生物化学与检验8.ppt

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1、第八章体液蛋白质检验人类白蛋白分子1本章内容概要：第二节体液蛋白质测定第一节概述21、掌握血浆蛋白质的组成、功能及分类；个别血浆蛋白质（前白蛋白、白蛋白）的来源和生理功能；血清总蛋白和白蛋白的测定方法和原理。2、熟悉急性时相反应蛋白的概念和种类；血清球蛋白和纤维蛋白原的测定方法3、了解其他蛋白质的来源和生理功能；尿液蛋白和脑脊液蛋白的检测。本章教学要求：3第一节概述机体蛋白质：体液蛋白质的检测：机体主要的生物大分子含量：人体固体成分的45%种类：10万，3000~5000种/单细胞功能：生长，代谢、血凝、运动、免疫、信息传递等疾病发生体液蛋白质异常4要判断异常首先要清楚正常的血浆蛋白质组成，功

2、能及分类及特点一、血浆蛋白质的组成、功能及分类组成：种类：1000种500种200种含量：μgmgg来源：肝脏是蛋白质主要的加工厂5功能：①营养作用，修补组织蛋白;②维持血浆胶体渗透压：白蛋白维持75%~80%的血浆渗透压；③作为PH缓冲系统的一部分：酸性或碱性蛋白质；④作为激素、维生素、脂类、代谢产物、离子、药物等的载体；⑤体液免疫防御系统：作为免疫球蛋白与补体等免疫分子；⑥催化作用：酶的本质；⑦代谢调控作用；作为底物，酶或中间产物抑制或激活组织蛋白酶；⑧参与凝血与纤维蛋白溶解；：除Ⅳ因子外均可6分类：依据来源、分离方法和生理功能来源肝生成：绝大多数血浆蛋白质其他组织细胞生成：免疫球蛋白和蛋

3、白类激素7分离方法盐析法：白蛋白/球蛋白（pH7.0半饱和的硫酸铵溶液）电泳法：醋酸纤维素薄膜电泳：6种琼脂糖凝胶电泳：13种聚丙烯酰胺凝胶电泳：30种SDS聚丙烯酰胺凝胶等电双向电泳：300种分辨率增高---+纤维蛋白原醋酸纤维素薄膜8即时可用的蛋白质电泳标准9功能分类:10二、个别血浆蛋白质结构：MW=54000，四个相同亚基构成的四聚体。理化性质：pＩ＝4.7，肝细胞合成，半寿期12小时。测定方法：免疫比浊法／免疫扩散技术。（一）前白蛋白（PA）急性时相反应蛋白11功能：营养指标，载体功能（甲状腺素／维生素Ａ）。临床意义：敏感性高的指标；降低：营养不良，肝功不全，急性炎症，恶性肿瘤，肝硬

4、化及肾炎时。参考值：200—400mg/L。12结构：585个aa残基构成的单链多肽，MW=66458，含17个二硫键。理化性质：pI=4－5.8，肝细胞合成但不储存，半衰期为15-19天，占总蛋白的40%－60%，pＨ7.4时带负电。测定方法：色素结合法:溴甲酚绿（BCG），溴甲酚紫（BCP）,盐析等。（二）白蛋白（ALB）急性时相反应蛋白13功能：营养作用，载体功能（高亲和力），维持血浆渗透压和正常pＨ值。临床意义：合成受食物影响，敏感性较低。降低:在营养不良，肝功不全，急慢性肝疾病时;增高:少见,假性升高。参考值：35-50g/Ｌ14结构：394个aa残基构成的单链多肽，含10％～12%

5、的糖MW=5.5万。理化性质：pI值为4.8，占α1-球蛋白区带显色的90％。测定方法：免疫化学法，电泳（酸性凝胶电泳或等电聚焦电泳），利用蛋白酶抑制能力测定等。（三）α1-抗胰蛋白酶（AAT）急性时相反应蛋白15功能：蛋白酶抑制物（具有90％的抑制蛋白酶活力）。如糜蛋白酶，弹性蛋白酶，但此抑制作用有明显的pＨ依赖性。临床意义：降低：血浆AAT仅见于胎儿呼吸迫综合症。升高：炎症、术后，某些激素治疗后。参考值：0.83－1.99g/L16结构：181个aa残基构成的单链多肽，MW=4万，含45%的糖，其中唾液酸占11%－12%。理化性质：pI值2.7－3.5，肝合成，脓毒症时粒细胞和单核细胞及某

6、些肿瘤组织也可合成。位于α1-球蛋白区带。测定方法：免疫化学法（扩散,浊度）,化学法（间接法），ELISA法等（四）α1-酸性糖蛋白（AAG）急性时相反应蛋白17功能：与免疫防御功能有关，机制不详；抑制血小板凝集影响胶原纤维形成；参与脂类运输。临床意义：升高：急性炎症，组织损伤，风湿，肿瘤，AMI，溃结时；降低：营养不良降低,严重肝损伤和雌激素作用。参考值：０.25－2.0g/L。18结构：590个aa残基构成的单链多肽，MW=6.5万～７万，含4%的糖。理化性质：pI值４.7-４.8，在白蛋白和α1-球蛋白之间。胎儿肝／卵黄囊合成，成人量微，升高由于肿瘤细胞合成。测定方法：免疫化学法（扩散,

7、火箭电泳）,ELISA等（五）甲胎蛋白(AFP)19功能：胎儿血浆主要蛋白质，调节肝细胞生长和脑细胞发育；抑制细胞和体液的免疫反应；维持正常妊娠，防止母婴排斥。临床意义：胎儿产前监测（羊水或母血）增高：原发性肝癌患者诊断和鉴别（80%原发增高），其他癌症也可见增高。参考值：20-100μg/L(成人)<5g/L(新生儿)20结构：两对肽链形成四聚体，有变异体。理化性质：肝合成，pI值为4.1，电泳