动物细胞培养和核移植.ppt

《动物细胞培养和核移植.ppt》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、动物细胞工程动物细胞工程常用的技术手段：动物细胞培养、动物细胞核移植、动物细胞融合、单克隆抗体思考：植物细胞工程常用的技术手段有哪些？植物组织培养、植物体细胞杂交强调：动物细胞培养技术是其他动物细胞工程技术的基础。问题讨论:烧伤病人的治疗通常是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植，但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人？取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植一、动物细胞培养动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。1、

2、概念：注意关键词:细胞贴壁接触抑制原代培养传代培养阅读课文44--46面相关内容2、过程幼龄动物取动物器官和组织剪碎组织胰蛋白酶处理细胞培养单个细胞胚胎或幼龄动物的组织器官细胞悬液(分散的单个细胞）剪碎胰蛋白酶1.进行动物细胞传代培养时用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？旁栏思考提示：用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性。胰蛋白酶作用的适宜环境pH为7.2～8.4。多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4，胃蛋白酶在

3、此环境中没有活性，而胰蛋白酶在此环境中活性较高，因此胰蛋白酶适宜用于细胞培养时的消化。胰蛋白酶真的不会把细胞消化掉吗？为什么？寻根问底提示：胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，对细胞有损伤作用，因此必须控制好胰蛋白酶的消化时间。细胞贴壁过程贴壁培养是指大多数动物细胞在离体培养条件下都需要附着在带有适量正电荷的固体或半固体的表面上才能正常生长，并最终在附着表面扩展成单层接触抑制胚胎或幼龄动物的组织器官细胞悬液剪碎胰蛋白酶细胞贴壁接触抑制原代培养原代细胞稀释、分离传代培养胰蛋白酶传代细胞原代培养将动物

4、组织取出来后，先用胰蛋白酶等处理分散成单个细胞，然后配制成细胞悬液，再放入培养瓶中初次培养的过程。传代培养将原代培养的细胞定期用胰蛋白酶处理，配制成细胞悬液，然后分瓶继续培养的过程。传代10代后，细胞增殖逐渐减慢，大部分细胞衰老死亡。少数细胞存活到50代左右。10~50代间，部分细胞核型可能发生变化，甚至突变为癌细胞细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，获得不死性，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系所以目前使用的细胞，通常为10代以内，以保持细胞正常二倍体核型。暂时不用可低

5、温保存（液氮）细胞悬浮液10代细胞50代细胞无限传代原代培养传代培养细胞株细胞系如何界定原代培养和传代培养；细胞株和细胞系？遗传物质改变遗传物质未改变动物细胞培养不能最终培养成生物体探究：多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的知识，认为体外培养细胞应该模拟内环境的哪些内容呢？1、无菌、无毒2、全部的营养物质3、适宜的温度和PH值4、必要的气体条件（添加一定量的抗生素，定期更换培养液）（葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素、动物血清等。）36.5+（-）0.5度,7.2-7.4O2和CO2（95%空气和5%CO2）3、条件

6、：维持培养液的PH离体培养的细胞对微生物和有毒物质没有防御能力为什么对动物细胞进行培养时通常要添加血清？有些氨基酸（必需氨基酸）动物细胞本身不能合成必须由培养液提供。血清中还含有多种未知的活性物质，能促进细胞的生长、增殖和贴附。动物胚胎或幼龄动物的组织、器官胰蛋白酶剪碎单个细胞加培养液制成细胞悬浮液10代细胞部分细胞“癌变”，遗传物质改变，无限传代动物细胞培养不能最终培养成动物体50代细胞原代培养传代培养细胞贴壁剥离、分瓶细胞株细胞细胞系过程1、大规模的生产生物制品(病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等）2、培养的动物细胞作为基因工程

7、的受体细胞。3、检测判断物质的毒性。许多致畸、致癌物质加入培养液后，培养细胞会发生染色体结构和数目的变异。根据变异细胞占全部培养细胞的百分数，可以判断某种物质的毒性。4、培养正常或各种病变的细胞，用于生理、病理、药理等方面的研究，如用于等，为及其他疾病提供理论依据。动物细胞培养技术的应用筛选抗癌药物治疗和预防癌症细胞的全能性细胞株、细胞系植株培养结果细胞或获得细胞产物快速繁殖、培育无病毒植株等培养目的动物血清葡萄糖植物激素蔗糖培养基特有成分液体培养基固体培养基培养基性质细胞增殖原理动物细胞培养植物组织培养比较项目植物细胞和动物细

8、胞培养的比较探究1、植物组织培养过程要将组织分散成单个细胞吗？２、动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞吗？３、为何动物细胞培养过程将组织分散成单个细胞的呢？４、如何将动物组织分散成单个的细胞呢？５、胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？没有是