丁酸梭菌固态培养的初步研究

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1、万方数据资源开发ResourceDevelopment·‘1-l迄擅丁酸梭菌固态培养的初步研究谢全喜，徐海燕，于佳民，谷巍(山东宝来刹来生物工程股份有限公司，山东泰安27100(3)摘要：研究了丁酸梭菌在3种不同固态基质(豆粕、麸皮、玉米面)中的生长情况，结果显示，豆粕作为基质时丁酸梭菌生长最佳，最高活菌数可达3．9x107cfu·g～，麸皮为3．Oxl07cfu·g～，玉米面为1．9x107cfu·g～；又对豆粕：麸皮、葡萄糖和氯化钙3因素对丁酸梭茵生长情况的影响设计了正交实验，结果显示，影响强度顺序依次为豆粕：麸皮>葡萄糖>氯化钙，最优组合为豆粕：麸

2、皮为l：l，氯化钙为0．2％：关键词：丁酸梭菌；固态基质；正交实验中图分类号：$852：$816．8文献标志码：A文章编号：1001一0084(2013)01—0032—03APrimaryStudyontheSolid-StateCultivationofClostridiumbutyricumXIEQuanxi，XUHaiyan，YUJiamin，GUWei(ShandongBaoLai—LeeLaiBioengineeringCo．，Ltd．，Tman271000，ShandongChina)Abstract：Thegrowthsituationo

3、fClostridiumbutyricuminthreedifferentsolidmedia(soybean，wheatbran，maizemeal)wasstudied，Theresultshowedthat，soybeanmediawasthemostsuitablemedia，thedensityoftheliv—ingcellwas3．9x107cfu·g-1；wheatbranwasthesecond，thedensityofthelivingcellwas3．0x107cfu·乎1；thecornflourwastheworst，theli

4、vingcellwas1．9x107cfu·g～．Tostudythegrowtheffectofsoybean：bran，glucoseandcalci—umchlorideinClostridiumbutyricum，orthogonalexperimentalwasdesigned．Theresultshowedthat，theinfluenceorderwassoybean：bran>glucose>calciumchloride．thebestcombination：soybean：branwas1：l：calciumchloridewas0。

5、2％。Keywords：Clostridiumbutyricum；solidmatrix；oahogonalexperiment益生菌是指投入后通过改善宿主微生态平衡而发挥益生作用，达到提高宿主健康水平和健康状态的活菌制剂及其代谢产物¨1。存在于动物和人体内的有益微生物主要有乳酸菌、芽孢杆菌、酵母菌等，对于减少当前饲料中抗生素产品的滥用、减少药物在肉品中的残留、降低动物细菌的耐药性和保障动物健康有重要意义。丁酸梭菌是一种厌氧的革兰氏阳性芽孢菌，呈直杆状或稍有弯曲，广泛存在于人和动物体的肠道中，能有效抑制肠道致病菌的繁殖，调整肠道微生态平衡，同时减少氨类、

6、胺类等有害物质的产生睢)。丁酸梭菌制剂中活菌是以芽孢形式存在，对各种恶劣环境、存贮及加工运输过程中的高温、高湿、酸陛、机械摩擦和挤压等因素具有很强的稳定性¨，。因此添加在畜禽饲料中能够抵抗饲料加工过程中的高温、高热及其胃肠道酸性环境，具有很强的市场竞争力。目前对丁酸梭菌的作用机制、培养条件和在畜禽生产中的应用研究已非常广泛，但几乎都采用液体培养的方法H，。与液态培养相比，固态培养具有收稿日期：2012—12—10作者简介：谢全喜(1984一)，女，山东聊城人，硕士，助理研究员，主要从事动物微生态制剂的研究和开发。32饲羁厦监2013年B1魍万方数据成本低

7、、操作简便等优点”制。同时液态培养时生长量总是不能满足生产需要，且畜禽肠道菌所生存的环境本身为固态或半固态环境，因此本试验选用价格较为低廉的农副产品豆粕、麸皮等为原料，对丁酸梭菌进行固态培养研究。1材料与方法1．I菌种与培养基丁酸梭菌为山东宝来利来生物菌种保藏中心保存。丁酸梭菌液体种子培养基，各物质按质量分数计为葡萄糖2％、牛肉膏1．5％、蛋白胨2％、碳酸钙l％、七水硫酸镁0．02％、一水硫酸锰0．02％。调整pH为7．0，37℃静止培养24h，芽孢率>95％。固体培养基加琼脂粉1．5％，固态基质豆粕、麸皮，料水比为1：1．2，各生长限制因素按试验设计溶

8、解在水里添加到固体培养中，调整水的pH为7．0。1．2试验方法1．2．1丁酸梭茵