临床执业医师考试——酶促反应的动力学

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1、临床执业医师考试——酶促反应的动力学酶促反应动力学（kineticsofenzyme-catalyzedreactions）是研究酶促反丿应速度及其影响因素的科学。这些因素主要包括酶的浓度、底物的浓度、pH、温度、抑制剂和激活剂等。在研究某一因素对酶促反M速度的彫响时，应该维持反应屮其它因素不变，而只改变要研究的因素。但必须注意，酶促反应动力学中所指明的速度是反应的初速度，因为此时反应速度与酶的浓度呈正比关系，这样避免了反应产物以及其他因素的影响。酶促反应动力学的研究有助于阐明酶的结构与功能的关系，也可为陋作用机理的研究提供数据；有助于寻找最有利的反应条件，以最人限度地发挥酶催化

2、反应的高效率；有助于了解酶在代谢中的作川或某些药物作丿IJ的机理等，因此对它的研究具冇重要的理论意义和实践意义。一、酶浓度对反应速度的影响在一定的温度和pH条件下，当底物浓度大大超过酶的浓度时，酶的浓度与反应速度呈正比关系。二、底物浓度对反应速度的影响在酶的浓度不变的情况下，底物浓度对反应速度影响的作用呈现矩形双曲线（rectangularhyperbola）。在底物浓度很低时，反应速度随底物浓度的增加而急骤加快，两者呈正比关系，表现为一级反应。随着底物浓度的升高，反应速度不再呈止比例加快，反应速度增加的幅度不断下降。如果继续加大底物浓度，反应速度不再增加，表现为0级反应。此时，

3、无论底物浓度增加多大，反应速度也不再增加，说切酶已被底物所饱和。所有的酶都有饱和现象，只是达到饱和时所需底物浓度各不相同而己。（一）米曼氏方程式解释酶促反应中底物浓度和反应速度关系的最合理学说是中间产物学说。酶首先与底物结合牛成酶椀孜钥春衔？中间产物），此复合物再分解为产物和游离的酶。Michaelis和Menten在前人工作的基础上，经过大虽的实验，1913年前后提出了反应速度和底物浓度关系的数学方程式，即著名的米枢戏匠淌？michaelismentenequation）。V=Vmax[S]/Km+[S]Vmax指该酶促反应的最大速度，[S]为底物浓度，Knn是米氏常数，V是在

4、某一底物浓度时相应的反应速度。当底物浓度很低时，[S]《Km,则V^Vmax/Km[S],反丿应速度与底物浓度呈正比。当底物浓度很高时，[S]》Km,此时V^Vmax,反应速度达最大速度,底物浓度再增高也不影响反应速度。（二）米一曼氏方程式的推导米一曼氏方程式提出后又经riggs和Haldane的充实和发展，经补充和发展的米一曼氏方程工推导如下：（三）米氏常数的意义当反应速度为最大速度一半时，米氏方程可以变换如下：Vmax=Vmax[S]/Km+[S]进-步整理可得到：Km=[S]可知，Km值等于腮反应速度为最大速度一半时的底物浓度。I大I为Km=K2+K3/Kl,当K2》K3,

5、即ES解离成E和S的速度大大超过分离成E和P的速度时，K3可以忽略不计，此时Km值近似于ES解离常数KS,此吋Km值可用來表示酶对底物的亲和力。Km=K2/Kl=[E][S]/[ES]=KSKm值愈大，陆与底物的亲和力愈小；Km值愈小，解与底物亲和力愈大。酶与底物亲和力大，表示不需要很高的底物浓度，便对容易地达到最大反应速度。但是KS值并非在所有酶促反应屮都远小于K2,所以Ks值（又称酶促反应的底物常数）和Km值的涵义不同,不能互相代替使用。Km值是酶的特征性常数，只与酶的性质，酶所催化的底物和酶促反应条件（如温度、pH、冇无抑制剂等）冇关，与酚的浓度无关。酶的种类不同，Km值不

6、同，同一种酶与不同底物作用时，Km值也不同。各种酚的Km值范围很广，大致在10-1-10-6MZ间。当K3不远远小于K2和K1时，Km表示整个反应的化于平衡的常数。如果Km值已知，任何底物浓度时酶的饱和度（形成中间产物的酶占总酶的比例，saturationfractionfEs）fEs便可计算出来。fES=[ES]/[Et]=K3[ES]/K3[Et]=V/Vmax=[S]/Km+[S]（四）Km和Vmax的求法从图屮很难精确地测出Km和Vmax.*此人们将米氏方程进行种种变换，将曲线作图转变成直线作图。1•双倒数作图（doublereciprocalplotorLineweav

7、erBurkplot）将米氏方程两边取倒数，可转化为下列形式:1/V=Km/Vmax.l/[S]+l/Vmax可知，1/V对1/[S]的作图得一直线，其斜率是Km/V,在纵轴上的截距1/Vmax,横轴上的截距为-1/KmJt作图除用來求Km和Vmax值外，在研究酶的抑制作川方面还有重要价值。2.V对VO[S][SX)]法(EadieHofsteeplot)将米氏方程经移项整理后可写成VKm+V[S]=Vm[S]V[S]=Vm[S]-VKmV=Vm-KmV/[S]以V为纵处标对V/