Enzyme 2 淀粉酶活性之测定还原糖(ex葡萄糖`果糖).ppt

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1、Enzyme2:澱粉酶活性之測定還原糖(ex:葡萄糖、果糖)本氏液(Benedict’ssolution)Benedict’ssolution內含之Cu2+會被還原糖的官能基還原形成Cu2O之紅色沉澱顏色變化:藍→藍綠→綠→褐→橙→紅(Cu2O)還原糖之多寡:少——————————————→寡原理+△abc各加入1ml3%澱粉液a:加入1ml3%α-amylaseb:加入1ml新鮮唾液c:加入1mlddH2O放置加熱器反應37℃30mina、b、c3個試管各加入10滴的本氏液置於水浴加熱並觀察各管顏色之變化步驟結果問題實驗觀察結果澱粉結構與種類澱粉酶

2、種類Enzyme2:澱粉酶最適pH之測定藉由在不同的pH值的條件下,利用還原糖的測定(DNS呈色法),在A540nm測吸光值,進而得知酵素最適pH值。原理澱粉α-amylase葡萄糖、麥芽糖、異麥芽糖及6~9個葡萄糖組成的寡糖可切斷澱粉中α-1,4糖苷鍵步驟再將各管分別加入100μlDNSreagent,沸水浴5min測OD540下吸光值1%澱粉:將1g澱粉溶於100mlddH2O,加熱100℃至澱粉糊化先各加入500μl1%澱粉液200μl100mM磷酸緩衝液(pH=5,6,7,8,9)以及ddH2O再加入100μl1%NaClabcdef取6支試

3、管將各試管放置37℃下,保溫5mina~e管加入100μl1%α-amylase;f管100μlddH2O37℃下反應30min結果問題澱粉酶之最適pH酵素與基質有哪些關係

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