褐藻多糖对糖尿病小鼠血糖影响的研究.doc

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1、褐藻多糖对糖尿病小鼠血糖影响的研究11,1冃I」5随着生活水平的提高,糖尿病(diabetesmellitus)的发病率持续丄升,己成为继心脑血管疾病、癌症之后危害人类身体健康的第三大致残和致死性疾病。糖丿求病是由血糖、脂肪和蛋白质代谢紊乱引起的慢性病。一般认为糖尿病与遗传、环境、病毒感染、肥胖、种族、营养物质代谢失衡以及内分泌失调等因索有关。可分为1型,IDDM-胰岛素依赖性糖尿病和11型,NIDDM-非胰岛素依赖性糖尿病、其它特殊类型和妊娠期糖尿病四类。I型糖尿病患者体内胰岛B细胞破坏,导致朕岛素分泌绝对不足,为儿童及青少年最常见的内分泌疾病。II型糖丿亲病则是源于0细胞功能低下,丿炭岛索

2、相对缺乏与腆岛索抵抗(IR)。糖尿病临床表现为血糖水平升高,引起糖代谢紊乱,继发蛋白和脂肪代谢紊乱,同时导致心脑血管疾病、肾功能衰退及视网膜病变。H前,临床上糖尿病的主要治疗手段是注射胰岛素和口服降血糖药,然而长期注射胰岛素、使用口服降血糖药可以引起朕岛素依赖性和苏木杰效应。研究表明,屮药在糖尿病及其并发症的治疗方面取得了较大进展,因此,在屮药屮寻找合适的降血糖药物已经成为降糖药物研究的新的方向。多糖作为屮约降糖的主要活性成分,其在治疗糖尿病及其并发症方面的作用得到了广泛的研究,研究表明,多糖主要通过以下几个方而调节血糖:通过其受体调节糖代谢激素水平和酶的活性、通过抗氧化作用和提高机体免疫力等

3、途径,增加糖利用,抑制糖异生,达到改善糖代谢紊乱和胰岛素抵抗的作用。多糖已越来越受到人们的关注,有学者预言21世纪前几十年将是“多糖吋代”,有研究表明褐藻多糖具有很好的清除氧自由基的作用,反映了其具有抗氧化作用⑴。本文研究了褐藻多糖对正常小鼠和以STZ诱导的糖尿病小鼠模型的影响,检测其血糖、甘油三酣(TG)、总胆固醇(TC)等指标,观察褐藻多糖降血糖作用及其对糖尿病小鼠血脂代谢的影响,为其进一步开发利用提供理论依据。材料与方法—、动物来源:昆明种小鼠,雌雄各半,18〜22g,由北京军事医学科学院动物实验屮心提供,合格证编号:0029535二、主要的试剂与仪器设备1•主耍试剂:褐藻多糖:由屮国科

4、学院金属研究所提供;盐酸二甲双弧:天津太平洋制药有限公司产詁;链腺佐菌素:为Sigma公司产品;葡萄糖、总胆•固醇(TC)、甘油三酯(TG)试剂盒:均为长春汇力生物技术有限公司产殆。2.主要试剂的配制:⑴四氧卩斛定的配制:将ALXH1生理盐水溶解稀释为10%的浓度用直径22um的滤菌器过滤。(2)链豚佐菌素的配制:%1先配制A液:0.1mol/L柠檬酸水溶液:柠檬酸晶体(C6H8O7*H2O)2.10g加蒸倔水至lOOmlo%1再配制B液:0.1mol/L檬酸三钠水溶液:柠檬酸三钠晶体(C6H5O7Na3*2H2O)2.94g加蒸懈水至lOOmlo%1按A液28.0ml,B液22.0ml的比例

5、扩人倍数混合后,即可得到所需()」mol/L、pH4.4的朽檬酸缓冲液液体总量,必要时高温高圧消毒,4°C冰箱保存备用。3•主要的仪器和设备TU-1810紫外可见分光光度计,北京普析通用仪器有限责任公司;BS-124S电子天平,德国塞多利斯股份公司;TGL-16G-A离心札上海安亭科学仪器厂;HPX-9052MBE电热恒温箱,上海博迅实业有限公司;F6/10超细匀浆机,上海弗鲁克流体机械制造有限公司;4.实验方法:⑴褐藻多糖对正常小鼠的影响:取小鼠20只,随机分为正常对照组和褐藻多糖组。褐藻多糖组每天分别给予500mg/kg的褐藻多糖,正常组每天给予同体积蒸倔水,第14天眼眶后静脉丛取血,分离

6、血清,测定血糖,取血前一晚禁食不禁水。⑵褐藻多糖对STZ致实验性糖尿病小鼠的作用:%1造模方法:取小鼠30只,分为正常组、STZ组和ALX组,适应性喂养一天后禁食12h,ALX组一次性腹腔注射ALX200mg/kg,STZ组一次性腹腔注射STZ50mg/kg,正常组给予生理盐水。1周后,眼眶后静脉丛取血,分离血清,测小鼠空腹血糖。比较两种方法,择优选择STZ组,取血糖值>11.1mmol/L的作为糖尿病模型。%1实验方法:取成模小鼠30只,按血糖值的高低随机分组,分为模型组、褐藻多糖组和阳性药物对照组,另取正常小鼠10只,作为空片组。各组小鼠每天早九点灌胃治疗,褐藻多糖组灌胃剂量为500mg/

7、kg,二甲双弧灌胃剂量为160mg/kg,模型组和空白组给予相应体积的蒸耀水。连续灌胃治疗32天,于第8、21、32天小鼠禁食不禁水12h,眼眶取血,分离血清检测小鼠空腹血糖、血清TG、TC值。%1统计学处理:统计学方法采用SPSS统计软件,各组数据均用X土S表示,组间比较用方差分析。实验结果1.褐藻多糖对止常小鼠血糖的影响:连续灌胃给药7天,褐藻多糖对正常小鼠的空腹血糖值有降低趋势,但与对照组比

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