结核感染T细胞检测

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1、新检验项目结核感染特异性T细胞（T-SPOT.TB）检测技术1、结核病的疫情结核病是一种慢性传染病，可在身体各个器官发病，其中以肺结核最为常见，因此肺结核病是一种严重危害人类健康的传染病，得了肺结核病如果不能彻底治疗就会完全丧失劳动能力，而且还会传染他人，对个人、家庭和社会都是极大的危害。我国是全球22个结核病高负担国家之一，活动性肺结核病人数仅次于印度，居世界第二位。结核病仍是目前严重影响我国人民健康的公共卫生问题，而且影响到社会和经济的发展，是我国重点控制的疾病之一。1.3结核诊断2结核诊断细菌培养不能区分非结核分枝杆菌敏感度低，近半肺结核阴性肺外结核取材难结核杆菌生长缓慢，培养周

2、期长，不利于早期诊断3.TSPOT检测原理结核感染的免疫应答反应以细胞免疫为主，结核感染后体内长期存在抗原特异性的记忆性T细胞。当再次遇到抗原刺激时，能迅速活化增殖，释放γ干扰素γ干扰素是结核分枝杆菌感染后机体免疫应答中最重要的细胞因子。T-SPOT.TB技术：利用结核杆菌感染者外周血单个核细胞（PBMC）中存在结核特异性T细胞，这些淋巴细胞在受到结核特异抗原刺激后分泌γ干扰素而设计的T细胞免疫斑点试验。检测外周血中受结核特异抗原刺激释放γ干扰素的T淋巴细胞，经酶联免疫显色后，通过ELISPOT分析系统对斑点进行计数，1个斑点代表一个分泌细胞，计算出抗原特异性细胞的频率。空白对照孔内斑

3、点数小于10且阳性对照孔内斑点数大于20时视为试验有效T-SPOT.TB试验结果用每106PBMCs中斑点形成细胞（SFCs）的数目来描述，即SFCs/106PBMCs5.T-SPOT.TB的临床意义T-SPOT.TB高灵敏度种类内容摘要受试者数量文献发表活动性结核/灵敏度将T-SPOT.TB的检测结果与最后通过涂片和培养确诊的结果进行比较。包括牛型结核杆菌和非洲型结核杆菌感染的患者。T-SPOT.TB的灵敏度为97.2%。（CI90.3-99.7%）72MeieretalEurJMicrobiolInfectDis(2005)；24:529-536在经培养确诊的活动性结核受试者中，T

4、-SPOT.TB的灵敏度为96.6%。其中29例免疫力低下患者，T-SPOT.TB的灵敏度为100%87Leeetal.ERJ2006;28:24–30在确诊病例（涂片或培养阳性）和临床诊断病例（有临床症状和抗痨治疗有效）中，T-SPOT.TB的灵敏度为90.3%，并且不受CD4细胞数量影响。30Clarketal.Clin.Exp.Imm.2007;150(2):238-44在经痰培养或肺部病变组织病理活检确诊的结核患者中，T-SPOT.TB的灵敏度为92%。140KangetalChest.2007Sep;132(3):959-65在确诊的肺结核患者和疑似肺外结核患者中，T-SPO

5、T.TB的阳性率94%。32Kimetal.ArchInternMed.2007;167;20:2255-2259在免疫力正常和免疫力低下的受试人群中，T-SPOT.TB的灵敏度分别为94%和95%。所有受试者中，42%为肺外结核患者。186Kimetal.AmJMed2009；122,189-195经培养确诊、抗痨治疗不超过2周的结核患者用T-SPOT.TB检测，阳性率98%（57/58）。58JanssensetalERJ2007；30(4):722-8在经培养确诊的活动性结核患者中，T-SPOT.TB的灵敏度为94%。32DominguezetalClinVaccImmunol2

6、008;15;168-71T-SPOT.TB高特异性检测所用的ESAT-6＆CFP10抗原均来自结核分枝杆菌基因组RD1区域，RD1区基因仅存在于结核分枝杆菌复合群（人型、牛型、非洲型）。卡介苗和大多数环境分枝杆菌缺失RD1区基因因此T-SPOT.TB不会受卡介苗或者非结核分枝杆菌影响。种类内容摘要受试者数量文献发表特异性用T-SPOT.TB检测14例鸟分枝杆菌感染者，13例阴性，1例为临界值，复查也为阴性。14AdamsetalSc.JInf.Dis..2008;40(3):196-203.经过结核筛查的无症状的受试者，T-SPOT.TB检测结果全部为阴性，特异性100%。47Cla

7、rketal.Clin.Exp.Imm.2007;150(2):238-44在德国用T-SPOT.TB对健康的卫生保健工作者进行筛查。仅1例阳性（1/95），为影像学工作者，接触病人超过35年。TST检测假阳性结果34%（32/95）。95Barsegianetal.JofHospitalInf2008；69(1):69-76在接触结核的健康医务工作者和健康对照受试者中用TST和T-SPOT.TB检测。155健康医务工作者中，TST阳性的27例