蓝莓多酚的提取及检测.doc

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1、蓝莓多酚的提取及功能性研究进展蓝莓(Blueberry)属杜鹃花科越橘属，多年生落叶或常绿灌木，果实呈深蓝色，披白霜，近圆形，果肉细腻，果昧酸甜，营养丰富。蓝莓的种植历史相对较短，美国是最早栽培蓝莓的国家，距今也仅有100多年的历史。20世纪50年代我国东北出产的野生笃斯越桔开始用于造酒，80年代我国开始引进国外品种，目前蓝莓在我国已得到广泛种植。1981年，Haslam首次提出植物多酚这一术语，它将多酚分为单宁及其相关化合物（如单宁的前体化合物和聚合化合物）和聚黄烷醇类（含缩合单宁和相关化合物）两大基本类型．多酚是植物体内复杂

2、的酚类次生代谢产物，具有多元酚结构，主要存在于植物的皮、根、叶、壳及果肉中。有关多酚的分类方法有很多种，类黄酮、花青素、酚酸等都属于多酚。近几年，国外学者根据多酚结合方式和萃取方法的不同，将其分为可萃取多酚(extractablepolyphenols)和不可萃取多酚(non-extractablepolyphenols)，所谓可萃取多酚主要是指通过简单的有机溶剂萃取或水就可以获得的处于游离状态的多酚，不可萃取多酚主要是指结合于细胞壁上的一些水合单宁酸和原花青素，需通过化学或者酶处理方法，打破多酚物质与细胞壁结合的化学键，才将其

3、分离出来的部分，目前，我们通常研究的多酚实际上是指可萃取多酚，而没有考虑不可萃取部分。此外，多酚受组成复杂、聚合度不同及原料结构性质差异等因素影响，至今尚无一种方法能适用于所有多酚的分离。1蓝莓中多酚的萃取1977年英国学者ColinF．Timberlake开始研究水果中的多酚，发现越橘属植物中含有花青素、芍药素、花翠素、牵牛色素、锦葵色素等多酚类物质。1988年中科院南京植物研究所引种兔眼蓝浆果，并对其中的花青素、花色苷等多酚成分进行检测。1996年加拿大研究中心采用聚乙烯萃取法，研究发现低丛蓝莓中花青素类的含量为6.08mg

4、/g-10.22mg/g。刘文旭、黄午阳等使用80%乙醇对蓝莓进行多酚萃取，28℃震荡24h后，以没食子酸为标物，获得蓝莓全果中总酚含量为(9.44+0.22)rag/1009DW。Matsuo等使用甲醇作为初步溶剂萃取蓝莓叶冻干粉中的多酚，提取3次后过滤，然后使用70%丙酮进行进一步的萃取过滤，最终测得冻干的蓝莓叶中多酚的含量为11.3%%。随着科技的进步，人们开始使用更先进的方法如酶法提取、超声辅助萃取法、微波辅助萃取法、减压萃取法等萃取蓝莓多酚，这使多酚的萃取率得到明显提高。李颖畅等使用酶法提取蓝莓果中的花色苷，结果表明：

5、在纤维素酶用量为5mg/g，料液比为1：8(g/mI)，pH为5.0，提取时间60min，酶解温度450C的条件下，提取2次，花色苷萃取率可达350rag/1009FWll叫。赵尔丰等以蓝莓果渣为原料，采用酶一超声波辅助提取法提取果渣中的花青素，在纤维素酶用量为5mg/g，温度50℃，料液比1:10的条件下，采用超声震荡条件，提取功率为200W，时间20min，然后补充加入40%乙醇，超声波强化提取10min，所得蓝莓果渣中花青素的提取率为4.12%，解利利等使用微波辅助萃取法，将蓝莓冻果进行整果破碎后，加入无水乙醇用微波提取法

6、提取多酚，干燥后测得单宁的质量分数为0.29%，总单体花色苷为1.54%，黄酮为0.22%。冯进等采用减压萃取法对蓝莓叶中的多酚进行萃取条件优化，最终得出最佳提取条件为：在真空度-0.07MPa，乙醇浓度60%，pH3.5，料液比1:50，物料粒度80目—100目的条件下，提取60min，多酚提取率为81.47%，多酚纯度为45.32%，其中多酚纯度比常压提取高6.57%。由于原料及萃取工艺的不同，蓝莓多酚的萃取率差别较大，因此选择合适的萃取工艺显得尤为重要。上述方法萃取的多酚（花青素）均指的是可萃取部分，早在20世纪70年代，

7、不可萃取原花青素就在豆科植物中被发现，但由于当时缺乏先进的分析及检测手段而未受到重视，直至上世纪90年代国外科学家才开始对蔬果中的不可萃取多酚进行深入研究。1996年爱尔兰科学家SaraMatthews等提出植物中存在可萃取花青素和不可萃取花青素，他用树皮作为研究对象从甲醇萃取后的渣中使用硫解法和凝胶色谱法萃取并测定不可萃取花青素，得到的结论是有近97%的树皮中含有不可萃取花青素。，西班牙学者SaraArranz指出不可萃取多酚主要是指存在于膳食纤维和蛋白质中的可水解单宁和原花青素L31。2007年FulgencioSaura-

8、Calixto等人先使用甲醇和丙酮萃取蔬果中的可萃取多酚，然后使用5ml/L的HCl-丁醇溶液，1000C水浴3h，萃取结合原花青素(Condensedtannins)，又用甲醇／硫酸@0：l@溶液萃取可水解单宁(Hydrolysablepolyphe-n01）