液相色谱柱维护保养及仪器冲洗

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1、液相色谱柱维护保养及仪器冲洗注意：每个色谱柱使用之前都要阅读一下使用说明书。色谱柱维护保养是很重要的，关系到色谱柱的使用寿命和检测结果的准确性，所以任何人用过色谱柱之后，一定要对色谱柱进行保养，管理人员和使用者互相监督。总的原则是色谱柱要轻拿轻放，避免损坏填料；另外没有使用的情况下，一定要保证两端的堵头封好。对于具体的色谱柱，下面列出常用色谱柱维护保养的具体方法和注意事项，以便使用者参考。C18柱（包括预柱）对于未启用的新的色谱柱，先用甲醇或乙腈以小流速（0.2ml/min缓慢升高到0.5ml/min）不接检测器冲洗色谱柱30分钟后，将色谱柱与检测器连上，流

2、速调为1.0ml/min冲洗色谱柱60分钟，然后不断降低有机相的比例（如80%、50%、10%甲醇或乙腈）各冲洗至少30分钟。若色谱柱暂时不用，则将色谱柱保存在高比例有机相中（如80%甲醇或乙腈，或者参考该色谱柱使用说明书中建议的溶剂中）；色谱柱使用时应用与分析流动相相同比例的有机溶剂（将缓冲盐溶液换成水）冲洗色谱柱15分钟，然后再换成流动相进行样品分析。样品分析完后，色谱柱维护与保养方法：流动相中若含酸、碱、盐类物质，则要先用10%甲醇或乙腈冲洗，1.0ml/min的流速冲洗至少30min，再用80%甲醇或乙腈冲洗至少30min，柱子保存在80%甲醇或乙腈

3、里（具体问题具体分析，洗脱程序可以是梯度洗脱程序，注意如果最后色谱柱保存的是高有机相，第二天用之前一定要用高水相过渡一下，再换成流动相）。如柱子长时间未用，则柱子保存在100%的甲醇或乙腈里。对于含有离子对试剂的流动相如庚烷磺酸钠和十二烷基磺酸钠等，柱子应采用梯度洗脱，一般用乙腈-水系统（水：90-10；乙腈：10-90）冲洗时间要稍长些，然后保存于90%乙腈。需要特别强调的是，目前所有的C18柱均不能用纯水进行长时间（1小时以上）冲洗，除非有专门耐水的专用柱，否则，用纯水长时间冲洗色谱柱，会导致色谱柱的固定相流失和相塌陷，损坏色谱柱。精选范本,供参考！大多

4、数反相色谱柱的pH稳定范围是2~8，有的pH稳定范围会宽，具体pH稳定范围参照色谱柱说明书，当分析条件的pH值偏小或偏大时，可选择pH稳定范围宽的柱子进行分析，否则，会损坏色谱柱。在每次进行样品分析时，要保证流动相（包括盐、缓冲盐、酸等）与色谱系统及柱内的保存液要互溶，如不能互溶，则需要用一定比例的有机溶剂（不低于10%）或与分析流动相相当的有机溶剂对柱子进行过渡，否则，流动相中的盐会在系统与柱内析出，影响样品分析或损坏柱子。硅胶柱、正相手性色谱柱【包括AS-H、AD-H、OD-H系列，5DMB、5TBB系列，OA系列（如OA-3100、OA-3300）】对

5、于未启用的新的色谱柱，在保证系统是正相的情况下，可先用异丙醇小流速（流速为0.1~0.3ml/min）冲洗色谱柱约15分钟，然后换上正相流动相平衡进行色谱分析。硅胶柱及正相手性柱不能过水相（对于sepax系列的硅胶柱，可以过低比例的水相（有机相不低于50%）），接上色谱柱之前要保证液相色谱系统中的所有管路为正相流动相【如是不含盐的反相溶液（如水/乙腈；水/甲醇），先用异丙醇冲洗所有管路，然后用正相流动相冲洗所有管路，最后再接上色谱柱；若反相流动相中含有缓冲盐（如缓冲盐/乙腈；缓冲盐/甲醇），先用纯水冲洗HPLC系统，然后用异丙醇冲洗所有管路，最后用正相流动相

6、冲洗，再接上色谱柱。】使用结束后，先用异丙醇冲洗色谱系统与色谱柱，再用色谱级的正己烷冲洗色谱柱，（或者直接用正己烷－异丙醇（90：10）冲洗，并保存在正己烷－异丙醇（90：10）中）。如长时间未用，则保存在正己烷中。需要特别强调的是，冲洗硅胶柱时，不能用纯水或含水的有机溶剂或缓冲盐体系冲洗色谱柱，只能用纯有机溶剂冲洗色谱柱（对于sepax系列的硅胶柱可以用不低于50%有机相冲洗色谱柱），最后保存在纯的有机溶剂中。在进行样品分析前，一定要保证流动相与色谱系统及色谱柱柱内的保存液要互溶，如不互溶，则需要用异丙醇过度，否则，会影响色谱系统与损坏柱子。反相手性色谱柱

7、（如：CHIRALCELOZ-3R）：同C18柱阴离子柱和阳离子柱：目前常见的阴子柱有watersIC-PakTM精选范本,供参考！anion，阳离子柱有磺酸基阳离子柱与waters阳离子交换柱（钙型）。对于watersIC-PakTManion和waters阳离子交换柱（钙型），新柱子使用前用高纯水小流速（0.2ml/min缓慢升高到0.5ml/min）冲洗约30分钟，然后再换成流动相平衡色谱柱。在冲洗色谱柱之前，要保证整个色谱系统为纯水相。对于磺酸基阳离子柱（含有硅胶基柱的），使用前用甲醇或乙腈小流速冲洗30分钟，然后高纯水替换系统冲洗，然后接上色谱柱。

8、分析完样品后，对于watersIC-PakTMani