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《【精品论文】猪多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及生物学特性研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。
1、猪多杀性巴氏杆菌的分离鉴定及生物学特性研究唐先春I,吴斌二索绪峰2,王大林彳,陈焕春I尹争艳I(1.华中农业大学动物病原微生物实验室，武汉430070)(2.海口市美兰区罗牛山兽医站,海南571133)摘要：用PCR方法配合生化鉴定，从有帅炎症状猪的肺脏及进行性萎缩性鼻炎(Progressiveatrophicrhinitis,PAR)症状猪的鼻拭了中分离出66株多杀性巴氏杆菌multocida,Pm)。然后做了药敏试验，并用PCR方法对这66株Pm进行分型及毒素基因的检测，用豚鼠皮趺坏死试验及小鼠致死试验对产毒素
2、多杀性巴氏杆菌(ToxigenicPasteureIlamuItocida,T^Pm)i!f一步鉴定。结果显示PCR鉴定与生化鉴定Pm结果完全一•致；PCR分型表明有46株为D型Pm,18株为A型Pm,1株为B型Pm,1株无法定型；有8株用PCR检测为FPm：豚鼠皮肤坏死试验及小鼠致死试验对这8株VPm的进一步鑒定，也表明均为产毒素菌株。所鉴定的8株FPm都为D型，都分离于有严重PAR症状的猪。关键词：多杀性巴氏杆菌；产毒多杀性巴氏杆菌；PCR；分型；药敬试验中图分类号：S852.61+2文献标识码：A文章编号:0
3、366-6964(2005)0多杀性巴氏杆菌(Pasteurellamultocida,Pm)是一种重要的病原,可以导致猪肺疫、牛羊出败、禽霍乱等危害严重的畜禽传染病。产毒多杀性巴氏杆菌(ToxigenicPasteurellamultodda,T+Pm)是猪进彳亍性萎缩性鼻炎(Progressiveatrophicrhinitis,PAR)的主要病原菌。该病是养猪业的一种重要传染病，其主要表现为：慢性鼻炎、颜面部变形、鼻甲件萎缩或山于经常打喷嚷而造成鼻.4!Jin.owill乳仔猪感染木病后，除引起鼻甲骨甚至鼻腔
4、变形、萎缩或消失外，还可以引起全身钙代谢障碍，致使仔猪发育迟缓、饲料利用率降低，有时伴发急、慢性支气管炎，导致仔猪死亡。育肥猪感染本病后，呼吸道的正常结构和功能遭到损害，致使机体抵抗力降低，极易感染其它病原，诸如支原休、胸膜肺炎放线杆菌、副嗜血杆菌、猪流感病毒、猪牛殖一呼吸道综合征病毒等，引起猪呼吸道综合征，増加猪的死亡率'^4
5、o多杀性巴氏杆菌按荚膜的不同可分为A、B、D、E、F5个血清型。研究表明，T+Pm主要是D型Pm,而HT+Pm主要分离于具有严重PAR症状的猪，从令肺炎症状猪分离的Pm-•般是不产毒索的®
6、叫T+Pm-UTPm在形态特征及牛化反应特性上没有区别。与PAR密切相关的T+Pm产牛—种约145kDa的丿支肤坏死毒素(Dermonecrotictoxin,DNT),该毒索山toxA基因编码。一般认为TPm不会导致PAR,而提纯的DNT可以导致PAR的发生"役所以，DNT是诊断及控制PAR的关键，也是区分T+Pm与TPm的关键。基T-DNT的特性，已经建立了一些检测方法，以区分T+Pm-LjTPm,如豚鼠皮肤坏死试验、小鼠致死试验［⑼、细胞促牛长试验、胎牛肺细胞毒性试验⑴】、EUSA⑸。但这些毒素检测方法，无论
7、是动物试验还是细胞培养，操作繁琐，费时费力，在临床上的应用都有很大的局限性⑸。随着T+Pm毒索慕凶的分子生物学研究，以及近年来PCR检测方法的广泛应用，使FPm的检测越来越简便、灵墩和完善。1材料与方法1・1酶及主要试剂收稿日期:2004-04-05基金项目：国家自然科学基金项目资助(30471292)作者简介：唐先春(1978-)，男，汉，湖北十垠人，硕士，主要从事产毒素多杀性巴氏杆菌方而研究，E-mail:xianchuntang@tom.com<>*通讯作者Tel:027-87288629猪多杀性巴氏杆菌的分
8、离鉴定及生物学特性研究唐先春I,吴斌二索绪峰2,王大林彳,陈焕春I尹争艳I(1.华中农业大学动物病原微生物实验室，武汉430070)(2.海口市美兰区罗牛山兽医站,海南571133)摘要：用PCR方法配合生化鉴定，从有帅炎症状猪的肺脏及进行性萎缩性鼻炎(Progressiveatrophicrhinitis,PAR)症状猪的鼻拭了中分离出66株多杀性巴氏杆菌multocida,Pm)。然后做了药敏试验，并用PCR方法对这66株Pm进行分型及毒素基因的检测，用豚鼠皮趺坏死试验及小鼠致死试验对产毒素多杀性巴氏杆菌(To
9、xigenicPasteureIlamuItocida,T^Pm)i!f一步鉴定。结果显示PCR鉴定与生化鉴定Pm结果完全一•致；PCR分型表明有46株为D型Pm,18株为A型Pm,1株为B型Pm,1株无法定型；有8株用PCR检测为FPm：豚鼠皮肤坏死试验及小鼠致死试验对这8株VPm的进一步鑒定，也表明均为产毒素菌株。所鉴定的8株FPm都为D型，都分离于有严
