淀粉酶的生产.ppt

《淀粉酶的生产.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、淀粉酶的生产学校：江南大学姓名：孙鹏飞学号：6141502016什么是淀粉酶α-淀粉酶的生产12影响生产的因素3α-淀粉酶活性的测定4淀粉酶属于水解酶类，是催化淀粉（包括糖原，糊精）中糖苷键水解的一类酶的统称。它是研究较多，生产最早，产量最大和应用最广泛的一种酶。α-淀粉酶葡萄糖淀粉酶β-淀粉酶异淀粉酶从非还原性末端以葡萄糖为单位顺次分解淀粉，糖原类物质的α-1,4糖苷键霉菌，细菌，酵母等分解支链淀粉，糖原类物质的α-1,6糖苷键植物，酵母，细菌淀粉酶不规则地分解淀粉，糖原类物质的α-1,4糖苷键

2、唾液，胰脏，麦芽，霉菌，细菌从非还原性末端以麦芽糖为单位顺次分解淀粉，糖原类物质的α-1,4糖苷键甘薯，大豆，大麦，麦芽，细菌什么是淀粉酶α-淀粉酶的工厂生产α-淀粉酶能水解淀粉产生糊精、麦芽糖、低聚糖和葡萄糖等，是工业生产中应用最为广泛的酶制剂之一。目前，α-淀粉酶已广泛应用于变性淀粉及淀粉糖、焙烤工业、啤酒酿造、酒精工业、发酵以及纺织等许多行业。目前，国内外生产α-淀粉酶所采用的菌种主要有细菌和霉菌两大类，典型的为芽孢杆菌和米曲霉。米曲霉常用固态曲法培养，其产品主要用作消化剂，产量较小，芽孢杆

3、菌则主要采用液体深层通风培养法，能大规模地生产α-淀粉酶。枯草芽孢杆菌生产α-淀粉酶工艺流程孢子斜面孢子悬浮液种子罐发酵罐计量罐补量罐热处理盐析压滤包装混合粉碎干燥乙醇沉淀淀粉吸附压罐成品粗滤喷雾干燥种子扩大培养种子制备2孢子制备1发酵罐培养3孢子制备将保存在淀粉琼脂斜面上的枯草芽孢杆菌孢子用无菌水洗下，接种到锥形瓶中，在35℃精置2-4天，待长出大量孢子后作为接种用的种子。种子制备将保藏的菌种接种到马铃薯琼脂斜面（20%马铃薯煎出汁加MgSO4·7H2O5mg/L，琼脂2%，pH6.7～7.0）

4、，37℃培养3天。然后接入到20L种子罐，37℃搅拌，通风培养12～14小时。此时菌种进入对数生长期（镜检细胞密集，粗壮整齐，大多数细胞单独存在，少数呈链状，发酵液pH6.3～6.8,酶活5～10U/mL），再接种到发酵罐。发酵罐培养培养基的配制：用麦芽糖液配置成含麦芽糖6％、豆粕水解液6％～7％、Na2HPO4·12H2O0.8％、(NH4)2SO40.4％、CaCl20.2％、NH4Cl0.15％、豆油1kg、深井水20L，调pH至6.5～7.0。发酵罐培养基经消毒灭菌冷却后接入3%～5%种子

5、培养成熟液。培养条件为：温度37±1℃，罐压0.5kg／cm2，风量1～20h为1：0.48vvm，20h后1：0.67vvm，培养时间为28～36h。下游加工处理纯化发酵液的预处理提取成品加工2341提取α-淀粉酶常用的提取方法有：盐析法、乙醇淀粉吸附法和喷去干燥法，这里用盐析法。具体方法：发酵液经热处理，冷却到40℃，加入硅藻土为助滤剂过滤。滤饼加2.5倍水洗涤，洗液同发酵液合并后，在45℃真空浓缩数倍后，加（NH4）SO4至40%饱和度。盐析沉淀物加硅藻土后过滤，滤饼于40℃烘干磨粉即成粗酶

6、制品。纯化α-粉酶的纯化方法可采用反萃取技术。反萃取前萃取反胶团的配置将适当比例的正丁醇和异辛烷加入比色管，摇匀。再加入适量CTAB，放入加热套中加热溶解，摇匀，使其均匀分布于有机相，得到澄清透明稳定的反胶团系统。将α-淀粉酶溶解于缓冲液中，稀释，滤清。磷酸氢二钠-柠檬酸缓冲液构成初始水相。将反胶团相和水相置于三角烧瓶中，在振荡器上剧烈摇晃后(250 r/min, 10 min)，倾入离心管，进行离心(3 500 r/min, 5 min)，用滴管小心地将两相分开取上层有机相待用。用去离子水配制适

7、当pH值(pH

8、糖。豆饼浸出液为氮源时，淀粉液化芽孢杆菌的最佳碳源依次是乳糖，半乳糖，淀粉，麦芽糖。用在葡萄糖与氨构成的合成培养基中，乳糖仍最适合于菌体生长，糊精则完全无效，但琥珀酸，延胡索酸几乎与可溶性淀粉一样有效，葡萄糖，果糖，蔗糖等在高浓度时抑制α-淀粉酶的生成。氮源培养液化淀粉芽孢杆菌时，白蛋白，酪蛋白，大豆饼碱水抽提液，据蛋白胨为较优氮源。玉米浆与其他蛋白质并用时也是良好氮源。以酪蛋白的酸或碱水解物作氮源时，产酶不及酪蛋白本身。各种氨基酸与酪蛋白的酶水解物有利于α-淀粉酶的生成，谷氨酸促