Geminin在血管平滑肌细胞分化表型转化中的意义.doc

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1、Geminin在血管平滑肌细胞分化表型转化中的介导作用周叶萍,舒茂琴(400038重庆,第三军医大学西南医院心血管内科,重庆市介入心脏病学研究所)[摘要]目的通过比较静止状态的血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecells,VSMCs)与血清刺激后的VSMCs在分化表烈改变中Geminin的表达变化恬况,探讨Geminin对VSMCs表型转化的影响。方法实验设置静止状态(血清饥饿)对照组、血清刺激纽,研究不同时相2个纽Geminin的分布、活性及表达水平的差异。血清饥饿法可以诱导出VSMCs表型分化及活性差异;免疫荧光

2、染色后激光共聚焦2微镜观察Gcminin核内定位;应用MR检测Gcminin基因表达的变化;Westernbio【检测Geminin蛋[

3、、VSMC合成型标志物骨桥蛋匚I(osteopontin»OPN)及收缩型标志物平滑肌肌动蛋〔I相关蛋白(SW2actin-relatedproteins,ARP)蛋白表达的变化。结果①静止状态下(血清饥饿)VSMCs以收缩型为主,血清刺激后以合成型为主;②静止状态Geminin儿乎全部存在于胞浆内,而血清刺激后Geminin儿乎金部定位于胞核内;③GemininmRNA在血清刺激组明显升高,且在刺激4

4、8h时差异表达最明显,与无血清比较具有统计学意义(/《0.05):©Gcminin蛋口和骨桥蛋白在血清刺激组均明显升高,与无血清比较具有统计学意义(/《0.05)。结论Gcminin参与介导TVSMCs山收缩型向合成型的转化。[关键词]Geminin:血管平滑肌细胞:表型转化[中图法分类号][文献标志码]AEffectofGemininonthephenotypicmodulationofvascularsmoothmusclecellsofratZhouYeping,ShuMaoqin(DepartmentofCardiologytSo

5、uthwestHospital,ThirdMilitaryMedicalUniversityChongqing,400038,China)[Abstract]ObjectiveToinvestigatetheinfluenceofGemininonthephenotypicmodulationofvascularsmoothmusclecells(VSMCs)ofratbycontrastVSMCsondifferentstates.MethodsVSMCsweresetupwithcontrolgroupsonrestingstatea

6、ndpost-stimulatorybyserum,tostudythedispositionoractivityandthedifferenceofexpressionofGemininondifferentphases.SerumstarvationmethodcaninducethephenotypicmodulationandthedifferenceofactivityofVSMCs.ThegeneexpressionofGemininwasdetectedbyPCR.Thechangesofphenotype一dependen

7、tmarkersandtheexpressionofGemininproteinwasanalyzedbyWesternblot.ResultsThepresenceofcontrolgroupswasmainlycontractibilityinendochylema,otherssynthesisinintranuclear.TheexpressionofsyntheticmarkerosteopontinandmRNAandproteinofGemininallraise(P<0.05),furthermore,themostobv

8、iouslydifferentialexpressionwasat48hafterstimulatedbyserum(P<0.05).ConclusionGeminincaninducethephenotypicmodulationofVSMCsfromcontractiletosyntheticone.[Keywords]Geminin;vascularsmoothmusclecell;血管平滑肌细胞(vascularsmoothmusclecells,VSMCs)表型转化(phenotypicmodulation)是高血压、动脉粥样硬

9、化和血管成形术后再狭窄等血管疾病增殖和迁移的关键性起始步骤工。研究已经证实,Geminin,也称为起始特许阻遏了(arepressoroforiginlicensin),是一种特异性细胞周期相

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