水果中还原糖的测定 第四组.ppt

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1、水果中还原糖的测定GB5009.7-2003组员：平阳阳钟瑶瑶赵灵丽掌握直接滴定法测定还原糖的原路及其方法实验目的实验原理试样经除去蛋白质后，在加热条件下，以次甲基蓝作指示剂，滴定标定过的碱性酒石酸铜溶液(用还原糖标准溶液标定碱性酒石酸铜溶液)，根据样品液消耗体积计算还原糖量。试剂盐酸碱性酒石酸铜甲液:称取15g硫酸铜(CUS04.5H20)及.05g次甲基蓝，溶于水中并稀释至1000mL.碱性酒石酸铜乙液:称取50g酒石酸钾钠、75g氢氧化钠，溶于水中，再加人4g亚铁氰化钾，完全溶解后，用水稀释至1000mL,贮存于橡胶塞玻璃瓶内乙酸锌溶液:称

2、取21.9g乙酸锌，加3mL冰乙酸，加水溶解并稀释至100mL亚铁氰化钾溶液:称取10.6g亚铁氰化钾，加水溶解并稀释至100mL,葡萄糖标准溶液:准确称取1.0000g经过96℃士2℃干燥2h的纯葡萄糖，加水溶解后加人5mL盐酸，并以水稀释至1000ml。此溶液每毫升相当于1.0mg葡萄糖果糖标准溶液:按3.6操作，配制每毫升标准溶液相当于1.0mg的果糖。乳糖标准溶液:按3.6操作，配制每毫升标准溶液相当于1.0mg的乳糖(含水)转化糖标准溶液:准确称取1.0526g纯蔗糖，用100mL水溶解，置于具塞三角瓶中加5ml盐酸(1+1)在68"C

3、-70℃水浴中加热15min，放置至室温定容至1000mL，每毫升标准溶液相当于1.0mg转化糖仪器酸式滴定管:25mL可调电炉:带石棉板分析步骤1.试样处理汽水等含有二氧化碳的饮料:吸取100.0mL试样置于蒸发皿中，在水浴上除去二氧化碳后，移人250mL容量瓶中，并用水洗涤蒸发皿，洗液并人容量瓶中，再加水至刻度，混匀后备用2.标定碱性酒石酸铜溶液：吸取5.0mL碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液，置于150mL锥形瓶中，加水10mL，加人玻璃珠2粒，从滴定管滴加约9mL葡萄糖或其他还原糖标准溶液，控制在2min内加热至沸，趁热以每两秒1滴的速度

4、继续滴加葡萄糖或其他还原糖标准溶液，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录消耗葡萄糖或其他还原糖标准溶液的总体积，同时平行操作三份，取其平均值，计算每10mL(甲、乙液各5mL)碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖的质量或其他还原糖的质量(mg)[也可以按上述方法标定4mL-20mL碱性酒石酸铜溶液(甲乙液各半)来适应试样中还原糖的浓度变化」3.试样溶液预测吸取5.0mL碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液，置于150mL锥形瓶中，加水10mL，加人玻璃珠2粒，控制在2min内加热至沸，趁沸以先快后慢的速度，从滴定管中滴加试样溶液，并保持溶液沸腾状态，待溶液颜色变

5、浅时，以每两秒1滴的速度滴定，直至溶液蓝色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积当样液中还原糖浓度过高时应适当稀释，再进行正式测定，使每次滴定消耗样液的体积控制在与标定碱性酒石酸铜溶液时所消耗的还原糖标准溶液的体积相近，约在10mL左右。当浓度过低时则采取直接加人10mL样品液，免去加水10mL，再用还原糖标准溶液滴定至终点，记录消耗的体积与标定时消耗的还原糖标准溶液体积之差相当于10mL样液中所含还原糖的量4.试样溶液测定吸取5.0ML碱性酒石酸铜甲液及5.0mL乙液，置于150mL锥形瓶中，加水10ml，加人玻璃珠2粒，从滴定管滴加比预测体积少1m

6、L的试样溶液至锥形瓶中，使在2min内加热至沸，趁沸继续以每两秒1滴的速度滴定，直至蓝色刚好褪去为终点，记录样液消耗体积。同法平行操作三份，得出平均消耗体积计算结果试样中还原糖的含量(以某种还原糖计)按式(1)进行计算AmXV/250X1000X100式中:X—试样中还原糖的含量(以某种还原糖计)，单位为克每百克(g/100g);A碱性酒石酸铜溶液(甲、乙液各半)相当于某种还原糖的质量，单位为毫克(mg);m—试样质量，单位为克(9);V测定时平均消耗试样溶液体积，单位为毫升(mL),计算结果表示到小数点后一位。数据处理碱性酒石酸铜溶液的标定项目

7、/序号123V葡萄糖mL15.0114.8014.70V葡萄糖mL平均14.84C葡萄糖mg.mL-11.0Fmg14.84试样溶液测定项目/序号123m试样g4.08V定容mL250V预测mL10.00V预mL14.38V测定mL13.9813.9814.02V测定（平均）mL13.99X4.381、碱性酒石酸铜甲液中的硫酸铜的铜离子为此化学反应定量的标物，次甲基兰为氧化还原指示剂（氧化型为蓝色、还原型为无色）2、此实验为什么要在碱性条件下进行，主要是在酸性条件下，还原糖会形成酯（不具有氧化性或氧化性不强的含氧酸如乙酸）、有机酸（如被硝酸氧化）

8、，样液中的二糖及多糖与淀粉会水解成还原糖，结果可想而知。3、碱性酒石酸铜乙液中的酒石酸钾钠的作用：既然实验得在碱性条件下进行，那么硫酸铜