DB22∕T 2827-2017 分蘖洋葱脱毒试管苗繁育技术规程.pdf

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1、ICS65.020B05备案号：59191-2018DB22吉林省地方标准本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2827—2017分蘖洋葱脱毒试管苗繁育技术规程Codeofpracticeforinvitrovirus-freeseedtillered-onionbreeding本标准仅供内部使用不得翻印2017-12-11发布2018-04-01实施吉林省质量技术监督局发布本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2827—2017本标准仅供内部使用不得翻印前言本标准按照GB/T1.1—2009给出的规则起草。本标准由吉林省农业委员会提出并归口

2、。本标准起草单位：吉林省蔬菜花卉科学研究院。本标准主要起草人：王秀峰、王学国、张悦、王健鹂、聂楚楚、马艺荞、于永辉、张爽爽。本标准仅供内部使用不得翻印I本标准仅供内部使用不得翻印本标准仅供内部使用不得翻印DB22/T2827—2017本标准仅供内部使用不得翻印分蘖洋葱脱毒试管苗繁育技术规程1范围本标准规定了分蘖洋葱脱毒试管苗繁育的茎尖脱毒与培养、试管苗病毒检测、核心试管球培养、基础苗培养、试种观察、基础苗结球、扩繁及壮苗的技术要求和操作规程。本标准适用于分蘖洋葱脱毒试管苗的培育和扩繁。2规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日

3、期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。GB/T29375-2012马铃薯脱毒试管苗繁育技术规程NY/T401-2000脱毒马铃薯种薯（苗）病毒检测技术规程3术语和定义本标准仅供内部使用不得翻印GB/T29375-2012界定的以及下列术语和定义适用于本文件。为了便于使用以下重复列出了GB/T29375-2012中的某些术语和定义。3.1叶原基leafprimordium茎尖生长点基部形成的突起。[GB/T29375-2012,定义3.1]3.2茎尖stemtip茎的顶端分生组织及其周缘部分。3.3茎尖分生组织meri

4、stem茎顶端部位具有持续或周期性分裂能力的细胞群。[GB/T29375-2012,定义3.3]3.4鳞茎盘bulbdisc鳞茎为地下变态茎的一种。变态茎短缩，呈盘状，其上着生肥厚多肉的鳞叶，其下着生根系。内贮藏极为丰富的营养物质和水分。3.5离体培养isolatedculture从生物体分离出符合需要的器官、组织、细胞、原生质体等，通过无菌操作，在人工控制条件下进行培养以获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品的技术。[GB/T29375-2012,定义3.4]1DB22/T2827—20173.6洋葱黄矮病onionyellowdwarf植物疾病，洋葱染病叶

5、生长受抑，叶片扭曲变细，致叶面凹凸不平，叶尖逐渐黄化，有时产出长短本标准仅供内部使用不得翻印不一的黄绿色斑驳或黄色长条斑。葱管扭曲，生长停滞，蜡质减少，叶下垂变黄，严重的全株矮化或萎缩。3.7洋葱黄矮病病毒onionyellowdwarfvirus洋葱黄矮病的病原。3.8脱毒苗invitrovirus-freeplantlet经检测确认不含有洋葱黄矮病毒的试管苗。3.9核心苗coreplantlet通过茎尖分生组织培养技术获得的经检测无病毒的种苗。3.10核心种球coreseed核心苗经过结球诱导后，在试管内形成的种球。3.11基础苗basicplantlet由核心苗

6、繁殖经检测无病毒的种苗。本标准仅供内部使用不得翻印3.12基础种球basicseed基础苗经过结球诱导后，在试管内形成的种球。4茎尖脱毒与培养4.1脱毒材料的选取4.1.1田间选择4.1.1.1在结球期选择生长势强、具备原品种典型性状的健康植株，做好标记。4.1.1.2在生育后期到收获期，对标记的植株中进行复选。选择无病斑、无虫蛀、无机械损伤而且皮色、形状等性状符合品种特征的分蘖洋葱完整种球，清洗后催芽作为脱毒材料。4.1.2病毒检测筛选入选的植株，首先对其进行病毒检测，采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测法（DAS-ELISA）按NY/T401-2000中附录A的方法执行

7、。若检测到没有携带洋葱黄矮病病毒的植株，可直接剥取较大的茎尖，进行培养。4.2茎尖培养4.2.1茎尖培养基的制备4.2.1.1茎尖培养基配方见附录A。4.2.1.2将制备好的茎尖培养基快速分装于透光培养瓶中，用封口膜封口。2DB22/T2827—20174.2.1.3将盛有培养基的培养瓶于121℃高压灭菌20min，自然冷却后备用。4.2.2材料消毒本标准仅供内部使用不得翻印取分蘖洋葱鳞茎盘清洗干净，沥干水分，在洁净环境条件下，75%乙醇浸泡30s后，用1%的次氯酸钠浸泡7min～10min，无菌水冲洗4次～5次。4.2.3茎尖分生组织剥离、接种与培