薄层色谱鉴别.ppt

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1、薄层色谱法概念薄层色谱法(TLC)将固定相(如硅胶)薄薄地均匀涂敷在底板(或棒)上，试样点在薄层一端，在展开罐内展开，由于各组分在薄层上的移动距离不同，形成互相分离的斑点，测定各斑点的位置及其密度就可以完成对试样的定性、定量分析的色谱法。薄层色谱法是一种吸附薄层色谱分离法，它利用各成分对同一吸附剂吸附能力不同，使在移动相（溶剂）流过固定相（吸附剂）的过程中，连续的产生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附，从而达到各成分的互相分离的目的。基本原理在给定的条件下（吸附剂、展开剂、板层厚度等），化合物移动的距离和展开剂移动的距离之比是一定的，即Rf值是化合物的物理常数，其大小只

2、与化合物本身的结构有关，因此可以根据Rf值鉴别化合物。比移值组分二组分一被分离混合物薄层色谱展开示意图薄层色谱法优点操作简单，定性结果直观缺点有一定毒性、定量方面的精密度较差实验仪器⑴载板⑵固定相（吸附剂）或载体⑶涂布器⑷点样器⑸展开室实验操作实验操作1薄层板的制备吸附剂（硅胶）调制玻璃板涂布调制时慢慢搅拌，勿使产生气泡。均匀涂布在玻璃板上，摇动摊平，晾干。使用前放入烘箱内，在105-115℃左右烘干40-50min。冷却后使用。粘合剂、添加剂固定相（吸附剂）的选择纤维素、淀粉硅酸镁硫酸钙硅胶佛罗里硅土氧化镁氧化铝活性炭对极性有机物的吸附作用增强2供试品的制备：按照

3、各药品质量标准规定的方法进行提取分离。制得的供试品应放置于密塞的小瓶中，防止溶剂挥发影响点样量。3对照品溶液的制备：可按质量标准规定精配成一定浓度的对照品溶液，置密塞小瓶中备用。标准药材对照溶液，一般需照供试品的制备方法制备。在使用对照品溶液时一定要注意将取样的毛细管充分洗干净，防止造成对照品污染。4点样：按规定吸取溶液用定量点样毛细管或色谱用微量注射器点样于薄层板上。点样基线距底边的距离为1～2cm，点间距一般为1.0-1.5cm。点样直径一般应小于5mm。两个以上的点样应在同一水平线上，并与薄层板的底边平行。点样时必须注意勿损伤薄层表面。点样示意图对照品样供试品

4、样点样直径≤5mm1cm≤点间距≤1.5cm1-2cm自动点样器毛细管点样5展开展开室展开剂（流动相）的选择：主要根据样品中各组分的极性、溶剂对于样品中各组分溶解度等因素来考虑。展开剂的选择正己烷环己烷四氯化碳甲苯氯仿正丁醇乙酸乙酯丙酮乙醇甲醇水溶剂的洗脱能力随溶剂的极性增大而增强在一块薄层板上进行试验：若所选展开剂使混合物中所有的组分点都移到了溶剂前沿，此溶剂的极性过强；若所选展开剂几乎不能使混合物中的组分点移动，留在了原点上，此溶剂的极性过弱。理想的展开剂应能使混合物分离后各组分的Rf值相差尽可能大。各组分理想的比移值在0.2-0.8之间。当一种溶剂不能很好地展

5、开各组分时，常选择用混合溶剂作为展开剂。先用一种极性较小的溶剂为基础溶剂展开混合物，若展开不好，用极性较大的溶剂与前一溶剂混合，调整极性，再次试验，直到选出合适的展开剂组合。1-2cm展开示意图展开剂要接触到薄层板下沿，但切勿接触到样点。盖上盖子，展开。观察展开情况。取出薄层板上升法倾斜上行法下降法展开方式示意图影响展开的因素A相对湿度的影响B溶剂蒸汽的影响C温度的影响D展距的影响展开中斑点异常现象的探讨（1）边缘效应：同一种化合物，在同一块薄层板上，用同一展开剂，在同一层析缸内展开后，薄层中部的斑点比薄层两侧边缘处的斑点的Rf值小即为边缘效应。常用的解决办法：①增

6、加展开室（层析缸）中溶剂蒸气饱和度。②选用较合适的单一展开剂代替混合展开剂。③采用共沸混合展开剂代替一般混合展开剂。④在薄层板的两边各刮去约5mm的吸附剂有助于防止边缘效应。（2）拖尾现象（3）斑点形成念珠状（4）同一块薄板上出现比移值相差悬殊的斑点（5）斑点比移值不稳定（6）斑点异形6显色A光学检出法a自然光b紫外光c荧光B蒸汽显色法C物理显色法D试剂显色法a喷雾显色b浸渍显色(通用显色剂硫酸溶液、0.5%碘的氯仿溶液、中性0.05%高锰酸钾溶液、碱性高锰酸钾溶液)三用紫外仪显色用喷雾器举例麻杏石甘冲剂中麻黄的鉴别[处方]麻黄31g苦杏仁31g生石膏157g甘草3

7、1g[鉴别]供试品溶液制备：取本品10g，加水50ml使溶解，加氨水1ml使成碱性，用乙醚提取2次，每次10ml，合并提取液，用无水硫酸钠脱水，过滤，滤液挥去乙醚，残渣加甲醇2ml，作为供试品溶液。对照品溶液制备：取盐酸麻黄碱对照品加甲醇制成每1ml含1mg的溶液，作为对照品溶液。展开系统：硅胶板；以氯仿－甲醇－浓氨水试液（20:5:0.5）为展开剂；显色：茚三酮试液，在105℃加热至斑点清晰。显色结果：供试品溶液中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的红色斑点。盐酸麻黄碱供试品薄层色谱法应用1食品和营养2药物和药物代谢3化学和化工4医学和临床5毒物分