、颜色波长范围(nm)光的颜色波长范围(nm)红色610~780青色480~500橙色595~610蓝色435~480黄色560~595紫色400~435绿色500~560可见色光的互补性不同物质对各种波长光的吸收具有选择性该溶液对该波长范围的光都不吸收,则溶液无色透明。如果溶液选择性的吸收了某种颜色的光,则溶液将呈现出它的互补色。如:高锰酸钾溶液因吸收了绿色光而呈现紫色,氯化钠溶液让日光全部透过而呈无色透明。1.透光率T和吸光度AI0=Ia+It(11-1)I0为入射光的强度,Ia为吸收光的强度,It为透过光的强度。T%=×100A=1g=-1gT=1g二、光的吸收定律2.光的吸

4、收定律——朗伯-比尔定律朗伯定律A=k1b(11-4)比尔定律A=k2c(11-5)朗伯-比尔定律A=ɑbc(11-6)可表述为:当一束平行的单色光通过均匀、无散射的溶液时,在单色光强度和溶液温度等条件不变的情况下,溶液的吸光度正比于溶液浓度与液层厚度的乘积。上述的k1、k2、ɑ均为比例常数,又称为吸光系数,它表示物质对光的吸收能力。3.吸光系数与摩尔吸光系数(1)当溶液浓度c的量纲为gL-1时,则吸光系数ɑ的量纲为Lg-1cm-1。(2)当溶液浓度c的量纲为molL-1时,比例常数ɑ改用符号ε表示,称为摩尔吸光系数,量纲为Lmol-1cm-1,朗伯-比尔定律表示为:

5、A=εbc(11-7)ɑ和ε可以通过下式换算:ε=ɑM(11-8)式中:M为吸光物质的摩尔质量。三、吸收光谱曲线吸收光谱曲线又称吸收曲线,它是溶液吸光度随入射光波长变化的曲线。图11–2不同浓度KMnO4溶液的吸收曲线(1)溶液对不同波长光的吸收有选择性。(2)同一溶液不同浓度的吸收曲线形状相似,(3)在最大吸收波长附近(不一定在λmax处),即使浓度较低时,吸光度A也有较大的数值。物质对光的吸收程度可用最大吸收波长下的摩尔吸光系数εmax表示。εmax<104,测定的灵敏度低;104<εmax<5104属中等灵敏度;5104<εmax<105属高灵敏度;εmax>106属超

6、高灵敏度。第三节分析方法一目视比色法1目视比色法原理目视比色法的理论依据是朗伯-比尔定律。当日光透过组成相同的两个有色溶液时,如果液层的厚度相等,则颜色深浅相同(吸光度相等)的溶液浓度相等。2.目视比色法的测定方法测定时将标准溶液按照由少至多的顺序依次加入到一套(6~10个)比色管中,加入等量的显色剂,加水稀释至刻度,摇匀可得一系列颜色由浅至深的标准色阶。另取一比色管,加入一定量的试液,在相同条件下显色并稀释至刻度。将该比色管与标准色阶进行比较,根据颜色相同,浓度相同的原理,可求得试液的浓度。操作简便;缺点是标准色阶不易保存,常需临时配制。主观误差较大。二、可见分光光度法可见分光

7、光度法是以钨丝灯发出的光作光源,灯光经单色器色散,取所需波长的单色光通过被测溶液,测得溶液的吸光度,然后进行分析的方法。图11-4721型分光光度计结构示意图1.光源2.透镜3.反光镜4.狭缝5.准光镜6.棱镜7.吸收池8.光门9.保护玻璃10.光电管分光光度计主要由光源、单色器、吸收池、检测器、显示器等五个部件构成。(1)光源以6~12V的钨丝灯作光源,单色光的波长范围为360~800nm。(2)单色器单色器的作用是将钨丝灯发出的复合光分解为单色光。单色器由入射狭缝、色散元件(

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