线粒体和液泡系的超活染色与观察.ppt

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1、线粒体和液泡系的超活染色与观察NO.2细胞生物学实验2010.3.29实验目的1.观察动、植物活细胞内线粒体、液泡系的形态、数量与分布；2.学习一些细胞器的超活染色技术。实验原理2.詹纳斯绿B1.活体染色体内活染体外活染3.中性红实验用品1.材料：人口腔上皮细胞，黄豆幼根根尖。2.试剂：Ringer溶液1/3000中性红溶液1/5000詹纳斯绿B溶液3.器材：显微镜、恒温水浴锅、剪刀、镊子、双面刀片、载玻片、盖玻片、表面皿、吸管、牙签、吸水纸。实验方法1.人口腔粘膜上皮细胞线粒体的超活染色与观察(1)取清洁载玻片放

2、在37℃恒温水浴锅的金属板上，滴2滴1/5000詹纳斯绿B染液。(2)实验者用牙签宽头在自己口腔颊粘膜处稍用力刮取上皮细胞，将刮下的粘液状物放入载玻片的染液滴中，染色10~l5min(注意不可使染液干燥，必要时可再加滴染液)，盖上盖玻片，用吸水纸吸去四周溢出的染液，置显微镜下观察。(3)在低倍镜下，选择平展的口腔上皮细胞，换高倍镜或油镜进行观察。实验方法2.黄豆根尖细胞液泡系的超活染色与观察(1)实验前，把黄豆培养在培养皿内潮湿的滤纸上，使其发芽，胚根伸长到1cm以上。(2)用双面刀片把初生的小麦或黄豆幼苗根尖(约

3、1~2cm长)小心切一纵切面，放入载玻片中内的1/3000中性红染液滴中，染色5~10min。(3)吸去染液，滴一滴Ringer液，盖上盖玻片，并用镊子轻轻地下压盖玻片，使根尖压扁，利于观察。(4)进行镜检。实验结果1.人口腔粘膜上皮细胞线粒体的光镜观察。2.黄豆根尖细胞液泡系的光镜观察。作业1.用一种活体染色剂对细胞进行超活染色，为什么不能同时观察到线粒体、液泡系等多种细胞器？2.小麦或黄豆根尖经中性红超活染色，为什么看到生长点的细胞中液泡多，而且染色深，延长区细胞中液泡数量变少，染色浅？