神经元特异性烯醇化酶(nse)作业指导书

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1、ElecsysE170/E411神经元特异性烯醇化酶(NSE)1.分析原理采用双抗体夹心法原理,整个过程18分钟完成。・第1步:20M标本、生物素化的抗NSE特异件』勺单克隆抗体和钉(Ru)标记的抗NSE特界性的单克隆抗体混匀,形成夹心复合物。・第2步:加入链孫亲和素包彼的微粒,让上述形成的复合物通过生物索与链徭亲和索间的反应结合到微粒上。•第3步:反应混和液吸到测虽:池中,微粒通过磁铁吸附到电极上,未结合的物质被淸洗液洗去,电极加电压后产生化学发光,通过光电倍增管进行测定。仪器通过2点定标曲线以及试剂条码提

2、供的母定标曲线计算出结果。2.标本要求血清:按标准常规方法采集。不要使用血浆。离心1小时。样木15—25度稳定6小时,2—8度可稳定24小时,-20七可稳定3个月。只能冻融一次。不要使用加热灭活的标本。标本和质控品禁用叠氮钠防腐。标本、定标液和质控品在测定前应预温到室温。3.试剂、校准品、质控品和其他所需材料采用罗氏原装配套试剂。试剂:M:链霉亲和素包被的微粒〔透明瓶希■),1瓶,6.5ml。粒子浓度0.72mg/mlo含防腐剂。R1:生物素化的抗NSE单克隆抗体(灰盖),]瓶,10ml,1.0mg/L磷酸缓

3、冲液50nunol/l,Ph7.2;含防腐剂。R2:RuCbpy)?标记的抗NSE单克隆抗体(黑盖),1瓶,10ml。浓度l.Omg/1,磷酸缓冲液50mmol/LpH7.2,含防腐剂。校准品:Cal1阴性定标液(白盖),2瓶,1ml/瓶Cal2阳性定标液(黑孟),2瓶,1ml/瓶两个定标品的NSE的浓度范围约为0.5ng/ml和50ng/ml,以缓冲液/蛋白(小牛血常白蛋白)为基质,含叠氮钠<l%(w/w)o质控品:Elecsys肿瘤标志物质控品1和2(PrcciControlTumorMarker)货号1

4、1776452其他所需材料:ElecsysE170/E411分析仪ElecsysNSE稀释液货^-03001864Elecsys系统清洗液(SysClean)货号11298500ElecsysE411分析仪Elecsys系统缓冲液(ProCell)货号11662988Elecsys测量池清洗液(CleanCell)货号11662970Elecsys添加剂液(SysWash)货号11930346Elecsys适配器(AdapterforSysClean),货号11933159,Elecsys反应杯(CUP),货

5、号11706829Elecsys加样头(TIP),货号11706802ElecsysE170分析仪Elecsys系统缓冲液(ProCell)货号04880340Elecsys测量池清洗液(CleanCell〉货号04880293Elecsys试剂针清洗液(ProbeWash)货号03005712ElecsysE170/E411神经元特异性烯醇化酶(NSE)ElecsysPC/CC杯,货号03023141Elecsys反应杯/加针头/废物袋(CUP/TIP),货号12102137Elecsys系统淸洗适配器(S

6、ysCleanAdapterM)»货号030276511.仪器和校准使用仪器:瑞士罗氏诊断公司生产Elecsys2010/E170/E411全自动电化学发光免疫自动分析仪仪器校准:每批NSE试剂盒必须用新鲜试剂和NSECal1,Cal2定标一次。另外,以下情况需要再次定标:ElecsysEl70分析仪:・一-个月(同一批号试剂)・7天(放置仪器上的同一试剂盒)各种分析仪均适用的情况:根据耍求进行定标:如质控结采超出范围时。2.操作步骤(以E170为例)5.1校准操作步骤:在编组各项冃的参数时,已经在Appli

7、cation-Calib菜单中定义好了定标类型和儿点定标。因此在对各项冃进行定标时,只需在定标菜单Calibration中进行即可。进入Calibration-Status菜单,用鼠标选择需定标的项目,再根据需要点单点定标(BLANK键)或两点定标(TWOPOINT键)、全点定标(FULL键),再选择其它项目进行相应选择,最后点SAVE,将定标物放入在Calibration—Calibrator中定义好的位置,点Start,再点Start,仪器开始定标。在Calibration—Status菜单中看定标结果,

8、点CalibrationResult键看定标结果,点ReactionMonitor键看每个定标物的反应曲线。5.2样本检测程序:单个样本输入,在主菜单下选择Workplace-Tcstslcction,在SequenceNo栏输入标本号,然后选择该标本所需做的单个项口或组合项口,点SAVE键,样木号自动累加。批量常规标木的输入,在主菜单下选择WorkplaceTestslection,在Sequen

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