3-1菊花的组织培养.doc

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1、3-1菊花的组织培养专题3植物的组织培养技术课题1菊花的组织培养[课题口标]说明植物组织培养的基本原理,学习植物组织培养的基木技术,进行菊花或其他植物的组织培养。[课题垂点与难点]植物组织培养过程屮使用的无菌技术。基础知识(一)植物组织培养的基木过程1.植物组织培养的相关概念(1)细胞分化:植物的个体发育过程小,细胞在、和上都会出现稳定性的差异,形成这些差异的过程就叫做细胞分化。细胞分化是基因的结果。(2)细胞的全能性:的植物细胞仍然具有发育成为的潜能。细胞全能性是组织培养的基本原理。(3)愈伤组织:由离体的植物器官、组织或细胞在一定的培养条件下经过过程形成

2、的组织,就叫愈伤组织,愈伤组织的细胞排列疏松而无规则,是一种的呈无定形状态的。(4)脱分化:由的植物组织或细胞产生的过程,称为脱分化,又叫去分化。(5)再分化:脱分化产生的继续进行培养,又可以重新分化成,这个过程叫做再分化。(6)外植体:用于离体培养的植物。2.植物组织培养的基木过程(二)影响植物组织培养的因素1•内部因素:不同的植物组织,培养的难易程度差别很人。同种植物材料,,等也会影响实验结果。菊花的组织培养,-般选择2.外部因素:(1)营养条件:常用的是培养基,其主要成分包括:,如;,女口;等。(2)植物激索:植物激索屮和是启动细胞分裂、脱分化和再分化

3、的关键性因索。、以及等,都会影响实验结果O(3)坏境因素:、、等条件也能影响植物组织培养°菊花组织培养,…般pll控制在—;温度控制在;每天用日光灯照射小时。思考1:MS培养基屮各营养成分各有什么作用?与微生物培养基的配方相比,有什么不同?1专题3植物的组织培养技术思考2:生长素使用的先后顺序、用暈比例不同分别会造成哪些影响?实验操作(一)制备MS固体培养基:实验室一般使川°C保存的配制好的來制备1•配制各种母液。配制母液时,大量元索浓缩—倍,微量元索浓缩—倍。常温保存。类、类以及用量比较小的可以按照lmg/ml的质量浓度单独配制母液。用母液配制培养基时,需

4、要根据各种母液的,计算用量。2.配制培养基。配制1LMS培养基时,将称量好的琼脂加入800mL蒸憾水,加热熔化,然后加入蔗糖30g,依次加入母液,定容至WOOmL。调节—,然后分装到锥形瓶屮,每瓶分装__或。:3.灭菌。将分装好的连同其他(二)外植体消毒过程:流水冲洗f(可加少许洗衣粉)软刷刷洗f流水冲洗-用吸干外植体表血一体积分数为_的酒精屮摇动2〜3次,持续-无菌水清洗一无菌吸水纸吸T外植体表面f质量分数为0.1%的溶液屮1〜2minf无菌水屮至少清洗3次,漂净。思考3:对培养材料进行消毒过程小,是不是强度越人越好,为什么?注意:即使对于有经验的操作人员

5、,操作后出现培养物被污染的情况也常有。一般情况下,细菌污染可能是由接种人员造成的,如未戴口罩,接种时说话,或手及器械消毒不严等。真菌污染可能是植物材料灭菌不当。思考4:为什么说无菌技术是植物组织培养能否获得成功的关键?(三)接种接种前,用体积分数70%的将T作台擦拭,然后点燃酒精灯。所有的接种操接种操作:插入外植体时应注意•不要O每个锥形瓶接种(四)培养接种后的锥形瓶最好放在中培养"培养期间—消毒,温度扌在・C,并且每天用光照°(五)移栽2专题3植物的组织培养技术思考5:外植体在培养过程屮可能会被污染,你认为造成污染的原因有哪些?[知识补充]植物组织培养技术

6、的应用植物组织培养技术的应川范I韦I是很广的,除了快速繁殖、培育无病毒植物外,还可以通过人规模的植物细胞培养来生产药物、食品添加剂、香料、色素和杀虫剂等。例如,从人量培养的紫草愈伤组织屮提取的紫草索,是制造治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料。用植物组织培养的方法,诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的脸状结构,包裹上人造种皮,制成人工种子,可以解决有些作物品种繁殖能力差,结子困难或发芽率低等问题。此外,转基因植物的培育,也要用到植物组织培养的方法。【反馈练习】1•把胡萝卜的单个韧皮部的细胞放入配制的培养基上培养,获得了许多完整的植株。这种繁殖方式和

7、细胞工程技术分别属于A.他子生殖和细胞杂交技术B•无性牛殖和植物组织培养C.配子生殖和细胞杂合技术D.卵式生殖和细胞培养2.下面有关细胞分化的叙述不正确的是A.细胞分化发生在生物体的整个生命过程屮B.细胞分化仅发生在胚胎时期C.经过细胞分化会形成各种不同的细胞和组织D.细胞分化是一种持久的变化。3•细胞具有全能性的原因是A.生物体细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能B.生物体的每一个细胞都具有全能性C.生物体的每一个细胞都含有个体发育的全部基因D.生物体的每一个细胞都是山受精卵发育來的4.胡萝卜韧皮部细胞通过组培,能发育成新的植株。下列有关叙述不正确是A.说

8、明高度分化的植物细胞具仃全能性B.植物细胞的全能性得

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