污水处理站水样生物监测检验作业指导书

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1、污水处理站水样生物监测检验作业指导书细菌总数测定1目的：了解水中需氧菌兼性厌氧菌和异养密度的方法；2步骤：2.1水样稀释，现行用1：10和1：100；2.2以无菌操作方法用51灭菌吸管吸取充分混合的水样或2-3个适宜浓度的稀释水样lml,注入平U1L屮（每个水样有两个平皿）；2.3注入15ml已融化并冷却至45°C左右的营养琼脂培养基于平皿中；2.4立即旋转平皿，使水样与培养基充分混匀；2.5每次检验时，另用1个平皿只倾注营养琼脂培养基作空白对照；2.6待琼脂冷却凝固后，翻转平皿，使底面向上，置于37°C恒温箱内

2、培养24小吋，进行菌落计数;2.7菌落计数培养之后，立即进行平皿菌落计数，可用肉眼观察，必要时可用放大镜检查，以防遗漏；2.8记下各平皿的菌落数后，然后求出相同稀释度的平均菌数（若一个平皿的菌落数后有较大状菌落长I］寸，则不宜采用）；2.9距离不小于最小菌落的直径，便应一一计数，那些紧密接触而外观（形态和颜色）相异的菌落，也应一一计数。水中总大肠菌群测定：1目的：了解水中埃希氏菌属、柠檬酸杆菌屈、肠杆菌屈、克雷伯氏菌属等菌屈的细菌；2产生原因：在35°C48h之内发酵乳糖产生的需氧及兼性厌氧的革兰阴性无芽孑包杆菌

3、而产生以上菌属;3方法：多管发酵法；4原理：根据大肠菌群细菌能发酵乳糖，产酸产气以及具备革兰染色阴性，无芽也，呈杆状等有关特征，通过3个步骤进行检验，以求得水样中总大肠菌群数；5步骤5.1将水样作1：10>1：100.1：1000或更高的稀释样作待测水样；5.2于装有10ml浓缩乳糖蛋白腺培养液的5个试管中（内有倒管）各加lml,1：10稀释的待测水样；5.3于装有10ml乳糖蛋白腺培养液的5个试管中（内有倒管）各加lml,1：100稀释的待测水样；5.4于装有10ml乳糖蛋白月东培养液的5个试管中（内有导管）各

4、加lml,1：1000稀释的待测水样;5.5以上共计15个管，将各管摇匀。置于37°C恒温箱培养24h；5.6发酵试验培养24h后，将产酸产气及只产酸发酵管，分别接种丁•品红亚硫酸钠培养基上和伊红美蓝培养基上置于37°C恒温箱内培养24h；5.7挑选符合下列特征的菌落，取菌落的一小部分进行涂片、革兰染色、镜检；5.7.1品红亚硫酸钠培养基上的菌落，紫红色，具有金属光泽的菌落；深红色，不带或带金属光泽的菌落；淡红色，中心色较深的菌落；5.7.2伊红美蓝培养基上的菌落，深紫黑色，具有金属光泽的菌落；紫黑色，不带或略带

5、金属光泽的菌落；深紫红色，屮心色较深的菌落。5.8±述涂片镜检的菌落如有革兰阴性无芽孑包的杆菌，则挑选菌落一部分再接种于普通浓度乳糖蛋白腺培养基中（内有倒管）；5.9每管可接种分离自同一初发酵瓶（管）的最典型菌落1-3个。然后置于37°C恒温箱中培养24小吋;5.10有产酸产气者，证实有大肠杆菌存在，报告每斤水样中的人肠菌群数;5.11清理现场，保存培养基、填写报表。6.总人肠菌群检验流程如下有气体产生，再接种于伊红美蓝培养基(37±1)°C培养(37±2)h无菌落生产或无典型菌