消抗灵Ⅱ号对解脲支原体体外抑菌实验探究

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1、消抗灵II号对解腺支原体体外抑菌实验探究【摘要】目的消抗灵II号对解腺支原体感染的实验研究包含两部分,一部分为本实验所负责的内容,即:消抗灵II号对解腺支原体体外抑制的实验研究,旨在证明其对Uu的抑制作用;一部分为消抗灵II号对Uu的体内抑制实验,旨在证明其对机体免疫系统的作用。本试验的研究目的是探讨消抗灵II号治疗Uu感染的作用机制,证明其与常用的抗生素阿奇霉素相比所存在的优势;优化方中的药物组成,为消抗灵II号广泛应用于临床及进一步的研究奠定基础。方法采用药基法,以培养液倍比稀释中药药液及抗生素药

2、液,使其共含有10个稀释度,并设立阳性对照组、阴性对照组及药液培养基对照组。经培养24~48h后,待阳性对照组发生颜色改变时观察结果。比较消抗灵II号全方、方中各药物及阿奇霉素的抑菌效果,优化方药组成。结果①消抗灵II号组成药物的抑菌效果依次如下:鱼腥草MIC50:7.81g/L,MIC90:62.5g/L,敏感率:80.00%垂盆草(MIC50:7.81g/L,MIC90:62・5g/L,敏感率70.00%、黄柏(MIC50:7.81g/L,MIC90:62.5g/L,敏感率:53.33%连翘(

3、MIC50:7.81g/L,MIC90:125.00g/L,敏感率:53.33%X黄艮(MIC50:31.25g/L,MIC90:250.00g/L,敏感率23.33%甘草(MIC50:31.25g/L,MIC90:250.00g/L,敏感率:16.67%X土茯苓(MIC50:31.25g/L,MIC90:125.00g/L,敏感率:10.00%X党参(MIC50:62.5g/L,MIC90:250.00g/L,敏感率:0b②全方、阿奇霉素对Uu抑菌效果如下:全方:MIC50:7.81g/L,MIC

4、90:62・5g/L,敏感率:73.33%,耐药菌株数:0;;阿奇霉素:MIC50:0.078g/L,MIC90:1.25g/L,敏感率:53.33%,耐药菌株数:8(26.67%③精简后药方:MIC50:7.81g/L,MIC90:31.25g/L,敏感率:83.33%,耐药菌株数:0。结论①消抗灵II号在体外对Uu有明显的抑制作用。精简药物组成后,最小抑菌浓度没有明显的改变,但对Uu的敏感率增强。②阿奇霉素在体外对Uu有明显的抑制作用,但耐药菌株较多,提示:用中医药治疗Uu感染可能成为代替、或协

5、助抗生素治疗的方法。【关键词】消抗灵II号解腺支原体抑菌实验近年研究发现,解腺支原体(Uu)感染与成人泌尿生殖道系统疾病密切相关,可引起非淋菌性尿道炎、慢性前列腺炎、不孕不育、妊娠期感染等疾病。消抗灵II号是导师韩延华教授治疗Uu感染的经验方。临床治疗总有效率达76.19%o方中以垂盆草、连翘、土茯苓、黄柏、鱼腥草清热解毒,对抗Uu;以黄艮、党参、杜仲等药物固护正气,增强机体的免疫力。1方法分别将5种中药、5药合剂、阿奇霉素胶囊制成药液。连续倍比稀释,对7株解腺支原体标准菌株(I型、山型、IV型、VI

6、II型)进行体外抑菌实验。实验具体方法如下:①将备用新鲜培养液基置于379电热保温箱中,预温1h;②在12x8孔的聚苯乙烯微量板上,将50pg备用煎剂加入第2,3孔;③将50pg新鲜培养液基分别加入第3至门孔;④用微量加样器,从第3孔开始倍比稀释备用煎剂至第“孔;⑤第1孔加液基150pg,第2至“孔各加100pg,第12孔加200pg;⑥第1至门孔各加Uu液体培养物50pg;⑦第I孔为阳性对照,第12孔为阴性对照。药物浓度从第2孔始依次为:100.00,50.00,25.00,12.50,6.25,3

7、.125,1.56,0.78,0.39,0.19mg/L,共10个稀释度;⑧每一孔均滴石蜡油,以可以覆盖液面为标准。电热保温箱内,37孵育24h后观察结果,直至阳性对照孔发生颜色改变,以最低无颜色变化孔的药物浓度定为MIC。所有实验均建立复孔,相差两个浓度及以上者视为失败,重新测定,相差一个浓度者取较小浓度。根据结果将敏感性较高的中药重新组合,重复实验过程。2结果5味中药体外抑菌实验结果:鱼腥草:MIC50=1・9625g/L,MIC90=3.125g/L,敏感率:85.71%;垂盆草:MIC50=1

8、.9625g/L,MIC90=3.125g/L,敏感率:71.43%;黄柏:MIC50=3・125g/L,MIC90=25g/L敏感率:71.43%;连翘:MIC50=6.25g/L,MIC90=12.5g/L,敏感率:44.29%;土茯苓:MIC50=50g/L,MIC90=100g/L,敏感率:0%;五药合剂:MIC50=0.7825g/L,MIC90=12.5g/L,敏感率:85.71%。鱼腥草+垂盆草:MIC50=0.7825g/L,MIC90=

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