莠去津高效降解菌的分离与鉴定.pdf

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1、第46卷第2期化工技术与开发Vol.46No.22017年2月Technology&DevelopmentofChemicalIndustryFeb.2017莠去津高效降解菌的分离与鉴定吕惠萍（菏泽学院化学化工系，山东菏泽274015）摘要：笔者从长期使用莠去津的农田和果园的土壤中分离到3株莠去津降解菌，编号为AT-2、AT-3、AT-4。通过生理生化指标和形态分析，对AT-2以及本实验室现有的3株降解菌HB-1、HB-7、HW-4进行初步鉴定，分别为土壤杆菌属、布鲁氏菌属、葡萄球菌属、假单胞菌属。测定这4株菌的降解率，反应条件为：底物莠去津浓度为-1-1100mg·L

2、，反应体系5mL，5%的接菌量，恒温30℃，180r·min，培养24h，其降解效率分别为34.2%、37.3%、43%和40%，但在3d后，4株菌的降解率可达到90%左右。关键词：莠去津；降解菌；降解率中图分类号：TQ457.2文献标识码：A文章编号：1671-9905(2017)02-0022-03莠去津（Atrazine）又名阿特拉津，化学名称为2-1材料与方法氯-4-乙胺基-6-异丙胺基-1,3,5-三嗪，是一种选择性内吸传导型苗前、苗后除草剂。但由于其残留期长1.1培养基、试剂与仪器(4~57周)，形成了对土壤、水体等的污染。2002年1.1.1液体无机盐培养

3、基Nature上报道了莠去津在低于EPA饮用水标准的暴酵母浸膏1g，蔗糖3g，磷酸氢二钾1.6g，磷酸露剂量下,导致了非洲爪蛙性别的改变，使其以内分二氢钾0.4g，硫酸镁0.2g，氯化钠0.1g，2mL微量元泌扰物（EDC）的“身份”再次引起人们的关注[1-3]。4-1素溶液，10mg·L莠去津母液10mL，去离子水环境中莠去津的降解代谢可分为生物过程和非1000mL；固体无机盐培养基按20%加入琼脂。生物过程，其中生物降解代谢是去除莠去津污染的1.1.2土样和水样主要途径。20世纪60年代以来，许多国家均致力菏泽牡丹区、陕西省榆林市、潍坊寿光等地有莠于寻找莠去津的高

4、效降解微生物的研究，截止到目去津残留的玉米地和果园内。前，分离到的降解莠去津的微生物主要包括细菌、真1.1.3微量元素的制备[4][5]菌、藻类等。降解莠去津的细菌主要有诺卡氏在蒸馏水中溶解ZnCl20.25g、MnSO4·H2O1.0g、[6][7-9]菌（Nocardia）、红球菌（Rhodococcus）等。由于Na2MoO4·2H2O0.25g、H3BO40.2g、FeSO4·7H2O1.0g、[10]莠去津对环境的污染具有全球性，因而从环境中CuCl2·2H200.25g、NH4NO3O.1g、NiSO4·6H2O0.1g、富集分离莠去津高效降解微生物，仍是今

5、后莠去津Co(NO3)2·6H2O0.25g，定容至1000mL。[11]生物修复研究的一个主要方向。目前通过基因1.1.4仪器工程对细菌进行遗传修饰以满足生物修复工程的需生化培养箱、超净工作台、全自动立式灭菌锅、试[12-14]要是主要研究内容。本项目从受莠去津污染、玻璃平板、三角瓶、相机、高速冷冻离心机、可调式严重的河、土壤中筛选莠去津高效降解菌，结合本微量加样器、冰箱、漩涡振荡器、气相色谱等仪器。实验室现有的菌株，采用菌株的形态结构观察法和1.2试验方法生理生化指标法来确定其种类，并对所筛选的高效降解菌进行降解性能的初步研究，根据实验所得降1.2.1莠去津降解

6、细菌的分离筛选解菌的形态结构和生理生化指标，参考《伯杰细菌采用接分离法分离筛选，实验步骤：[15]1）取土样10g放入6个盛有90mL无菌水并带鉴定手册》等进行鉴定。作者简介：吕惠萍(1985-)，女，菏泽学院化学化工系助理实验师。研究方向：应用化学收稿日期：2016-12-13第2期吕惠萍：莠去津高效降解菌的分离与鉴定23有玻璃珠的三角瓶中，振荡摇匀，使土样与水充分混定结果见表1。-1-2-3-4-5-6表1莠去津高效降解菌的生理生化特性的测定合，然后制成10、10、10、10、10、10等不同稀释度的土壤溶液。菌株Strains试验Test2）将其中的10-1、1

7、0-4、10-6这3个稀释度的土AT-2HW-4HB-1HB-7壤溶液均匀涂布到含莠去津的无机盐固体培养基个体形状短杆短杆卵球卵球上，于培养箱内培养，出现菌落后再逐次提高莠去津革兰氏染色---+的浓度进行驯化，以获得菌株的纯培养，并于4℃保柠檬酸盐利用----存备用。葡萄糖发酵+---1.2.2生理生化实验法甲基红（M.R.）----乙酰甲基醇（V-P）测定----葡萄糖氧化发酵实验；吲哚试验；V-P试验；甲淀粉水解+---基红（MR）试验；柠檬酸盐利用；淀粉水解实验；油油脂水解试验+---脂水解试验；石蕊牛乳试验。吲哚----1.2.3