条石鲷发育早期脂肪酸组成研究【开题报告】

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1、毕业论文开题报告水产养殖条石鲷发育早期脂肪酸组成研究一、选题的背景与意义条石鲷(Oplegnathusfasciatus，T.&S.)，俗称日本鹦鹉鱼，隶属于鲈型目(Perciformes)，石鲷科(Oplegnathidae)，石鲷属，主要分布于我国的黄海、东海，日本的北海道以南等海[1]。条石鲷体态优美、色泽艳丽、肉质细嫩、营养价值高，是一种具有较高经济价值的海产鱼类[2]。条石鲷皮下含有丰富的胶质，口感独特，深受消费者的青睐；其幼鱼体态优美、色泽鲜艳、条纹美丽，具有较高的观赏价值。在北方，可采用海上网箱、池塘与室内相结合的养殖模式，南方可以在海上进行

2、网箱养殖[3]。随着其养殖规模的不断扩大，条石鲷在营养价值和经济价值上的重要性也日益凸显。人体不能自身合成多不饱和脂肪酸，合理的脂肪酸摄入对身体健康极为重要。n-3族多不饱和脂肪酸(n-3PUFA)中，有代表性的物质包括二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)等[4]。EPA和DHA主要来源于海洋生物或深海鱼类，是生理作用最重要的n-3族脂肪酸[5]，对人体而言，具有降血压、抗血栓、预防心血管疾病及抗肿瘤等多种重要的生理功能，在降低血脂、降低心脑血管疾病发病率方面有显著作用[6]。研究证实DHA能直接影响人大脑功能,同时对多种疾病如动脉粥样化具有预

3、防和治疗功能[7]。同样，EPA对体内合成前列腺素和凝血烷等激素具有重要作用[8]。在能够提供脂肪酸的营养源中，海洋生物和深海鱼类富含多不饱和脂肪酸，尤其是EPA和DHA含量比淡水鱼高出许多[9]。通过研究比较海水鱼类各发育阶段的脂肪酸组成与变化,可以阐明该鱼在不同生长时期的脂肪酸需求,也可为人工饲料的科学配方提供理论支持。目前对各种海淡水鱼类的脂肪酸研究众多，但对条石鲷的脂肪酸组成研究方面少有人涉及。本课题拟通过分析条石鲷卵巢、受精卵、稚鱼、幼鱼以及成鱼体内的脂肪酸种类、组成以及含量变化规律，来探明条石鲷生长过程中脂肪酸的积累、转化和利用情况。这对评价条

4、石鲷不同发育阶段的营养状况有重要参考价值，也可为养殖条石鲷仔鱼开口饵料的配制提供理论指导。二、研究的基本内容与拟解决的主要问题：（一）基本内容：1.条石鲷不同发育阶段总脂的测定；2.条石鲷生长周期中各阶段脂肪酸组成特色和规律分析；3.综合分析不同发育阶段脂肪酸的组成以及变化规律与生长环境和营养需求的关系。（二）拟解决的主要问题：1.关注条石鲷的特定脂肪酸，是否有某类脂肪酸在每个阶段皆出现；2.鉴别先天拥有和后天获得的脂肪酸种类。3.早期发育时缺少的脂肪酸类型，幼鱼阶段缺少的种类及其与饵料的关系；三、研究的方法与技术路线：（一）研究方法：1.Bligh-Dy

5、er法：取1g鱼粉样品(干样)，加氯仿和甲醇各2mL，研磨后加入离心管(10mL)。用2mL氯仿冲洗研钵两次，冲洗液一并加入离心管。再加入35mL蒸馏水，摇动离心管使之充分混合，以2000r/min离心5min，分层后取氯仿层转入30mL带盖试管中，用氮气吹干。2.GC/MS分析：GC条件：进样口温度250℃，载气为纯度为99.999%的高纯氦，柱流速0.81ml/min,柱前压73.0KPa,柱起始温度150℃，保持3.5min，以20℃/min升至200℃，再以5℃/min升至280℃，保持37min。分流进样1μl，分流比50:1；MS条件：离子源选

6、用电子轰击（electronimpact,EI）源，电子能量为70eV，离子源温度200℃，接口温度250℃，选取全程离子碎片扫描（SCAN）模式，质量扫描范围为40~600，溶剂延迟3.5min。用化学电离（ChemicalIonization,CI）源分析时，反应气为甲烷。（二）技术路线：样品匀浆，冷冻干燥总脂的提取总脂的皂化GC条件：进样口温度250℃，载气为纯度为99.999%的高纯氦，柱流速0.81mL/min,柱前压73.0KPa,柱起始温度150℃，保持3.5min，以20℃/min升至200℃，再以5℃/min升至280℃，保持37min。

7、分流进样1L，分流比50:1脂肪酸甲脂化GC/MS分析测定结果定性分析CHCl3/CH3OH/H2O混合液抽提三次，调节比例，静置分层。上层液旋转蒸发得到总脂加入KOH甲醇水，60度水浴调节pH，氯仿/正己烷混合液抽提三次，上层液即为脂肪酸双蒸水抽提一次，旋转蒸发；加入BF3甲醇液，60度水浴加入饱和食盐水，分别以正己烷、氯仿/正己烷混合液抽提，提取上层液。加入无水硫酸钠后再提取上层液旋转蒸发，以1ml正己烷定容。MS条件：离子源选用电子轰击（electronimpact,EI）源，电子能量为70eV，离子源温度200℃，接口温度250℃，选取全程离子碎片

8、扫描（SCAN）模式，质量扫描范围为40~600，溶剂延迟3.5m