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1、主要内容研究背景研究目的研究内容及结果分析小结与讨论展望致谢研究背景化石能源的储量有限,且其大量消耗会带来严重的环境问题,生物能源以其原料多样、可再生性和对环境友好的特点被世界各国重视和开发利用。新型的能源作物。的一大障碍。方法之一。研究背景木质素代谢及调控的相关研究到目前,已经分离鉴定出一系列参与到木质素代谢调控中的转录因子,例如拟南芥,烟草,玉米,水稻,杨树等中的NST、MYB、MYC、SND、VND、LIM等,)。木质素的合成涉及复杂的网络(Naoumkina,Zhaoetal.2010)。通过转录因子调控木质素特异合成途径中酶的活性,进而调控木质素的合成,可以更好的实现对

2、木质素的控制。这是因为未直接改变关键酶,对其涉及的其他代谢通路的影响可能会相应减少。转录因子1研究背景LIM转录因子结构特征:LIM转录因子在结构上都含有一个及以上LIM结构域(LIMdomain),为高度保守的锌指结构域,保守氨基酸序列为CX2CX17~19HX2CX2CX16~20CX2C/H/D。该结构域存在于细胞核和细胞质中,也可以在两者之间穿梭往来。功能:在脊椎动物中属于CRPs亚家族,主要参与:细胞分化;细胞骨架的构建和转录调控;在植物中主要分为两大类:①在花粉中特异性表达的PLIM1和PLIM2;②在植物体内广泛分布的WLIM1和WLIM2。研究背景前期工作查找到与

3、同源性最高,克隆到cDNA全长。在多个bmr突变体中上调表达。构建过表达载体并浸染拟南芥(硕士论文,2012)研究目的研究内容及结果分析聚类分析研究内容及结果分析亚细胞定位pBI221GFP载体示意图载体构建过程研究内容及结果分析亚细胞定位洋葱表皮瞬时表达分析研究内容及结果分析亚细胞定位拟南芥原生质体瞬时表达分析研究内容及结果分析体外转录激活实验pGBKT7载体图酵母表达载体构建研究内容及结果分析体外转录激活实验SD-Trp:SD-Trp-His-Ade:酵母在单缺、三缺培养基上生长情况研究内容及结果分析过表达拟南芥纯系的筛选研究内容及结果分析过表达拟南芥中表达量分析研究内容及结

4、果分析过表达拟南芥木质素含量测定及Wiesner染色***Lignincontent(ODgDW)拟南芥过表达株系同野生型木质素含量测定木质素染色分析:(A)放大倍数100(B)放大倍数200研究内容及结果分析过表达拟南芥株系中木质素代谢途径Marker基因表达量分析研究内容及结果分析过表达拟南芥株系中木质素代谢途径转录因子表达量分析小结与讨论的报告基因转录激活活性;表明该基因确实对木质素的合成有影响,其具体的作用机制还需进一步探究。的拟南芥过表达虽然木质素合成都受到抑制,但其调控的基因却有差异,展望;;;转录因子2研究背景结构特征:功能:研究背景基因背景在SSH文库与基因芯片

5、结果中出现六次,且全部都表现为上调表达,暗示该基因可能参与木质素的调控。。(博士论文,2010)基因在多个bmr突变体中表达上调。研究目的研究内容及结果分析过表达拟南芥中表达受抑制基因启动子区分析表达受抑制各基因启动子区作用元件分析研究内容及结果分析重组蛋白的表达与纯化原核表达载体PET-32a载体图小结与展望;;。致谢敬请各位老师批评指正!

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