微生物检测标准操作规范剖析.doc

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1、陕西爽爽佳食品有限公司微生物检测标准操作规范文件号：SSJ-SOP-PK-004A/0颁布日期：2017年4月14日文件类型：SOP版本号：A修订次数：0密级：仅供内部使用陕西爽爽佳食品有限公司微生物检测标准操作规范文件号：SSJ-SOP-PK-004A/0颁布日期：2017年4月14日文件类型：SOP密级：仅供内部使用编写人：日期：年月日审核人：日期：年月日签署人：日期：年月日10陕西爽爽佳食品有限公司微生物检测标准操作规范文件号：SSJ-SOP-PK-004A/0颁布日期：2017年4月14日文件类型：SO

2、P版本号：A修订次数：0密级：仅供内部使用序号修改日期修改页修改信息摘要审批人10陕西爽爽佳食品有限公司微生物检测标准操作规范文件号：SSJ-SOP-PK-004A/0颁布日期：2017年4月14日文件类型：SOP版本号：A修订次数：0密级：仅供内部使用1.0目的确保微生物检测的准确和规范，较真实地反映测试样品的微生物状况。2.0范围具体见各检测方法。3.0职责3.1微生物品控员负责本SOP的具体操作。3.2品控主管负责本SOP执行的有效性.4.0定义无5.0程序目前微生物检测方法主要分两种：薄膜过滤法和倒平板

3、法。另附大肠杆菌国标法（附件2）和用过的微生物测试材料的处理规范（附件3）。5.1薄膜过滤法。此方法适用于较容易过滤的样品的微生物测试，如常规水、包装饮用水、天然矿泉水、碳酸饮料等。5.1.1培养基的准备5.1.1.1培养基的具体配制方法见附件1或产品包装说明。5.1.1.2倒平板将47mm带吸附垫培养皿包装带外表面用75%酒精喷杀，放入超净工作台内。在工作台内撕开包装，取出培养皿，备用。注：此步中，由于培养皿为无菌包装，每次使用前估计好所需的培养皿数，尽量做到取多少用多少。无菌操作缓缓将培养基倒入培养皿中，倒

4、入量不宜过多，以充分湿润但倾斜不出现明显积液为佳。注：由于培养皿较小，操作不太方便，整个操作需缓慢，且双手杀菌需彻底，避免因倒平板而引起污染。5.1.2膜过滤5.1.2.1解开已消毒的漏斗备用（开口不宜过大）。10陕西爽爽佳食品有限公司微生物检测标准操作规范文件号：SSJ-SOP-PK-004A/0颁布日期：2017年4月14日文件类型：SOP版本号：A修订次数：0密级：仅供内部使用5.1.2.1用火焰枪烧灼滤头，完毕将膜放置于滤头中央，套上经火焰迅速灭菌的漏斗。5.1.2.2以无菌方式倒入样品，施加真空进行抽

5、滤，此时需观察样品剩余量，空抽时间不得长于10秒，但尽量避免空抽。5.1.2.3移去漏斗，无菌操作将膜接种于准备好的培养皿中。5.1.1样品培养5.1.3.1为了避免在滤膜表面形成冷凝水，所有培养皿必须倒转放在培养箱中。5.1.3.2在培养箱里放一个装有水的烧杯，以保持一定的湿度。5.1.3.3下面的温度是最佳培养温度:总菌数：35°C酵母和霉菌：25°C大肠杆菌：35°C如果共用一个培养箱,则把温度调节至30±2ºC。5.1.2菌落数的计算5.1.4.1细菌总数必须在48小时之后计算总菌数（成品需分别记录24

6、小时、48小时、72小时的菌落数）。计算所有菌落数(不管种类)。5.1.4.2酵母和霉菌n在培养72小时,96小时,120小时后点计酵母和霉菌数，记录最高的数目。n酵母和霉菌通常表现为圆的白色菌落，虽然有时也会出现颜色，在36－48小时之后，一些白色酵母菌由于吸收了介质中的指示剂而会在菌落中央逐渐显现蓝色。n霉菌菌落有许多种颜色(如白、黄、红、蓝、黑)，但由于外观呈现细绒毛状或棉絮状，所以容易辨认。通常霉菌菌落大于细菌或酵母菌的菌落。如果霉菌菌落在平皿上呈曼延的状态，则记录为“Spreaders”。5.1.4.

7、3细菌菌落通常吸收指示剂要比酵母菌快，可变为蓝色、绿色、蓝绿色或褐色。在这种培养基中，细菌菌落通常比酵母菌菌落小。5.1.4.4大肠杆菌10陕西爽爽佳食品有限公司微生物检测标准操作规范文件号：SSJ-SOP-PK-004A/0颁布日期：2017年4月14日文件类型：SOP版本号：A修订次数：0密级：仅供内部使用在35°C温度下培养的大肠杆菌菌落是绿色或墨绿色，有强烈反射性的金属光泽。在24小时后计算有“光泽”的菌落。观察大肠杆菌菌落的金属光泽时可将滤膜倾斜到一个角度，使入射光在具有特殊金属的菌落同没有这种光泽的

8、菌落之间产生鲜明的对比。5.1倒平板法适用于果汁或含果汁饮料、咖啡、非纯茶饮料等难以进行膜过滤检测的样品。5.2.1培养基的准备5.2.1.1培养基的具体配制方法见附件1或产品包装说明。5.2.2培养皿的准备将烘干后的平皿装入消毒筒内160℃120min（若时间紧急也可设定为170℃60min）进行干热灭菌，冷却备用。5.2.3接种准备样品所需的培养皿个数，并一一作好标记，以无菌操作手