生化期末总结

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1、生化总结:>蛋白质化学1・蛋白质1,2,3,4级结构蛋白质结构一级结构二级结构三级结构四级结构概念指蛋白质多肽链中通过肽键连接起來的氨基酸的排列顺序,即多肽链的线状结构指多肽链的主链骨架屮若干肽单位,各白沿-泄的轴盘旋或折叠形成有规则的构彖一条多肽链屮所有原了•或基团在三维空间的整体排布rti两个或两个以上的亚基之间相互作用,彼此以非共价键相连而形成更复朵的构象主要构象以N端为头,以C段为末cc螺旋:多个肽键平面通过氨基酸a碳原了的选择,呈右手螺旋。卩折叠(卩片层):有顺式和反式两种,顺式较反式更稳定。肽平面呈锯齿状卩折角:即U

2、形转折结构。主要决定的结构多肽链的线性结构多肽链的主链骨架,不涉及侧链构彖多肽链整体排布多肽链Z间的结构主要起作用的键肽键、一•硫键氢键氢键、疏水键、配位键、盐键、范德华力氢键、疏水键、配位键、盐键、范德华力相关概念肽键、氨基酸残基肽单位(肽平面)、基序结构域亚基2•超二级结构(模体):①乂称基序,是指在多肽内顺序上相邻的二级结构常常在空间折證中靠近,彼此相互作用,形成有规则的、在空间上能辨认的二级结构聚集体。②常见a螺旋组合(act)、卩折叠组合(ppp)和a螺旋卩折叠组合(pap)等。③它们可直接作为三级结构的“建筑块”或结

3、构域的组成单位,是介于二级结构和结构域间的一个构象层次,是蛋白质发挥特定功能的基础。3•结构域:①是在蛋口质的三级结构内的独立折叠单元,通常都是儿个超二级结构的组合。(在较大的蛋口质分子中,由于多肽链上相邻的超二级结构紧密联系,进一步折叠形成一个或多个相对独立的致密的三维实体,即结构域)②结构域是三级结构的一部分,结构域之间靠无规线团连接。③结构域由100〜200个氨基酸残基组成,具有独特的空间构象,•分子整体以共价键相连,并承担特定的生物学功能。4•蛋白质等电点:使蛋白质所带止负电荷相等,净电荷为零时溶液的pH,称为蛋白质的等

4、电点pl。含酸性氨基酸较多的酸性蛋白,等电点偏酸;含碱性氨基酸较多的碱性蛋白,等电点偏碱。体内多数蛋白质的等电点为5左右,故在生理条件下,它们多以负离子形式存在。5•蛋白质两性解离及其所带电荷:①蛋白质在纯水溶液和结晶状态屮都以两性离了的形式存在,即同一分子屮可带有正负两种电荷,即竣基带负电而氨基带正电。②当溶液的pH>pI时,蛋口质带负电荷;当溶液的pH

5、②木质:破坏了形成蛋白质空间构象的次级键,不涉及一•级结构的改变或肽键的断裂。③特征:牛物活性的丧失、某些理化性质的改变(失去结品能力、易沉淀、易水解)④因素:不同蛋白质对各种因素的放感度不同,物理因素(高温、紫外线、X线、超声波和剧烈振动)、化学因素(强酸、强碱、重金属等)。7•蛋白质沉淀反应:蛋白质分子聚集而从溶液中析出的现象,称为蛋白质的沉淀。原理:①中性盐沉淀反应:低盐浓度可使蛋白质溶解度增加,称为盐溶作用;高盐浓度时,因破坏蛋白质的水化层并屮和其电荷,促使蛋片质颗粒相互聚集而沉淀,称为盐析作用。主要特点是沉淀出的蛋白质

6、不变性。常用的无机盐有(NH4)2SO4>NaCkNa2S04^o②有机溶剂沉淀反应:使蛋白质表而失去水化层相互聚集而沉淀。在等电点时,加入冇机溶剂更易使蛋白质沉淀。③加热沉淀反应:在等电点时授易沉淀。④垂金属盐沉淀反应:蛋白质在pH>pI的溶液中呈负离子,可与重金属离子结合成不溶性蛋白盐而沉淀。⑤生物碱试剂的沉淀反应:蛋白质在pHvpI的溶液中呈正离子,可与一些生物碱试剂(苦味酸、磺基水杨酸等)结合成不溶性的盐而沉淀。补充:蛋白质变性有时可表现为沉淀,亦可表现为溶解状态;同样,蛋白质沉淀有时可以是变性,亦可以不是变性。&蛋白质

7、的分离纯化方法及原理:分离纯化原理具体方法溶解度不同等电点沉淀:蛋白质在等电点时溶解度最小(不易沉淀完全)盐析沉淀:不同盐浓度可有效地使蛋口质分级沉淀(保持构象不变性)低温有机溶剂沉淀法:破坏水化层,对蛋白质的选择性较高分子大小不同透析法:利用蛋口质人分子对半透膜的不可透过性与其他小分子物质分开超滤法:依据分子大小和形状,在10“数量级进行选择性分离分了排阻层析(分了筛层析、凝胶过滤):蛋白质分了蜃的差异密度梯度离心:蛋口质颗粒沉降速度取决于它的人小和密度电离性质不同电泳法:取决于蛋白质分子所带的电荷的性质、数量和质点的人小与形

8、状离子交换层析:蛋口质是两性化合物,可用此法进行分离精制配基特界性亲和层析法:配基的固相化-抗原的吸附一>抗原的洗脱亲和力:蛋白质能与其相对应的化合物特并结合的能力。具有特界性和可逆性>核酸的化学1・DNA1,2级结构及模型DNA结构分子结构特点-级结构概念:指

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