致奶牛乳房炎大肠杆菌快速诊断及药敏试验方法的改进.pdf

《致奶牛乳房炎大肠杆菌快速诊断及药敏试验方法的改进.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、致奶牛乳房炎大肠杆菌快速诊断及药敏试验方法的改进ImprovementofRapidDiagnosticandAntibioticSensitivityTestsforBovineMastitis．RelatedEscherichiacoliMSCandidate：wangjuanSupervisor：Prof．SunHuaichang研究生：王娟专业：预防兽医学导师：孙怀昌教授扬州I大学兽医学院2014年5月王娟：致奶牛乳房炎大肠杆菌快速诊断及药敏试验方法的改进1致奶牛乳房炎大肠杆菌快速诊断及药敏试验方法的改进

2、摘要奶牛乳房炎是危害奶牛养殖业的重要疾病。乳房炎的病原微生物种类复杂，其中大肠杆菌是主要致病菌之一。目前奶牛乳房炎治疗药物以抗生素为主，但由于抗生素的长期、盲目使用，不仅导致牛奶抗生素残留，而且导致耐药菌株流行，尽早诊断奶牛乳房炎致病菌及其药物敏感性对临床治疗用药有指导性意义。奶牛乳房炎大肠杆菌的诊断有很多类方法，广泛采用的是细菌分离及生化鉴定，具有准确、可靠等优点，但鉴定程序比较繁琐、周期较长，因此寻求快速、准确、简单的大肠杆菌诊断方法是奶牛养殖业急需解决的问题。本研究在大肠杆菌选择培养基MQQ基础上，以刃天青

3、钠作为指示剂，建立了致奶牛乳房炎大肠杆菌快速鉴别诊断及药敏试验方法，能在lOd',时内对否有大肠杆菌感染及其抗生素敏感性做出明确的诊断，主要研究结果如下：在大肠杆菌选择培养基MQQ基础上，以刃天青钠(RS)为指示剂，对指示剂的浓度、大肠杆菌接种量、培养时间以及选择培养特性等进行了较系统的研究，并以乳房炎相关细菌及其组合模拟奶样，对MQQ—RS的选择培养效果进行了验证，进而对临床奶样的大肠杆菌进行诊断。结果显示：MQQ—RS培养基保持原MQQ培养基的大肠杆菌选择培养效果，仅支持大肠杆菌生长，不支持葡萄球菌和链球菌生

4、长；接种大肠杆菌纯培养或阳性奶样，培养后可根据培养颜色变化进行结果判定，含菌量较高的样品能在接种后45时获得明确诊断结果，含菌量较低的样品能在接种后lOd,时作出明确诊断。用MQQ—RS培养法对79份临床奶样进行大肠杆菌选择培养，结果与标准方法的符合率达93．6％。然后，先用标准纸片扩散法测定致奶牛乳房炎大肠杆菌对10种抗生素的药物敏感性，以此作为标准，对MQQ．RS培养法所需的最小抑菌浓度(MIC)进行测定和调整。进而用校正MIC的抗生素浓度，用MQQ．RS培养法对23株分离自临床奶样的大肠杆菌和12份大肠杆菌

5、阳性奶样进行快速药敏试验。结果表明，MQQ．RS培养基能在4．8小时内对大肠杆菌药敏性作出判定，与标准药敏纸片法相比，除链霉素(STR)外，MQQ—RS培养法测定大肠杆菌对氨苄青霉素(AMP)、诺氟沙星(NOR)、四环素(TET)、多粘菌素B(PB)、环丙沙星(CIP)、磺胺甲基异恶唑(SMZ)、头孢哌酮(CFP)、头孢噻呋(CFT)和庆扬州大学硕士学位论文2大霉素(GEN)的符合率均大于90％。关键词：奶牛乳房炎；大肠杆菌；选择性培养基；快速诊断：快速药敏试验王娟：致奶牛乳房炎大肠杆菌快速诊断及药敏试验方法的改

6、进3ImprovementofRapidDiagnosticandAntibioticSensitivityTestsforBovineMastitis．．RelatedEscherichiacoliAbstractBovinemastitisisonethemajordiseasesofdairycattlewhichcausesheavylossestodairyindustry．ThemainpathogenicmicroorganismsofbovinemastitisincludeStaphylococ

7、cusaureus，StreptococcusandEscherichiacoli(E．coli)．Treatmentofmastitisisbasedwithantibiotics，butthemisuseofantibioticshasledtoantibioticresiduesinmilk，widespreaddrug—resistantstrainsTherearemanymethodsfordiagnosisofmastitis-relatedE．coli，buttheidentificationpr

8、ocedureistime。consumingandmorerapidandsimplediagnosticmethodsareneeded．Inthisstudy，weimprovedthepreviouslydevelopedMQQselectivemediumbyusingresazurinsodium(RS)asindicatorformorerapiddiagn