冠心病患者外周血单个核细胞YKT6基因表达及其临床意义.pdf

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1、医学检验与临床2014年第25卷第4期MedicalLaboratoryScienceandClinics，2014，Vo125，N0．4·1·673-5013．2014．04．001]冠心病患者外周血单个核细胞YKT6基因表达及其临床意义梁洁玲李海珠王洋洋陈立强△刘健(肇庆市第一人民医院检验科，广东肇庆526021)[摘要]目的：研究YKT6在冠心病(coronaryheartdisease，CHD)患者外周血单个核细胞中的表达及其与疾病发生、发展的关系。方法：分别采用半定量逆转录一聚合酶链反应(RT—PCR)和Westen

2、blot检测40例CHD患者和37例健康者YKT6mRNA和蛋白表达。结果：CHD患者外周血单个核细胞中YKT6mRNA和蛋白表达均明显高于健康者(P<0．05o结论：YKT6表达与CHD发生存在一定相关性，在CHD发病过程中可能起重要作用，为CHD的诊断和预防提供了新线索。[关键词】冠心病；YKT6；囊泡转运；外周血单个核细胞PeripheralbloodmononuclearcellsYKT6geneexpressioninpatientswithcoronaryheartdiseaseanditsclinicalsign

3、ificanceLIANGJie-ling，LIHai-zhu，WANGYang-yang，etal(Depa~mentofClinicalLaboratory，theFirstPeople’SHospitalofZhaoqing526021，China)[Abstract]Objective：ToinvestigatetheroleofYKT6inthepathogenesisofCHD．Methods：Peripheralbloodmononuclearcellwasisolatedfrom40CHDpatientsand

4、37hedthycontrols．therelativeexpressionofYKT6CHDdetectedbySemi-quantitativereversetranscription-polymerasechainreaction(ILT—PC1L)andWestemblottingatmRNAandproteinlevelrespectively．Results：TheexpressionofYKT6wasincreasedinCHDpatients(P

5、ntialtherapyorpreventiontar2etinvolvedintheregulatorymechanismsinthedevelopmentofCHD．IKeywordsJCHD；YKT6：Vesicletransportation；PBMCCHD是常见的血管病中最重要的一种，近年来女16例；年龄(51．5±11．9)岁，冠脉造影正常，无随着人们生活水平的提高患病率有明显增加的趋势。冠心病和心肌梗死相关临床症状，血清肌钙蛋白(cTnI)YKT6，又称突触小泡蛋白同源物YKT6前体，是由阴性(<0．1．g／mL

6、oYKT6基因编码的蛋白，YKT6转运蛋白在参与胆固醇1．2仪器与试剂囊泡分泌转运并发挥重要作用，因此YKT6可能在冠PCR分析仪(ABI9500)、人单个核细胞分离心病的发生与发展过程中发挥着重要作用；本项目利液(上海沪峰生物科技有限公司)、RNA提取试剂盒用分子生物学技术检测YKT6在CHD患者单个核细胞(invitrogen)、逆转录试剂盒(大连宝生物公司)、PCR中的表达变化，旨在了解它在CHD发病机制中的作用，引物(上海生物工程公司)、YKT6抗体(SantaCruz进一步探讨其在CHD发生发展中的意义。Biotec

7、hnology)等。1-3方法1资料与方法1．3．1标本采集及单个核细胞分离无菌操作采静脉血3mL，用乙二胺四乙酸二钾1．1一般资料(EDTA·K2)抗凝，使用单个核细胞分离液密度梯度CHD组：选择本院确诊的CHD患者40例，符合离心分离单个核细胞。加入1mLTRIzol，一80℃保存。欧洲心脏病学会和美国心脏病联合委员会(ESC／ACC)1．3．2抽提单个核细胞TotalRNAAS诊断标准，其中男27例，女13例；年龄(53．2±12．4)取经TRIzol处理好的匀浆单个核细胞室温静置，岁；对照组：选择37名健康体检者，其中

8、男21例，加入0．2mL氯仿，剧烈震动15S，室温静置2min；4℃、通讯作者：陈立强，E-mail：lqchen81@163．com广东省科技厅产业技术研究与开发资金计划项目资助编号：2012B031800498肇庆市科技创新计划项目资助编号：2012E284·2·Medi