植物多倍体的诱发和鉴定.doc

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1、实验11实验11植物多倍体的诱发和鉴定实验目的：实验目的：1了解人工诱导植物多倍体的原理、方法及其了解人丄诱导植物多倍体的原理、在植物育种上的意义；在植物育种上的意义；2鉴定诱导后染色体数目的变化。鉴定诱导后染色休数目的变化。实验原理：实验原理：各种生物染色体的数目、形态和结构都是恒定各种生物染色体的数目、绝人多数的生物是二倍体，的。绝人多数的生物是二倍体，在植物界多倍体普遍存在，已知被子植物屮有1/3或更多的物种是多遍存在，已知被子植物屮有或更多的物种是多倍体。除了自然界存在的多倍体物种以外，倍体。除了自然界存在的多倍

2、体物种以外，可以采用高温、低温、射线照射、用高温、低温、射线照射、等物理化学方法人工诱发多倍体植物。具中，发多倍体植物。具中，以应用化学试剂更为有效和方便，如秋水仙素、异生长索、富民农等，方便，如秋水仙素、异生长素、富民农等，使用最广泛、效果最好的是秋水仙素。广泛、效果最好的是秋水仙素。实验材料：实验材料：洋葱、人蒜等。本实验选用人蒜。洋葱、人蒜等。本实验选用人蒜。实验用品：实验用品：用具：显微镜、剪刀、银子、解剖针、载玻片、用具：显微镜、剪刀、银子、解剖针、载玻片、盖玻片、酒精灯、铅笔、吸水纸等。盖玻片、酒精灯、铅笔、

3、吸水纸等。药品：蒸馆水、卡诺氏固定液、45%醋酸、秋药品:蒸憎水、卡诺氏固定液、45%醋酸、水仙素、改良苯酚品红染液等。水仙素、改良苯酚品红染液等。实验步骤：实验步骤：1培养根尖：将大蒜瓣放在盛有清水的培养皿培养根尖：让根部接触水,20〜25光照下培养，25°C屮,让根部接触水,在2025°C光照下培养,待根尖长到0时备用。尖长到0.5〜lcm时备用。1cm时备用2多倍体诱导：将水换成0.1%的秋水仙素溶液，多倍体诱导：将水换成0的秋水仙素溶液，在阴喑处培养2犬左右。在阴暗处培养2天左右。3固定：11:30左右将剪取根尖

4、1-2cm冲洗后固定：11：30左右将剪収根尖2cm冲洗后左右将剪収根尖1转移至卡诺氏固定液中，室温下处理3小时小时。转移至卡诺氏固定液中，室温下处理3〜8小时。4解离：将冲洗后的根尖放入mol/L的盐酸中，解离:将冲洗后的根尖放入lmol/L的盐酸中，mol/L的盐酸屮室温下处理1010〜15min。室温下处理10。5染色：切取l~2mm的分生区，用改良苯酚品染色：切取12mm的分生区，的分生区红染液染色1020min10〜20min。红染液染色1020mino6圧片：盖上盖玻片，在酒精灯上烤片。然后压片：盖上盖玻片,

5、在洒精灯上烤片。固定盖玻片，用铅笔垂直、用力敲击盖片儿下，固定盖玻片，用铅笔垂直、用力敲击盖片几下，将材料压成一层细胞。材料压成一层细胞。8镜检：先在低倍镜下找到细胞，再换成高倍镜检：先在低倍镜卜•找到细胞，镜仔细观察。镜仔细观察。请注意比较该实验结果与有丝分裂实验结果有何不同？实验报告：实验报告：1说明秋水仙素诱发多倍体的原理是什么？说明秋水仙素诱发多倍体的原理是什么？2I田i出在显微镜下看到的多倍体细胞的图像;画出在显微镜下看到的多倍体细胞的图像；3了解诱发多倍休在育种方面的意义。了解诱发多倍体在育种方面的意义。实验

6、9实验9植物原生质体的分离与纯化实验目的：实验目的：1学习植物原生质体的分离和纯化技术；学习植物原生质体的分离和纯化技术；2了解原生质体在细胞工程中的应用。了解原生质体在细胞工程中的应用。实验原理：实验原理：原生质休是指去除了细胞壁的植物细胞。原生原生质体是指去除了细胞壁的植物细胞。质体是植物体细胞遗传学研究的一重要实验系统，质体是植物体细胞遗传学研究的一重要实验系统，无论在理论方而述是在实践方而都有重耍的研究价去除细胞壁一般通过酶解的方法，值。去除细胞壁一般通过酶解的方法，植物细胞壁是由纤维素、半纤维素、是由纤维素、半

7、纤维素、果胶质和少量的蛋白质和脂类组成的。由于这些不同物质的化学键，脂类组成的。由丁•这些不同物质的化学键，必须使用混合酶液以降解细胞壁。用混合酶液以降解细胞壁。通常混合使用纤维素酶和果胶酶分离原生质体。和果胶卿分离原生质体。实验材料：实验材料：菠菜、油菜等。菠菜、油菜等。实验用品：实验用品：用具：显微镜、离心机、载玻片、盖玻片、用具：显微镜、离心机、载玻片、盖玻片、尼龙过滤网、离心管、剪刀、蹑子、吸水纸等。龙过滤网、离心管、剪刀、银子、吸水纸等。药品：70%乙醇、甘露醇、CPW缓冲液、纤维素缓冲液、纱品：70%乙醇、卄

8、露醇、CPW缓冲液果胶酶、20%蔗糖溶液等。酶、果胶酶、20%蔗糖溶液等。实验步骤：实验步骤：1选取叶片：选取充分仲展的幼嫩叶片，自来选取叶片：选取充分仲展的幼嫩叶片，水清洗后，用吸水纸吸干水分。水清洗后，用吸水纸吸干水分。2撕下表皮：用钟表铁子将叶子的卜表皮撕掉，撕F表皮：用钟表铁子将叶子的下表皮撕掉，注意不要损伤