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1、探究课题：DNA的粗提取和鉴定一、课题分析1.教学目标（1）初步学会DNA的粗提取和鉴定的方法，领悟该实验的实验原理。（2）如实观察并记录实验现彖和结果，培养学生求实、严谨的科学态度。（3）分析实验过程屮出现的问题，培养学生分析问题和解决问题的能力。（4）通过分组实验，培养协作意识和合作能力。2.背景描述核酸是存在于细胞屮的一种酸性物质，因为它呈现酸性，所以叫核酸。核酸是细胞的核心物质,是细胞里最重耍的生命大分子z—,是支配生命从诞生到死亡的根源物质，主宰着细胞的新陈代谢,被现代科学称为“生命Z源”、“生命Z本”。核酸是1868年瑞士医生
2、米歇尔（F.Miescher）发现的。20世纪20-30年代确认白然界核酸有-DNA和RNA两类，是由核廿酸组成的。40年代以后实验的事实使人们对核酸的功能和结构两方面的认识都有了长足的进步。1928年，英国科学家格里菲思（F.Griffith）用肺炎双球菌在小鼠身上进行转化实验，证明被加热杀死的S型细菌中存在一•种促成无毒性的R活细菌转化成有毒性的S型细菌的转化因子；1944年，美国科学家（0.Avery）等证明了肺炎球菌转化因子是DNA；1952年A.D.Hershey和M.Cha-se用DNA35S和32P分别标记T2噬菌体的蛋口质
3、和核酸，感染人肠杆菌的实验进一步证明了DNA是遗传物质；1953年Watson和Crick提出的DNA双螺旋结构模型，这是20壯纪生物科学最伟人的成就，标志着现代分子生物学的诞生。那么DNA是什么样的物质呢？本实验就是将组织细胞中的DNA提収岀來，然后进行观察和鉴定。首先利用渗透原理将组织细胞破裂，释放出其中的DNA,由于DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。当NaCl的物质的量浓度为0.14mOl/L时，DNA的溶解度最低。利用这一原理，可以把主要分布在纽织细胞核屮的DNA在NaCl溶液屮析出来。因DNA不
4、溶于酒精溶液，但是细胞屮的某些物质则可以溶丁•酒精溶液。利川这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNAo由于DNA屮嚟吟核昔酸上的脱氧核糖遇酸牛成s■耗基・Y酮基戊醛，它再和二苯胺作用而显现蓝色（溶液呈蓝色），且蓝色的深浅与DNA含量的多少有关。因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。二.材料器具鸡血细胞液（每组5〜10mL）；烧杯（lOOmL,1个，50mL,500mL,各2个），漏斗，试管（20mL,2个），玻璃棒，滴管，量筒（lOOmL,1个），纱彳
5、j,银子，滤纸，铁架台，铁环，三角架,酒精灯，石棉网，载玻片，试管架，试管夹，火柴
6、。蒸镭水，体积分数为95%的冷酒精，质量浓度为0.lg/mL的柠檬酸钠溶液，物质的量浓度分别为2mol/L和0.015mol/L的NaCl溶液，二苯胺试剂。三.教学建议木实验的重点是通过颜色反应定性地验证生物组织中的DNA成分，让学生学会DNA的粗提取和鉴定的操作方法。难点是领悟该实验的设计思想，培养学纶科学的研究态度，提简学牛:的实验操作能力、观察能力和设计能力。1.教学方法根据实验内容，建议教师采川探究性实验和验证性实验相结合的教学方法。在实验时町将学生分成若干个小组，分别选择不同的实验材料，如鸡血、新鲜菜花等，让学生找出该实验理想的
7、实验材料，以充分体现学牛为主体性，调动学牛的实验兴趣、激发学牛的创新意识。2.注意事项①鸡血、植物纽织（渡菜菜叶、波菜菜花、蒜黄菜花等）材料要新鲜；②将鸡血细胞液与蒸僻水混合以后，必须用玻璃棒沿一个方向快速搅拌，使鸡血细胞快速破裂，以便将鸡血细胞核中的DNA释放；③用95%酒精溶液进一步提取含杂质较少的DNA时，95%酒精溶液必须在冰箱中至少放24h,因为使用冷却的酒精，对DNA的凝集效果较佳；④溶解细胞核中的DNA、将含DNA的黏稠物再溶解、提取含杂质较少的DNA时，都要用玻璃棒搅拌，使用时玻璃棒不要碰到烧杯底，要注意各步骤中搅拌的方法
8、；⑤在DNA的鉴定中，所用的二苯胺是一种有毒性的试剂，使用吋耍注意不能讣药液接触到皮肤或身体的其他部位，也不要近距离观察；⑥严格按照规范的方法步骤去操作。3・课前准备（1）准备好实验材料：新鲜的鸡血细胞液，新鲜的菜花、波菜、蒜黄和波菜等。鸡血细胞液是由活鸡的鲜血经沉淀后获得。每组（2个学生）需用5ml鸡血细胞液，每班（50）至少130mL,鸡血细胞液与鸡血的体积比为1:3,这样每班至少需要390mL鸡血细胞液。宰杀1只中等大小的活鸡，一般可得120mL左右的鲜血，因此一个班需要买4只活鸡。如果不具备购买活鸡的条件，可带放冇抗凝剂的烧杯去市
9、场售活鸡处索取鸡血。准备好实验盛放鸡血细胞液的容器，最好是槊料容器（劇料烧杯和试管）。因为鸡血细胞破碎以后释放出的DNA,容易被玻璃容器吸附，使本来从细胞内提取的含量较少的DNA显得含量更少，
