sop-8239无菌检查法标准操作规程

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1、河南省华夏牧业有限公司页码：1/3文件编码:SOP-8239*1F讣"區版本号：01题目:无菌检查法标准操作规程制定人：审核人：批准人：颁发部门：质量部制定日期:审核日期：批准日期:生效日期:分发部门：质量部、QC1Fl的：建立无菌检验操作规程，保证检验人员操作规范化、标准化2职责：QC检验人员负责文件起草，QC主任复核文件，质量部经理负责批准。3范F協适用于木公司生产的注射用通脉酯，利巴韦林注射液等无菌检验。4.内容4.1.试剂需气菌、厌气菌培养基真菌培养基4.1.1.培养阜配制及灵験度检验依《培

2、养基配制及灵敏度检验操作规程》4.2.仪器与用具霉菌培养箱、牛化培养箱、蒸汽灭菌器、长柄取样匙、玻璃缸、乙醇灯、火柴、手术剪、手术银、试管、锥形瓶、移液管、刻度吸管、注射器及针头、铝制饭盒、纱布4.2・1•用具处理a.玻璃器皿试管、量筒、锥形瓶、移液管、刻度吸管、注射器、等,依据《玻璃仪器清洗操作规程》进行处理。使用过后如与细菌接触，应先灭菌倒出内容物后再清洗，晾十。b.移液管、刻度吸管在管口上端内，松松地塞少许棉花，然后放于金属筒内，盖严,灭菌备用。c.试管、锥形瓶等在管（瓶）口塞上海棉胶专用塞，

3、塞子应塞进管口内2/3处，用牛皮纸将管口（包扌舌塞子）包扎严，灭菌备川。d.将注射器、针头配对，检查针头是否畅通后，将注射芯、管和针头分别放在双层纱布内，包扎严密，置铝制饭盒内，盖严，用牛皮纸包扎后，灭菌备用。e.长柄取样匙，放于金属筒内，盖严，干热灭菌备用。f・手术银、手术剪洗净、擦干。用双层纱布将1把剪与1个银间隔包扎在一起，放于铝制饭盒内，盖严，用牛皮纸包扎，灭菌备用。g.无菌服、帽、口罩、鞋依《洁净区工作服清洁规程》进行处理。4.2.2.用具的灭菌凡无菌操作过程屮所用的器皿，都应用牛皮纸包扎

4、严密，将包扎妥的用具，在（121±0.5）°C蒸气灭菌30分钟。物品取出时切勿立即證冷处，以免急速冷却，使灭菌物品内蒸气冷凝造成负压，易致染菌，应置恒温培养箱中烘干。适于高温灭菌的器血也门J采用160°C干热灭菌2小时。4.3.操作前准备4.3.1.无菌室无菌程度检查乩取肓径90mm培养IIIL,在接种室内点燃乙醇灯，在乙醇灯旁，以无菌操作，将培养H1L半开注入溶化的营养琼脂培养基约20ml制成平板，在30〜35°C预培养48小时,证明无菌后将平板3个，通过传递窗带入无菌操作室内的洁净区左、中、右各

5、放1个；打开碟盖扣置，平板在空气屮暴露30分钟示，将碟盖盖好，置30〜35°C培养48小时,取出检查。100级清洁度耍求：3个平板上生长的菌落数平均不得超过1个。b.超净工作台应每月检测其洁净度一次，应达到100级（用尘埃粒子计数仪）检测尘埃粒径W5um的粒数不得超过3.5个/升；空气流量应控制在0.75〜1.0m3/S；细菌菌落数平均＜1个。4.4.操作方法4.4.1•对照用菌液的制备4.4.1.1.金黃色葡萄球菌菌液用接种坏取金黄色葡萄球菌［StaphylococcusaureusCMCC（B）

6、26003］的营养琼脂斜面新鲜培养物少许，接种至需气菌、厌气菌培养基内，在30〜35°C培养16〜18小时，用无菌0.9%氯化钠溶液稀释制成每lml中含10〜100个菌。4.4.2.供试品打开方法先川75%乙醇棉球擦拭外樂及胶塞，待干，川灭菌银子剔去铝盖上幫料圆片，过火焰数次。4.4.3.供试品制备川灭菌锻取出注射器，在火焰旁将针芯插入针管并安上针头，供试品瓶盖和注射器针头均应迅速通过火焰数次。a•供试品为冻干粉针剂，用注射器吸取供试品项下规定的溶剂在已消修好的胶塞中心位登刺入西林瓶加入溶剂，使溶解

7、，混匀后吸出溶液。b.供试品为注射液可直接用注射器吸取药液。抽取瓶屮液体时，应将供试品倒直并使针头在液而下。4.4.4.接种及培养用注射器，取上述制备妥的供试品在近火焰上以右手握拳，小指为主拔开培养基管的塞子，管口通过火焰，移至火焰F侧，沿着培养基管壁接种于協气菌、厌气菌培养基6管，（其中1管于操作结束后移至接种室接种金黄色衙萄球菌对照菌液lml）,真菌培养基5管。轻轻摇动使匀。需气菌、丿犬气菌培养基在30〜35°C培养，真菌培养基在20〜25°C培养7H,培养期间应逐日检查是否有菌生长（阳性对照在

8、24小时内应有菌生长）。5.结果判定当阳性对照管显浑浊并确有细菌生长时，可根据观察所得的结果判定：乩需气菌、厌气菌及真菌培养管均为澄清，均判为供试品合格。b.需气菌、厌气菌及真菌培养管中任何1管显浑浊并确证为有菌生长，应重新取样,分别依法复试2次，除阳性对照管外，其他各管均不得有菌生长，否则应判为供试品不合格。4.编制依据：《中华人民共和国兽药典》2000年版