《培养液中酵母菌种群数量变化》学案.doc

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1、《培养液中酵母菌种群数量变化》学案培养液中酵母菌种群数量的变化酿酒和做面包都需要酵母菌，这些酵母菌可以用液体培养基（培养液）来培养。培养液中酵母菌种群的增长情况，与发酵食品的制作有密切关系。实验目的：探究培养液中酵母菌种群的数量是怎样随时间变化的？实验原理：对试管中培养液中的酵母菌逐个计数是非常困难的，可以采用抽样检测的方法，我们一般情况下是利用血球计数板对酵母菌的数量进行统计。一、血球计数板：血球计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物数量的仪器，由一块比普通载玻片厚的特制玻璃片制成的玻璃中有四条下凹的槽,构成三个平台。中间的平台较宽，其中间又被

2、一短横槽隔为两半，每半边上面刻冇一个方格网。方格网上刻冇9个大方格，其中只冇中间的一个大方格为计数室。大方格的长和宽各2mm,深度为0.1mm,其容积为0.4mm3,即2mmX2mmX0.1mm方格的计数板。计数室通常也有两种规格：一种是16X25型，即大方格内分为26中格，每一中格又分为25小格；另一种是25X16型，即大方格内分为25中格，每一中格又分为16小格。但是不管计数室是哪一种构造，它们都有一个共同的特点,即每一大方格都是由16X25=25X16=400个小方格组成。二、血球计数板的使用方法步骤使用血球计数板计数时，按照如下的实验步骤进

3、行：1.镜检计数室。在加样前，先对计数板的计数室进行镜检。若有污物，则需清洗，吹干后才能进行计数；2.加样品。将清洁干燥的血球计数板的计数室上加盖专用的盖玻片，用吸管吸取稀释后的酵母菌悬液，滴于盖玻片边缘，让培养液自行缓缓渗入，一次性充满计数室，防止产生气泡，充入细胞悬液的量以不超过计数室台面与盖玻片Z间的矩形边缘为宜。多余培养液可用滤纸吸去；3•计数。稍待片刻（约5min），待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部后，将计数板放在载物台的中央，先在低倍镜下找到计数室所在位置后,再转换高倍镜观察、计数并记录。三、血球计数板的使用注意事项《培养液中酵母菌种群

4、数量的动态变化》实验是一个历吋较长（7天左右）的实验，事前一定耍做好周密的计划，定程序、定时间、定人员。每天采用抽样检测法使用血球计数板对酵母菌进行计数，在计数时应从以下几方面注意。1.每天同一时间，各组取出本组的试管，用血球计数板计数酵母菌个数，并作记录，连续观察7天。1.从试管中吸出培养液进行计数Z前，耍将试管轻轻震荡几下，这样使酵母菌分布均匀，防止酵母凝聚沉淀，提高计数的代表性和准确性,求得的培养液中的酵母菌数量误差小。2.如果一个小方格内酵母菌过多，难以数清，应当对培养液进行稀释以便于酵母菌的计数。具体方法是：摇匀试管，取2mL酵母菌培养液

5、,加入成倍的无菌水稀释，稀释n倍后，再用血球计数板计数，所得数值乘以稀释倍数。以每小方格内含有4—5个酵母细胞为宜。特别是在培养后期的样液需耍稀释后计数。4•活酵母冇芽殖现象，若芽体达到母细胞大小的一半时，即可作为两个菌体计数，若芽体小于母细胞一半时为1个酵母细胞。5.对于压在方格界线上的酵母菌应当计数同侧相邻两边上的菌体数,一般可采取“数上线不数下线，数左线不数右线”的原则处理，另两边不计数。计数时，如果使用16格X25格规格的计数室，耍按对角线位，取左上、右上、左下、右下4个中格（即100个小格）的酵母菌数；如果规格为25格X16格的计数板，除

6、了取其4个对角方位外，还需再数中央的一个中格（即80个小方格）的酵母菌数。6•计数一个样品要从两个计数室中计得的平均数值來计算，对每个样品可计数三次，再取其平均值。计数时应不时调节焦距，才能观察到不同深度的菌体。按公式计算每lml（或10mL）菌液中所含的酵母菌个数。7•血球计数板的清洁血球计数板使用后，用自来水冲洗，切勿用硬物洗刷，洗后自行晾干或用吹风机吹干，或用95%的乙醇、无水乙醇、丙酮等有机溶剂脱水使其干燥。通过镜检观察每小格内是否残留菌体或其他沉淀物。若不干净，则必须重复清洗直到干净为止。实验过程：略实验结果:巩固练习：2、在“探究培养液

7、屮酵母菌种群数量的变化”实验中，正确的实验方法是（）A.将适量的培养液进行高温处理,然后立即加入酵母菌b.将盖玻片盖在计数空r后，从盖玻片边缘滴加酵母菌培养液c.若取样的小方格屮酵母菌过多，多选择邻近的一个小方格计数D.对压在小方格界线上的酵母菌，只计数上下两条界线上的酵母菌2、在用血球计数板（2mmX2mm方格）对某一稀释50倍样品进行计数吋，发现在一个方格内（盖玻片下的培养液厚度为0.1mm）酵母菌平均数为16,据此估算10mL培养液中有酵母菌个。3、在“探究培养液中酵母菌种群数量的变化”实验中，某同学用显微镜观察计数，统计发现血球计数板的小方

8、格（2mmX2mm）内酵母菌数量的平均值为13个。假设盖玻片下的培养液厚度为0.1mm,那么:LOmL培养液中酵母菌的个数