优质课微生物的实验室培养ppt课件.ppt

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1、巴斯德法国，微生物学家失败的原因：发酵物中混入了杂菌变酸？12一.培养基微生物原核类:真核类非细胞类：细菌、蓝藻等酵母菌、霉菌、食用菌等真菌：原生生物：草履虫、变形虫等病毒是一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称．关于微生物的类群3牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。一、培养基的概念人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养物质——培养基思考：微生物“吃”什么？4一、培养基的成分：微生物生存的环境和营养物质⑴碳源（提供碳元素的物质）无机碳源：有机碳源CO2、碳酸盐自养微生物异养微生物⑵氮源（提供氮元素的物质）无机氮源：有机氮源：：（葡糖

2、糖、蔗糖、淀粉、牛肉膏、蛋白胨等）牛肉膏、蛋白胨等NH4＋、NO3-N25(3).不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方(参考教材附录内容)(5)另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气等的要求。(4).不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、氮源、无机盐——基本成分6（1）按培养基的物理形态分：液体培养基半固体培养基固体培养基一、培养基的种类（2）按培养基的功能分：基础（通用）培养基选择培养基鉴别培养基（3）按培养基的化学成分分：·天然培养基·合成培养基7二、无菌技术1.概念无

3、菌技术又称无菌操作，泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。因此，获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌的入侵8消毒使用较为温和的物理或化学方法，杀死物体表面或内部的部分微生物(不包括芽孢和孢子)。2.消毒与灭菌灭菌使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。理化因素的作用强度消灭微生物的数量芽孢和孢子能否被消灭(1)定义9①煮沸消毒法：100℃煮沸5-6min。②巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或80℃下煮15min。③化学药剂消毒法：用75%酒精等进行皮肤消毒；氯气消毒水源。④紫外线消毒。⑴.消毒的方法：2.常用的消毒与灭菌的方法10①灼烧灭菌②干

4、热灭菌：160-170℃下加热1-2h。③高压蒸气灭菌：100kPa、121℃下维持15-30min.⑵.灭菌的方法：11二、无菌技术（1）对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和消毒。（2）将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等器具进行灭菌。（3）为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。（4）实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品相接触。无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括以下几个方面12思考：1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？思考：2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果

5、需要，请选择合适的方法。（1）培养细菌用的培养基与培养皿（2）玻棒、试管、烧瓶和吸管（3）实验操作者的双手无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。（1）、（2）需要灭菌；（3）需要消毒。13练习细菌培养过程中分别采用了高压蒸汽、酒精、火焰灼烧等几种不同的处理方法，这些方法依次用于杀灭哪些部位的杂菌（）A.接种针、手、培养基B.高压锅、手、接种针C.培养基、手、接种针D.培养基、手、高压锅C14变形题培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌、消毒方法依次是（）①化学消毒②灼烧灭菌③干热灭菌④紫外线消毒⑤高压蒸汽灭菌⑥巴氏消毒法A.⑤③②①④⑥B.①②③④

6、⑤⑥C.⑥②③④①⑤D.③④②①⑥⑤A15（一）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基1.计算：（根据牛肉膏蛋白胨培养基配方的比例，计算配制100ML的培养基时，各种的成分的用量）物质牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂水重量5g10g5g20g定溶至1000mL2.称量三、实验操作思考：该培养基从物理性质分属于哪种？原因？含有几种基本营养成分？牛肉膏提供上述哪几种成分？准确称取各种成分，注意事项：牛肉膏要放在称量纸上称量，牛肉膏、蛋白胨都易吸潮，称取时动作要迅速，称后及时盖上瓶盖。163.溶化：4.灭菌：5.倒平板：待培养基冷却到50OC左右时，在酒精火焰附近倒平板。注意：溶化后应该调节PH（在灭菌前

7、）17?思考3①溶化时为什么要将牛肉膏连同称量纸一起加热?②加琼脂的目的是什么?可保证粘附在称量纸上的牛肉膏也能溶于水中,减少误差作为凝固剂18思考4①在灭菌前,用牛皮纸、旧报纸包紧盛有培养基的锥形瓶的目的是什么？?在灭菌时能避免水蒸汽凝结时浸湿棉塞；在取出培养基锥形瓶时也能起到隔绝空气中杂菌污染的作用19倒平板:201).培养基灭菌后，需要冷却到50℃左右时，才能用来倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？问题讨论答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶的温度下降到刚刚不