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1、产气荚膜梭菌病分离培养的培养基%1硫乙醇酸钠增菌培养基。胰消化酪蛋白15g,L-胱氨酸0.5g,酵母浸膏5g,氯化钠2.5g,硫乙醇酸钠0.5g,刃天青0.001g,瑚旨0.75g蒸憾水1000mlo加热融化后，调pH7・2〜7.4,分装于带螺帽试管成半固体高层，121°C高压灭菌ISmino贮于4〜C冰箱备用。检样接种后，置46、C水浴屮培养4〜6h。%1BCP培养基。2号血琼脂基础(0xoidCM271)40明显浑浊及产气者为阳性。可继续进行平板分离。肌醇10g,甘露醇10g,内酮酸钠lg,1%浪甲酚紫乙醇溶液4ml,蒸憾水1000mlo加热融化，调pH7・2-7・4,121
2、°C高压灭菌15mino冷至50、C吋加入50%的无菌卵黃盐水10ml,倾注平板，置4、C冰箱可保存一个月以上。检样接种后，先于37'C预培养2〜4h,继之在43〜45°C培养过夜。产生卵磷脂酶及对肌醇发酵，可定为产气荚膜梭菌。培养基屮若加入新霉素lOOFg/ml,环丝氨酸400big/ml,多黏菌素101U/ml,可增加其选择性。%1结晶紫-血琼脂。明胶基础琼脂500ml,加热融化，冷至50~C时,加1%结晶紫水溶液0.2ml,无菌脱纤牛血25ml,摇匀，倾注平板，贮于4~C冰箱备用。%1改良m-CP培养基。胰豚3g,酵母浸膏2g,蔗糖0.5g,盐酸胱氨酸0.lg,硫酸镁0.0
3、1g,溟甲酚紫0.004g,琼脂1.5g,蒸惚水90mlo121°C高压灭菌15min,冷却至5(fCn寸，加入滤过灭菌的2%二磷酸酚酿2nd,4.5%氯化铁溶液o.2ml,以及抗菌混合液8ml(内含环丝氨酸40mg,多黏菌素2.5mg,夕-D-糖60mg)o检样接种后，在45°C培养18h,产气荚膜梭菌菌落为不透明，乳黄色，如将平板覆于氨气上，则变为红色或暗红色菌落。%1铁-亚硫酸盐琼脂。胰月东10g,亚硫酸钠lg,琼脂20g,硫乙醇酸钠5g,蒸锚水1000mlo12VC高压灭菌后，加入10ml5%的柠檬酸铁，摇匀，倾注平板。不必调pHo%1TSC培养基。为胰豚-亚硫酸盐环丝氨
4、酸培养基。胰腺15g,大豆蛋白W5g,酵母浸膏5g,偏亚硫酸钠lg,柠檬酸铁鞍鹿，琼脂20g,蒸馆水1000mlo加热溶解，调P【I7.2〜7.4,121°C高压灭菌lOmino加入滤过灭菌的4%D-环丝氨酸10mi（终浓度为400Fg/ml）o待其冷却至50~C时,加无菌50%蛋黄盐水乳剂80ml,摇匀，倾注平板。供涂皿培养用的须烘干表而水湿；供层叠用的TSC琼脂可不加蛋黄液。%1SPS琼脂。为亚硫酸盐-多黏菌索-磺胺卩密喘琼脂。胰蛋白月东15引柠檬酸铁0.5g,琼脂20g,蒸憾水1000mlo加热煮沸1〜加in溶解,121°C高压灭菌15min,最终pII7.2o每升灭菌培养
5、基加入下面的过滤除菌的溶液：100g/ml亚硫酸钠溶液（NaSOa-7H：0）5ml；1.2g/L多黏菌素B硫酸盐溶液10ml；12rng/ml^t胺『斛定钠溶液10mlo产气荚膜梭菌在此培养基上生长成黑色菌落。%1PY培养基液。多B20g,酵母浸膏5g,NaCl5g；蒸馅水1000ml,pH6.6-7.0。以9ml量分装试管。121°C高压灭菌15raino用前在水浴中加热,加入滤过灭菌的10%蔗糖ImL%1促芽砲培养基。酵母浸膏3g,蛋白豚10g,可溶性淀粉3g,Na2HP04•7H：07g,KH2P0,（无水）1.5g,MgSO,0.lg,硫乙醇酸钠lg,蒸馆水1000ml
6、opH7.6,121°C高压灭菌15raino
