帕金森病模型探究进展

《帕金森病模型探究进展》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、帕金森病模型探究进展作者：单悌超任玉娇于学慧袁彦平【关键词】帕金森病；细胞株；动物模型；药物筛选帕金森病(PD)是一种常见的中老年神经系统退变性疾病,平均发病年龄为55岁，70岁人群发病率达120/10万(l)oPD的确切发病机制尚不清楚，目前研究显示其主要病理标志为选择性黑质多巴胺(DA)神经元缺失，残存神经元呈现a突触核蛋白(asynuclein,asyn)和泛素染色阳性的胞浆内包涵体(LewyBody,LB)形成，黑质纹状体通路DA释放减少，患者出现静止性震颤，肌张力增高，运动减少、随意运动缺失、木僵等一系列症状。目前，PD的治疗方法有药物治疗，外科

2、手术治疗和细胞基因移植治疗，其中以药物治疗最为广泛。PD模型的建立对阐明其发病机制，发现药物作用靶点，新药研发与筛选，以及新药评价与用药方案的确定具有重要意义。目前已建立的PD模型有体内实验动物模型和活体外细胞模型。本文就近年来有关PD模型研究状况、造模方法、模型特征与成模机制及其在药物筛选中的应用等方面进行综述。1体内实验动物模型目前已建立的PD实验动物模型主要有：①基于神经毒素创建的永久性DA耗竭模型：6務基多巴胺(6OHDA),1甲基4苯基1,2,3,6四氢毗除(MPTP),甲基苯丙胺(MA)；②神经毒素致含细胞内涵体并缓慢DA耗竭模型：百草枯、鱼藤

3、酮；③可逆性药物模型：利血平、安定类药物;④以基因学为基础创建的动物模型：转基因小鼠、转基因果蝇、基因敲除小鼠等；⑤其他在体动物模型。对动物模型的评价方法主要包括自主活动计数、滚轴试验、游泳试验、爬杆试验等行为学检测以及黑质纹状体免疫组织化学检测等内容。1.1基于神经毒素创建的永久性DA耗竭模型6OHDA、MPTP等神经毒素可致神经细胞损伤死亡，从而建立PD模型，为DA能神经元死亡的分子机制提供见解，和为抗PD药物筛选提供实验动物模型，目前该类模型已广泛应用于神经保护剂的开发研究。1.1.16OIIDA神经毒素6OHDA是DA神经递质的餐化衍生物，与DA结

4、构类似，不能透过血脑屏障，能够引起交感神经肾上腺素能末梢的急性溃变，选择性引起中枢神经系统儿茶酚胺能神经元尤其是DA神经元的化学性损毁〔2),引起DA水平降低；而其他神经系统不受其损害，乙酰胆碱、5释色胺(5HT)、Y氨基丁酸(GABA)不发生改变；还可引起儿茶酚胺代谢物浓度降低，再摄取点数目和酪氨酸龛化酶免疫数目减少。Zigmond等(3)进行中枢DA能神经元损伤后的代偿研究，阐述了60HDA作用机制：6OHDA结构类似DA,分子高度不稳定，通过细胞外的自动氧化作用生成6轻多巴胺醍(60HDA0)和活性氧(ROS),通过单胺氧化酶(MA0)诱导H202形

5、成，H202与二价铁离子通过Fenton反应，生成務自由基(•0H),作用于细胞膜引起脂质化、蛋白和DNA结构变化，H202直接抑制线粒体氧化呼吸链造成能量衰竭，从而使细胞死亡。Betarbet等(4〕实验证明，蛋白酶体抑制剂可提高60HDA毒性作用，并增加泛素结合蛋白的水平，但并不产生真正的LB。由于60HDA不能通过血脑屏障，需要局部定向注射到黑质或内侧前脑束或纹状体部位，以损伤黑质纹状体DA能神经元通路，达到造模目的。Sarre等〔5)借助脑立体定向仪将60HDA分别注入黑质致密部(SNpc)和内侧前脑束(MFB),成功复制了大鼠急性PD模型。该方法

6、获得的PD模型属急性过程，不符合人类PD的慢性、进展性变化的特征。Thomas等〔6)将6OHDA注入黑质(SubstantiaNigra,SN)和腹侧被盖区(VTA)两个部位制成PD模型，其行为反应明显，神经元变性特征接近人类PD晚期。Yuan等(7)将6OHDA注入MFB和VTA两个部位制成PD模型，模型行为反应明显，适于对VTA行为探讨和神经保护作用的研究。而将6OHDA注入纹状体〔8〕，发现SN中的DA神经元呈现慢性进展性损伤，接近于人类PD发展过程，可建立早、中期PD模型。6OHDA注入MFB或VTA后，24h内DA能神经元开始变性死亡〔9〕；而

7、将6OHDA注入纹状体后黑质神经元呈延迟的退行性病变，持续1〜3w(10〕。可见不同部位注射6OHDA可获得不同时期的PD模型。尹丰等(2〕将6OHDA立体定向注入大鼠右侧MFB和VTA,2w后经阿扑吗啡诱导出现向健侧旋转行为，建成稳定有效的PD模型。6OHDA可致DA耗竭而复制PD模型，并可因注射部位不同而得到急性、早期、中期和晚期的PD模型，可用于评价抗PD特征新药效能，以及评价移植或基因治疗效果，目前研究应用较广泛。模型缺点是需脑立体定位仪辅助，技术要求高；模型与人类PD病理存在差异(如无LB形成)；且目前尚不清楚6OHDA致DA神经元死亡的机制与人

8、类PD中DA神经元死亡机制是否相同。1.1.2MPTP神经毒素MP