科学史话稳态概念的提出和发展 (2).ppt

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1、基因工程基因工程的步骤目的基因的检测和表达4提取目的基因1目的基因和运载体结合2将目的基因导入受体细胞3提取目的基因直接分离法(多为原核)反转录法根据已知氨基酸序列合成DNA最早的基因工程人工合成法(多为真核,可为原核)鸟枪法(散弹射击法)不管是哪种方法得到目的基因,为了大量复制,我们可以采取PCR技术在短时间内扩增目的基因。人工合成基因的原因目的基因运载体目的基因与运载体结合构建重组DNA多个限制酶切点在宿主细胞中复制并稳定保存具有某些标记基因要求要求1满足人类某一要求的基因要能方便地在受体细胞中检测

2、到有没有目的基因。要求1要求2要能很好地将目的基因导入受体细胞内。受体细胞是动物的细胞,运载体最好选病毒。如果不是,可以选择质粒。目的基因与运载体结合粘性末端+往往需要同一种限制性内切酶来处理质粒及其上的标记基因目的基因重组质粒需要DNA连接酶来处理+将目的基因导入受体细胞因受体细胞的来源不同,这之后采取的手段也不尽相同,在确认目的基因检测和表达正常后:①直接发酵;②进行植物组织培养;③动物细胞培养及胚胎移殖得转基因动物,从而最终获得产品;④进一步导入受体细胞注意受体细胞接受重组DNA的细胞可以是体细胞

3、,也可以是受精卵。可在生物体外,也可在植物体内直接操作细真菌细胞动物细胞植物细胞目的基因的检测和表达目的基因的检测目的基因的目的基因的表达成功需要的性状或产品受体细胞内是否有标记基因转录和翻译目的基因的检测和表达基因工程的别名操作环境操作对象操作水平基本过程目的变异实质基因拼接技术或DNA重组技术生物体外基因DNA分子水平定向改造生物的遗传性状(形成人类需要的基因产物)剪切→拼接→导入→表达基因重组谢谢您!

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