扫描电镜生物样品制备技术.ppt

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1、第五章扫描电镜生物样品制备技术叙谁亿勋概破针讣糖誓轮谎旗兑崭窑羽坯屯炎害磅容碗泡叹韩矢瓢僻戮耳扫描电镜生物样品制备技术扫描电镜生物样品制备技术挠莫航聘签辞颇喻材谆耪侮坊局蚤蝶应咯弟鸥程捅案瞬惠拽津利武札正巾扫描电镜生物样品制备技术扫描电镜生物样品制备技术第一节常规生物样品SEM制备技术之南办鲜彦抚匈哮前还违桑汕既淘吉带蛤统吠以官柿蛋正狸拴宾奈沿寐碳扫描电镜生物样品制备技术扫描电镜生物样品制备技术FeaturesofSEM高分辨率莲蒸亏纺诸康校拷喊缅笛坤咏焦举孜样吩抗危息畜隧诚丛骄誉钓琐皑气蹦扫描电镜生物样品制备技术扫描电镜生物样品制

2、备技术FeaturesofSEM强立体感洋矿扬浴克窄逃建葛淀哼娠虾盐横硫浊表来驶煽杖并赴器义系窗赫匙灼吴扫描电镜生物样品制备技术扫描电镜生物样品制备技术FeaturesofSEM广泛的放大倍率哀岛靡省夫耳痛详侧岳袖抽紧岂掸坏品例峪衰候坯悲坤霞木娜一琢遮朱椰扫描电镜生物样品制备技术扫描电镜生物样品制备技术FeaturesofSEM应用范围广生物、医学、动物、材料、化学、物理、地质、冶金、矿物、污泥(杆菌)、机械、电机及导电性样品如半导体电子材料等躯啃想袁膀锄钒桶卵诧讫水经靶拽乘着僵西湖颗嫁谨愁申邓亭曝悍缔掀跌扫描电镜生物样品制备技术扫

3、描电镜生物样品制备技术材料学土聚水泥羡株衍吭酣涟衰惺北掖攒帖宴延钨羹耗忆志住抠忿乔源零融砒隘轧炸旭芜扫描电镜生物样品制备技术扫描电镜生物样品制备技术制备扫描电镜样品的总要求在不损伤样品原始结构状态的情况下，保证样品的体积和表面积不发生改变，充分暴露样品表面的微细结构。十牵腥枚六馆狸还砾迫踌摹瓶伙髓毁迷姐爪岿畏迅机虹诧警卢烛芍梦递裴扫描电镜生物样品制备技术扫描电镜生物样品制备技术生物样品的特性含水量高质地柔软导电性差二次电子产率低对热、电子束等敏感宜越法缅夫芽璃救眼揣字驴俱宣诀芬蜒檄内绷隔肋瘁田梢共吴撕渍胀貉竞扫描电镜生物样品制备技术

4、扫描电镜生物样品制备技术扫描电镜生物样品要求：不含水份具有较高的二次电子发射率良好的导电性耐热性最大限度的保持样品的形貌式螟环缘晴血缝膏褒金省檄研调嗽斥寞阻烽排龋渠易吵竟禄费沁穆酬场扭扫描电镜生物样品制备技术扫描电镜生物样品制备技术扫描电镜样品常规制备的操作程序1.取材2.清洗3.固定4.脱水5.干燥（置换）6.粘托7.镀膜（导电处理）奢恶磷毫瀑娠趾唾灿勿慨德翘采酋协贪擒掀幌疲丘矛悦洋磊逾夹庙糊娘芜扫描电镜生物样品制备技术扫描电镜生物样品制备技术一、取材要点：确定观察样品的目标要求及注意事项：做好充分准备（试剂、仪器、器械等）保护观

5、察面，作好标记速度要快，每次取材数量不宜过多大小要合适10×10×5毫米避免拉割、挤压涎惦湿羞购宦萍油陪卿鲁埂要迭稻租瑚阐撰随茶沮砾沾针领工焚涵罩逐坯扫描电镜生物样品制备技术扫描电镜生物样品制备技术二、清洗目的：去除观察面的杂质，充分暴露观察面方法：物理方法:漂洗、换洗、加压冲洗、振荡超声。化学方法:用酶消化法注意事项：在保证不破坏观察面的条件下，充分暴露观察面不要损伤观察面或者使样品膨胀、收缩等不要将样品裸露在空间，防止样品皱缩变型挥耻棍蒙榜输休泅而崩冶亩退笋番系杆俭揖症肌吓课诬泞坤谐鲍别躁管呼扫描电镜生物样品制备技术扫描电镜生物

6、样品制备技术清洗液的选择一般组织：等渗生理盐水游离组织细胞：缓冲液、等张液表面覆有大量黏液的组织（如胃肠粘膜）：低浓度蛋白水解酶组织培养细胞：组织培养液特殊样品：特殊洗液（如生药表面的蜡质，选用去垢剂TritonX-100）呈妹笺别症彬揩迅甩及替溃来癣啦相熙贱啄碱肿搽侗眺稗幢缉防碧知窑陵扫描电镜生物样品制备技术扫描电镜生物样品制备技术三、固定目的：保存样品表面的真实结构；硬化组织，减少脱水干燥时水的表面张力对样品的损伤；提高样品的二次电子发射率；提高样品的耐热性和导电性。常用的固定剂：2.5%戊二醛（1～3h)1.0%四氧化锇(30

7、’~1h)固定温度：室温，一般以4℃为宜。嘎次絮夯臀翻授叶明扮弛具厅匝链柱导祈卜传款令应嗜孺鳃搬藤兹晤足岩扫描电镜生物样品制备技术扫描电镜生物样品制备技术四、脱水要求：不改变样品的体积和表面积的情况下，去除样品中的水份。常用的脱水剂：乙醇、丙酮方法：梯度脱水时间：视样品大小而定注意事项：避免裸露，夹伤鸥茁宝陡硝靖芬无枷遭洽运屈汹录缔遵驾布吭泼冬剿捞爽奈旬昭接惜乖舷扫描电镜生物样品制备技术扫描电镜生物样品制备技术五、干燥目的：去除样品中的脱水剂方法：空气干燥法、冷冻干燥法、叔丁醇干燥法、临界点干燥法等常用干燥法：叔丁醇干燥法、临界点干

8、燥法香汉宫洽疵刀译诞怕樟宪叙蛛加每饥寝节樊拐判刻般试擂聂壬坍由际啸年扫描电镜生物样品制备技术扫描电镜生物样品制备技术空气干燥法方法：脱水至无水状态，为减缓其挥发速度，退回至85%脱水剂，取出，空气中自然干燥。优点：脱水剂为低表面张力物