硒缺乏对雏鸡脾脏PI3KAKTmTOR信号转导通路的影响.pdf

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4、t1:~36:~~~-~Jff.YffJ~~:B~A:wt6:¥6~~BBAA:v;r646J=JzsBUniversitycode：10223Classifiedcode：S854Graduatenumber：XS133126Confidentialdegree：PublicHeilongjiangBayiAgriculturalUniversityMasterDissertationEffectsofseleniumdeficiencyonthePI3K/AKT/mTORsignallingpathwayinth

5、echicksspleenPostgraduate：YuDe-binSupervisor：ProfessorWuRuiMajor：ClinicalVeterinaryMedicineResearchdirection：AnimalnutritionandimmunityDegreecategory：MasterofAgronomyDaqingChinaJUNE,2016摘要硒是动物机体内生长发育所必需的一种微量元素。硒缺乏导致雏鸡等幼龄动物发病，使机体免疫功能下降。但硒缺乏导致雏鸡脾脏发育缓慢，淋巴细胞减少，抑制脾细

6、胞增殖机理尚不明确。PI3K/AKT/mTOR信号转导通路是动物机体内重要的信号转导通路之一，主要对促进细胞增殖和抑制细胞凋亡等方面起着重要作用。本试验通过复制硒缺乏雏鸡模型，研究硒缺乏对雏鸡脾脏PI3K/AKT/mTOR信号转导通路的影响，为揭示硒缺乏对雏鸡免疫机能的影响提供了试验依据。选取一日龄的SPF健康三黄肉仔鸡120只，随机分为两组即对照组和试验组。试验组雏鸡饲喂硒缺乏饲料，对照组雏鸡饲喂全价配合饲料，试验期35天。分别于试验的第7d、21d、35d随机抽取雏鸡剖杀，无菌条件下取出脾脏。在硒缺乏雏鸡模型成功

7、建立的基础上，检测雏鸡脾脏脏器指数的变化；应用HE染色检测脾脏形态结构和脾脏淋巴细胞数量的变化；应用Westernblot方法检测PI3K、AKT、p-AKT、mTOR、P70S6K和p-P70S6K蛋白水平的变化；应用免疫组化方法检测PI3K和mTOR蛋白水平的变化。试验结果：（1）试验组与对照组相比，在试验第21d时，试验组脾脏重量极显著降低（p<0.01），在试验第35d时，试验组脾脏重量及脾脏脏器指数极显著降低（p<0.01）。（2）试验组与对照组相比，在试验第21d时，试验组脾脏淋巴细胞数量显著降低（p<0

8、.05），在试验第35d时，试验组脾脏淋巴细胞数量极显著降低（p<0.01）。在试验第7d时，试验组脾脏病理变化不明显，在试验第21d和35d时，试验组脾脏淋巴细胞减少，排列疏松，纤维组织增生。（3）Westernblot结果显示：试验组与对照组相比，在试验第21d时，试验组PI3K、p-AKT、mTOR、p-P70S6K蛋白表达水平极显著降低