微生物的实验室培养(课件)

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1、课题1微生物的实验室培养专题2:微生物的培养与应用一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。了解有关微生物及培养基的基础知识，进行无菌技术的操作，进行微生物的培养。一、课题目标：掌握培养基的制备、高压蒸气灭菌和平板划线法等基本操作技术，熟练、规范地进行无菌操作，成功地培养微生物。无菌技术的操作。二、课题重点和难点：三、技能目标：微生物病毒细菌放线菌真菌原生动物原核生物界原生生物界真菌界病毒界是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称。微生物1.分类2.病毒朊病毒（蛋白质病毒）病毒的增殖细菌的外形与大小3.细菌图1-1常见的三种细菌典型形态A.球菌B.杆菌C.弧菌AB

2、C细菌的构造细菌细胞由外向里依次有鞭毛、菌（纤）毛、荚膜、细胞壁、细胞膜、细胞质，核区等。伤寒杆菌细胞壁中含毒素细胞壁坚韧且有弹性细胞壁有哪些功能？①固定细胞外形；②保护细胞免受外力的损伤；③阻拦大分子物质进人细胞；④使细胞具有致病性及对噬菌体的敏感性。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌。芽孢：细菌形成的椭圆形的休眠体异养菌：腐生菌：枯草杆菌寄生菌　大部分病原菌光合自养型：光合细菌化能自养型：硝化细菌，铁细菌，硫细菌细菌的营养类型根据细菌所利用的能源

3、和碳源的不同，将细菌分为两大营养类型。自养菌：分类，举例?菌　落单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。菌落是鉴定菌种的重要依据。细菌的菌落特征因种而异菌落4.放线菌⑴结构：单细胞原核分支状的菌丝（基内菌丝、气生菌丝）（2）繁殖孢子丝

4、孢子链霉素、土霉素、四环素、氯霉素、红霉素、庆大霉素微生物中发现了几千种抗生素，其中2/3是由放线菌产生的⑶应用:5.真菌如上图是酵母菌电子显微镜下的形态结构酵母菌和霉菌青霉生殖腐生生活孢子生殖一、基础知识：（一）培养基培养基（液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生

5、长繁殖使用的混合营养基质。1.培养基的类型和用途（1）按物理状态来分：液体培养基+琼脂→（半固体培养基）↓固体培养基（用于菌种分离、鉴定等。）（2）按功能来分：选择培养基和鉴别培养基。（3）按成分来分：天然培养基和合成培养基。单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。用途：纯化（分离），鉴定、活菌计数、保藏菌种固体培养基：菌落液体培养基：表面生长均匀混浊生长沉淀生长用途：增菌、工业生产半固体培养基：无动力有动力(弥散)用途：动力检测培养基的种类液体培养基半固体培养基固体培养基据物理性质分天然培养基合成培养基

6、据化学成分分选择培养基鉴别培养基据用途分常用于工业生产常用于观察微生物的运动、鉴定菌种用于微生物的分离、计数常用于工业生产常用于分类、鉴定在培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需要的微生物的生长。例如，在培养基中加入青霉素，以抑制细菌、放线菌的生长，从而分离到酵母菌和霉菌。又如，在培养基中加入高浓度的食盐可以抑制多种细菌的生长，但不影响金黄色葡萄球菌的生长。根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成，用以鉴别不同种类的微生物。例如，在培养基中加入伊红和美蓝，可以用来鉴别饮用水和乳制品中是否存在大肠杆菌等细菌：如果有大肠杆菌

7、，其代谢产物就与伊红和美蓝结合，使菌落呈深紫色，并带有金属光泽。选择培养基加入青霉素的培养基:分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐的培养基:分离金黄色葡萄球菌不加氮源的无氮培养基:分离固氮菌不加含碳有机物的无碳培养基:分离自养型微生物加入青霉素等抗生素的培养基:分离导入了目的基因的受体细胞加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷的培养基:分离杂交瘤细胞根据细胞生存所需物质的种类和数量，用人工方法模拟合成的。合成培养基主要成分是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。优点：标准化生产，组分和含量相对固定;成本低缺点：缺少某些成分，不能完全满足体外细胞生长需要。

8、合成培养基:天然培养基有血清、血浆、和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。优点：营养成分丰富，培养效果好缺点：来源受限;成分复杂，影响对某些实验产物的提取和实验结果的分析;易发生支原体污染;天然培养基：2.营养C、H、O、N、P、S四大营养类型碳源氮源水无机盐微生物主要的化学元素组成：另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。4、微生物的五种营养要素碳源（carbonsource）氮源（nitrogensource）生长