【精品】蚬木植物组织培养技术.doc

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1、萨组培培养基研究住XXXX食品与生物技术系生物技术及应用2012年6月19日觌木组培之培养基配制的研究方案广西职业技术学院食品与生物技术系生物技术及应用2011级吉福思班1102040203周桂优觐木Burretiodendronhsienmu(ChunetHow):别名:火果木;科名:锻树科Tiliaceae,形态特征常绿乔木,高达40m;嫩枝及顶芽无毛。叶卵圆形或椭圆状卵形,长8〜14cm,先端渐尖或尾状渐尖,基部圆形,上面绿色,发亮,下面黄褐色,脉腋有簇毛,其余无毛,两条侧脉上升过半,有第2分

2、枝小脉4~5条,另2条边脉靠近叶缘;叶柄长3・5—6.5cm。圆锥花序长5—9cm,有花7〜13朵;花梗无节。萌果长2〜3cm,有5条薄翅。花期2〜3月,果实成熟期6—7月。分布区及生态特性分布于广西南部石灰岩地区,生于海拔900m以下山区;越南北部有分布。喜暖热气候,耐寒性差;不耐水湿;幼时耐荫,以后逐渐喜光,对土壤水肥条件耍求较高,宜在腐殖质丰富、pH值为6.2-7.2的石灰土壤生长;生长速度中等,萌芽力强。种子采集及处理选择30一50年的优良健壮母树采种。果实成熟由青色转黄色,种子成熟期极整齐

3、,且成熟后即开裂,需认真把握采种期,应在种子散落前及时采集。采回的果实不能脱水,忌暴晒和堆泯,以免发热,摊放在阴凉通风处,开裂后得到带有果瓣的种子,即可用作播种材料,宜随采、随运、随播。需调运时,可在釆摘后带果瓣及时运送,用竹篓或木箱包装,以防堆积发热而发芽。调查表明,虫见木濒危的主要原因是其经济价值高,可作砧板、家具、建筑、造船、车轴、机械势木等用途,造成大量的大树被砍伐,而作工具柄和被砍伐作为薪柴乂使得虫见木居群缺乏小树,更新困难。虽然觐木被列为国家n级保护植物,但其保护现状不容乐观,而且对经济

4、作物(如橡胶林)的开发也在逐步蚕食觐木日益缩小的分布区域。为了对舰木种苗进行如同兰花组培苗产业化生产进而获取虫见木组组培苗,本人结合有关虫见木的课外知识和这个学期所学习的《植物组织培养技术》这一门课程学习到的知识,对虫见木组培苗培养基的配制进行了一次试验性的探索。本人在各种书籍上、网络上都没有有关觐木组培技术的相关介绍,可想而知觌木组培苗培养的难度是非常大的,难度大一定是源于它的特殊性和难掌控的问题,这种难度极有可能是来源于培养基配方的问题,如果在培养基上能有所突破,虫见木将不再受种子发芽率低的限制

5、,在科学上也是一种进步。虽说种子也可以作为祖培苗的外植体,但鉴于种子的难找和昂贵,所以这次的探究只是以觌木腋芽作为外植体而配制的培养基。在课外资料中没有查到有关虫见木组培苗繁殖的方式,所以我依照桜树组培苗的繁衍模式探究此次的虫见木组培苗培养基的配制,所以这次虫见木组培苗探索培养基的配制分有三个步骤,即:㈠诱导培养基㈡增殖培养基㈢生根培养基虫见木组培是一个难题,不然的话现在肯定不是属于国家II级保护植物,我想难题肯定耍有独特的培养方式。所以我的设想是诱导培养基阶段和增殖阶段用MS培养基,之后的生根培养

6、用White培养基,white培养基利于苗木的增根,通过不断地调节激素来进行探究怎样的浓度范围更加适合外植体的生长。为方便配制时运算,我把培养基配方列表如下:MS培养基成分用量(/mg•L1)nh4no31650KNO31900CaCl2•2H2O440MgSO4•7H2O370KH2PO4170KI0.83H3BO36.2MnSO4•4H2O22.3ZnSO4•7H2O8.6NaMoO4•2H2O0.25CuSO4•5H2O0.025C0CI2•6H2O0.025FeSO4•7H2O27.8Na2

7、•EDTA37.3肌醇100烟酸0.5维生素b60.5维生素Bi0.1甘氨酸2.0蔗糖30White培养基药品名称用量(mg/L_,)柠檬酸2.0硫酸钠53.0氯化钾磷酸二氢钠19J盐酸硫胺素(维B1)硝酸钾盐酸甘氨硫酸链硫酸锌碘化钾盐酸毗哆素(维B6)硼酸硫酸镁硝酸钙蔗糖80.00.56^6~Z7"055738.0287.020000下而我再列出组培过程屮各种激索和母液的浓度及用量情况,以便于在配制时方便对照和参考;类别种类配制方法常用浓度(mg/L)细胞分裂素6〜BAKTZT2ip先用少量0.5

8、N—1.0N的盐酸(HC1)溶解,然后加蒸憎水定容。0.1—2.00.05〜2.00.05〜2.0促进细胞分裂与扩大,诱导芽的分化,促进侧芽萌发生长,抑制顶端优势;常与生长素配合使用,用以调节细胞分裂、细胞伸长、细胞分化和器官形成。IAAIBA生长素NAA先用少量1.0N的KOH或NaOH溶解,然后加蒸憎水定容。2,4〜D0.05〜2・00・1〜1.00.5〜5・00.05〜1.00.2〜5.00.01〜0・50.2—2.00.01〜0.5促进细胞伸长生长和细胞分裂促

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