沙眼衣原体检测新进展.ppt

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1、沙眼衣原体检测新进展杨会林衣原体Chlamydia一类能通过细菌滤器，专性真核细胞内寄生，有独特发育周期的微生物；体积略大于病毒，光学显微镜下可见，具有DNA、RNA两种核酸、核糖体和近似细胞壁的膜；以二分裂方式进行增值；能被抗生素抑制，现归于广义的细菌范畴。沙眼衣原体C.trachomatis具有特殊发育周期，镜检可观察到两种不同形态结构：1.原体（EB）：存在于细胞外，具有高度感染性2.始体（RB）：存在于细胞内，繁殖型，代谢活泼，无感染性衣原体分类按第九版Bergey细菌学分类手册，衣原体分类上属于衣原体目（Chlamydiales）,下有衣原体科（C

2、hlamydiceae）、衣原体属(Chlamydia)。根据衣原体的抗原结构和DNA同源性特点，衣原体分为四个种，包括沙眼衣原体（C.trachomatis）、肺炎衣原体（C.pneumoniae）、鹦鹉热衣原体（C.psittaci）和家畜衣原体（C.pecorum）。前三种对人致病，以沙眼衣原体（CT）常见。沙眼衣原体C.trachomatis分A、B、Ba、C、D、Da、E、F、G、H、I、Ia、J、K、L1、L2、L2a、L3等18个血清型，不同血清型能引起不同疾病。分3个生物型，即小鼠生物型、沙眼生物型和性病淋巴肉芽肿型。后两者与人类疾病相关。C

3、T抗原结构属特异性抗原：衣原体胞壁脂多糖（LPS）识别表位位于2-酮基-3-脱氧辛酸（KDO）三糖可与肠道菌Re突变株发生交叉反应种特异性抗原：主要外膜蛋白（MOMP），可进行补体结合试验和中和试验检测型特异性抗原：位于MOMP上沙眼衣原体(CT)感染感染眼结膜引起沙眼，包涵体结膜炎；沙眼衣原体是性传播疾病的主要病原体。在男性主要引起非淋菌性尿道炎或可合并附睾炎、前列腺炎、性病淋巴肉芽肿等；在女性可引起尿道炎、宫颈炎、输卵管炎、盆腔炎等。严重患者可导致不孕及异位妊娠；能通过性接触或非性接触方式感染新生儿、儿童，引起新生儿肺炎和新生儿包涵体结膜炎，给预防沙眼衣

4、原体感染带来很大困难。沙眼衣原体(CT)感染沙眼衣原体感染沙眼衣原体感染沙眼衣原体(CT)感染常与淋病奈瑟菌混合感染（50%）。淋病奈瑟菌对衣原体繁殖起着激活和促进作用。衣原体感染能增加人群获得HIV的概率。最近有研究提出，CT感染能提高患癌症风险。CT感染可破坏p53蛋白，增加突变细胞存活的风险，最终引发癌症。沙眼衣原体感染流行病学传播途径：通过性接触传播，母婴垂直传播，接触沙眼患者的毛巾、不洁洗脸水和脸盆传播；在女性宫颈炎和男性尿道感染中，临床上常表现为无症状，呈隐性感染，成为携带者，更易导致感染传播。沙眼衣原体感染流行病学据世界卫生组织估计，每年有92

5、00万新发的沙眼衣原体感染病例。在美国，DattaSD等调查显示，14岁-39岁的群体中，沙眼衣原体的感染率约为4.6%；在欧洲，RedmondS等的一项大规模调查显示，18岁-26岁之间有过性经验的群体中，沙眼衣原体的感染率约为3.6%；PetersR等统计指出，在非洲一些国家的的乡下，女性沙眼衣原体的感染率可达16%以上；沙眼衣原体感染流行病学在中国LiCL等于2012年湖北省的一项婚前筛查报告显示，有3.6%的婚前女性感染沙眼衣原体；ChenXS等2013年一份针对女性性工作者的研究显示，在女性性工作者中，衣原体感染率高达17.3%；有调查统计显示，深

6、圳地区非淋球菌性尿道炎患者中，男性患者沙眼衣原体的检出率为30.57%，女性为21.19%。沙眼衣原体感染防治沙眼衣原体对阿奇霉素、强力霉素、喹诺酮类抗生素敏感，确诊后容易治疗。防治沙眼衣原体感染和传播的主要难点在于准确、及时找到病原菌。CT标本采集及运送标本采集：1.沙眼及包涵体结膜炎患者：擦净脓性分泌物，用拭子在结膜上穹窿或下穹窿用力涂擦，或取眼结膜刮片；2.泌尿生殖系统感染患者：男性患者用无菌棉拭子插入尿道口2cm出旋转3~5秒后取出；女性患者选取宫颈移行部位采样。3.小儿肺炎患者：用拭子在鼻咽后部或咽部采集。4.性病肉芽肿标本：采集淋巴结脓汁。标本运

7、送：置于2SP培养基运送，2SP培养基含蔗糖、磷酸盐缓冲液、胎牛血清、抗生素等成分。标本采样后5天内检验，标本应暂存于4℃。沙眼衣原体的检测技术直接涂片镜检：检测包涵体细胞培养抗原检测：直接荧光抗体测定、酶免疫测定、胶体金法抗体检测核酸检测：核酸探针检测、PCR、荧光定量PCR、、PCR产物直接测序直接涂片染色镜检CT寄生于细胞内形成包涵体，通过碘染色或吉姆萨染色可见细胞内包涵体直接涂片染色镜检方法学评价：直接涂片染色镜检，操作简便；包涵体的检出对急性、严重的新生儿包涵体性结膜炎的诊断价值大；泌尿生殖道内完整细胞少，细胞内包涵体脆性较大，造成敏感性较低。细胞

8、培养法由于CT专性细胞内寄生，可用6~8天龄鸡胚卵黄