苏北海岸带典型盐生植物根际放线菌多样性及其耐盐促生作用研究.pdf

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1、硕士学学位位论论文（2017届）苏北海岸带典型盐生植物根际放线菌多样性及其耐盐促生作用研究StudyonthediversityofrhizosphereactinomycetesfromthetypicalhalophytesincoastalzoneofnorthernJiangsuandtheirplantgrowth-promotingeffectundersaltstress作者白娟娈导师秦盛副教授江苏师范范大学生命科学学院二○一七年六月江苏师范大学学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解江苏师范大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子版

2、，允许论文被查阅和借阅。本人授权江苏师范大学可以将本学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索和传播，可以采用影印、缩印或扫描等手段保存、汇编、出版本学位论文。保密的学位论文在解密后适用本授权书。作者签名：导师签名：2017年5月25日2017年5月25日学位论文原创性声明本人郑重声明：所呈交的学位论文，是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。论文中除了特别加以标注和致谢的地方外，不包含任何其他个人或集体已经公开发表或撰写过的研究成果。其他同志对本研究的启发和所做的贡献均已在论文中作了明确的声明并表示了谢意。本人学位论文与资料若有不实，愿意承担一切相关

3、的法律责任。学位论文作者签名:2017年5月25日中图分类号：单位代码：10320UDC：密级：硕士学位论文苏北海岸带典型盐生植物根际放线菌多样性及其耐盐促生作用研究StudyonthediversityofrhizosphereacctinomycetesfromthetypicalhalophytesiincoastalzoneofnorthernJiangsuandtheirplantgrowth-promotingeffectundersaltstress作者白娟娈导师秦盛副教授申请学位理学学位培养单位江苏师范大学学科专业生态学学研究方向资源与环境生态答辩委员

4、会主席评阅人二〇一七年六月摘要本研究以江苏省连云港海岸带7种典型盐生植物根际土壤为材料，利用纯培养的方法总共分离得到45株放线菌，并在纯培养分离的基础上，利用免培养技术对盐生植物根际土壤放线菌多样性进行了研究，并对分离的菌株进行16SrRNA基因测序、系统发育分析以及潜在促生活性检测。根据根际放线菌促生潜在性检测，筛选出2株放线菌进行了盆栽实验，研究盐胁迫下根际土壤放线菌对小麦生长的影响。菌株16SrRNA基因测序结果显示，可培养的放线菌分别属于链霉菌属（Streptomyces）、节杆菌属(Arthrobacter)、诺卡氏菌属(Nocardia)、戈登氏菌属(Go

5、rdonia)、类诺卡氏菌属(Nocardioides)、微杆菌属(Microbacterium)、分枝杆菌属(Mycobacterium)、壤霉菌属(Agromyces)、微球菌属(Micrococcus)、原小单孢菌属(Promicromonospora)、野野村氏菌属(Nonomuraea)、小单孢菌属(Micromonospora)12个属。通过MiseqPE300平台对7份根际土壤样品中细菌16SrRNA基因的高变异区V5-V7区进行测序，共获得有效序列138541条，共6641个OTU。通过与数据库进行比对分析，7份根际土壤中共探测到66个放线菌属，其中分

6、枝杆菌属(Mycobacterium)、链霉菌(Streptomyces)、小单孢菌属(Micromonospora)和节杆菌属(Arthrabacter)最为丰富。高通量测序结果与我们纯培养分离的结果基本一致，但盐生植物根际土壤中还存在大量未培养的放线菌类群。通过对菌株KLBMPS0027和KLBMPS0039的形态特征观察、生理生化特征、化学分类、16SrRNA与gyrB基因系统发育分析以及DNA-DNA分子杂交的多相分类学研究，证实了2株菌属于诺卡氏菌属的新物种，KLBMPS0027和KLBMPS0039分别命名为江苏诺卡氏菌(Nocardiajiangsuen

7、sissp.nov.)，根际栖居诺卡氏菌(Nocardiarhizosphaerihabitanssp.nov.)。对分离得到的放线菌进行解磷、固氮、产吲哚乙酸(IAA)、产1-氨基环丙烷-1-羧酸脱氨酶(ACC脱氨酶)、产铁载体等潜在促生长特性，以及产淀粉酶、木聚糖酶和几丁质酶等酶活性和耐受NaCl能力检测，研究结果发现分离的菌株至少有一种甚至多种促生潜在特征。以菌株KLBMPS0051和KLBMPS0019为材料，I通过盐胁迫下接种土壤放线菌对小麦种子萌发及生长的影响初步探究了盐胁迫下两株菌对小麦的促生效应。研究结果发现，盐胁迫下接种菌株KLBM