机能学实验设计书

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1、限定条件设计实验项目书项目名称：胰岛素所致低血糖休克及药物和激素对血糖的影响项目组班级：2011级临床17班第三组项目完成人：李星李秀凤李沛李涛完成时间：2014年3月14日【实验目的】学习检测血糖的方法，同时观察胰岛素及药物和激素对血糖的影响，从而加深理解药物和激素影响血糖的机制。【实验原理】胰岛素的是胰岛β细胞所分泌的一种激素，其主要生理功能是调节血糖代谢，既能增加血糖的去路，又能减少血糖的来源，因此是血糖浓度降低；同时对脂肪和蛋白质的代谢也有调节作用。小鼠注射胰岛素，数分钟内血糖浓度即显著降低，若剂量交大，可导致低血糖休

2、克，发生精神不安，抽搦，而注射葡萄糖溶液或肾上腺素溶液后，小鼠很快能恢复正常。此外，胰高血糖素促进糖原分解和异生，具有升高血糖的作用；糖皮质激素抑制糖的利用，促进糖原异生，具有升高血糖的作用；甲状腺素促进糖的吸收和糖异生，也可升高血糖；生理剂量的生长激素能促进胰岛素的分泌，具有降低血糖作业，而过量的生长激素则抑制糖的作业，具有升高血糖的作用。【实验动物】小鼠【药品与器材】生理盐水，胰岛素针剂，20%葡萄糖溶液，1：10000肾上腺素溶液，胰高血糖素针剂，糖皮质激素针剂，甲状腺素针剂，生长激素针剂，血糖检测仪，小鼠手术器械，纱布

3、，注射针头，注射器，鼠笼。【实验步骤】1.选取30只体重在18-22g之间的健康小鼠作为实验对象；实验前小鼠禁食6h，不禁水，以避免食物引起血糖波动导致实验结果不准确。2.分组：随机选取5只小鼠做胰岛素所致低血糖休克实验，另取5只做药物和激素对血糖影响的实验。3.标记→称重→给药→观察结果记录数据。所给药物、注射部位、药物浓度见表1，剂量均为0.1ml／10g。给药完成后按时间间隔检测血糖值。【观察项目及数据记录】表1胰岛素和药物及激素对小鼠血糖影响数据记录表组别注射部位药物浓度血糖浓度随时间（min)变化0（给药前）5102

4、0401腹壁皮下NS2腹壁皮下低浓度胰高血糖素1u/kg3腹壁皮下G4腹壁皮下高浓度胰高血糖素（4u/kg）肾上腺素（1:10000）记录恢复时间5腹壁皮下记录休克时间NS6腹壁皮下胰高血糖素0.1mg/ml7腹壁皮下糖皮质激素5mg/ml8腹壁皮下甲状腺素40mg/ml9腹壁皮下生长素（生）0.05u/ml10腹壁皮下生长素（高）0.1u/ml注：1由于小鼠尾静脉注射困难，所以采取腹壁皮下诸神，注射后揉搓加快吸收。2尾部采血时用热水浸泡尾巴加快血液循环，有利于釆血。【数据处理】1绘制曲线图，观察注射不同药物和激素的小鼠血糖随

5、时间的变化。2用Excel软件计算各组血糖最值的均数和标准差（SD），并进行t检验，观察与对照组差别的显著性。【注意事项】1.注意胰岛素的用量，严密观察低血糖反应，痉挛出现时间及表现形式，痉挛多表现为前后肢僵直性抽搐，同时伴躯体旋转运动。2.一旦出现低血糖现象应立刻注射G和肾上腺素解救，以防小鼠死亡。3.小鼠尾部采血尽量少取，但要注意血滴必须完全覆盖测试区，血糖检测仪在90s内若未作任何操作便会自动关机。若自动关机时，已将血滴在试纸上，则弃用该试纸，用新的试纸重新测试。4.避免在直射的阳光下测试，移动电话等强磁场环境也会导致血

6、糖仪不能正常工作，应予以避免。5.血糖检测仪的血糖测定范围在0.6~33.3mmol/L（10~600mg/dl）。过高或过低报错。分别记为<0.6或>33.3mmol/L即可。6.尽量节约试纸。7.小鼠尾尖取血时，应先用45℃~50℃温水浸泡小鼠尾部。8.在注射完药物后即开始计时。【可行性分析】1.本组实验小鼠共10只，数量少适合一个实验（4-5人）操作。2.实验样本容量为一个班级（六组）或一个年级合计数量，样本容量足够，可进行t检验，得出结果。3.实验过程简单，思路清晰，且用时短（两小时左右）适合本科生操作。【思考题】1.

7、注射胰岛素为什么会引起低血糖性休克？2.为什么注射胰岛素后小鼠会发生精神不安、搐搦？而静脉注射葡萄糖溶液或肾上腺素溶液后，小鼠为什么又能很快恢复正常？3.进行胰岛素所致低血糖休克实验应注意什么？