子宫内膜癌中前列腺素受体的表达及其生物学意义.doc

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1、子宫内膜癌中前列腺素受体的表达及其生物学意义唐学磊1魏丽惠2(1.首都医科大学附属北京友谊医院妇产科；2.北京大学人民医院妇产科100044)【摘要】目的:研究前列腺素PGE2受体EP2在子宫内膜癌中的表达，探讨EP2在子宫内膜癌中的表达变化及其在子宫内膜癌的发牛、发展过程是否存在非雌激素依赖的作用。方法:选取50例子宫内膜癌组织，应用逆转录■聚合酶链反应(RT-PCR)技术，半定量研究各组中EP2的mRNA表达；采用免疫组织化学技术，测定组织中雌、孕激素受体的表达。结果:子宫内膜癌G1组、G2组、G3组均高于正常组(P<0.05),而且随细

2、胞分化越差,受体表达水平呈上升趋势(P<0.001)；子宫内膜癌I期组、II期・IV期组均高于正常组(P=0.001)；在子宫内膜癌中，雌激素受体表达阴性组比阳性组的EP2表达水平显著升高(P&t;0.001)；而孕激素受体表达阴性组比阳性组的EP2表达水平高，但是差异无统计学意义(P>0.05)；绝经前(20例)与绝经后(30例)患者的子宫内膜癌中EP2的表达分别为0.905±0.251和0.941±0.336,二者差异无统计学意义(P二0.684)。结论:在子宫内膜癌中EP2表达水平高于正常子宫内膜，并且

3、随分期和分级升高有上升趋势，在雌激素表达阴性的子宫内膜癌比阳性者明显升高，提示PGE2及其受体EP2可能参与了子宫内膜癌的形成。在子宫内膜癌的形成过程中，，前列腺素及其受体EP2与非雌激素作用的子宫内膜癌形成过程存在某种联系，可能是PGE2通过EP2受体介导的信号通路的传导起作用。【关键词】子宫内膜癌;EP2受体；雌激素受体ER；孕激素受体PR【中图分类号】R737.33【文献标识码】A【文章编号】1008-6455(2010)11-0006-02子宫内膜癌是常见的妇科恶性肿瘤，近年来在全球发病呈逐年上升趋势。在近年临床实践研究中可以观察到了宫内膜

4、癌分为雌激素依赖性和非雌激素依赖性。雌激素依赖性肿瘤的雌孕激素受体(ER与PR)为阳性表达，一般分期早、分化好，治疗及预后较好；而非雌激素依赖性肿瘤则常常ER与PR为阴性表达，临床表现为分期晚、分化差、进展快、对内分泌治疗疗效不好，预后差。研究显示,前列腺素受体（EP2）表达升高及前列腺素E2（PGE2）合成增加可诱导上皮细胞发牛恶变，在子宫内膜癌中，EP2和PGE2起何种生物学作用尚未阐明。EP2的作用、其胞内信号途径，及其与介导PGE2对正常细胞和肿瘤上皮细胞起转化作用的靶基因的关系仍不清楚。木研究通过研究受体EP2在子宫内膜癌中的表达，探讨E

5、P2在子宫内膜癌中的表达变化与激素依赖的关系；在子宫内膜癌的发生、发展过程中是否存在非雌激素受体的作用。1材料与方法"研究对彖:选取1999年7月・2002年7月间，年龄36-77岁的子宫内膜癌患者50例,根据FIGO手术病理分期：I期29例、II期7例、III期12例、IV期2例，G1级26例、G2级15例、G3级9例），正常子宫内膜10例，术前未经放化疗及激素等内分泌治疗，术中取同一子宫内膜癌病变组织两份，一份用10%甲醛固定，石蜡包埋、切片、HE染色，并经病理医师确诊；另一份标本离体后立即放入液氮速冻4hr以上，然后保存于・70°C低温冰箱备

6、用。1.2实验方法1.2.1RNA提取：取每例冻存组织标木约100mg,在4°C匀浆，参照Trizol试剂盒（Promega公司）说明书提取RNA。RNA产物在紫外分光光度计260/280处测定RNA样品的吸光度值，计算样品的纯度及浓度。取5ulRNA样品于1%琼脂糖凝胶电泳，在紫外分析仪下观察结果并记录。1.2.2引物设计⑴：内参照引物GAPDH：上游5’-CGGATTTGGTCGTATTGG-3’,下游5’GATGGCATGGACTGTGGT-3’,扩增片段长517bp;受体EP2:上游5&rsq

7、uo;-CTTACCTGCAGCTGTACG-3’,下游5’-GATGGCAAAGACCCAAGG-3’,扩增片段长367bp。以上引物均由上海博雅牛物技术公司合成。1.2.3所有子宫内膜组织EP2的mRNA表达水平测定：采用半定量逆转录■聚合酶链反应(RT・PCR)技术，逆转录试剂均为美国Promega公司产品。逆转录反应体系25ul：5*RT缓冲液5ul,Dntp(10mM)5ul?Rnasin(50u/ul)0.5ul,随机引物(0.5ug/ul)2ul,M-MLV逆转录酶(200u/ul)lul,样品RN

8、A2ug,加入三蒸水至终体积25uL反应条件：37°C水浴lhr,95°C水浴5min灭活逆转录酶。PCR反应体系25ul