转拟南芥CAO基因烟草的构建及弱光耐受性分析.pdf

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1、南方农业学报JoumalofSouthemA扣cuIture2015，46(6)：95l一957ISSN2095—119l：CODENNNXAABhttp：／／、州w．Ⅲhyxb．cnDOI：10．3969，j：issn．2095—1191．2015．6．951转拟南芥CA0基因烟草的构建及弱光耐受性分析张伟p，李翠萍p，张兴国2，张煜·(1新乡医学院生物化学与分子生物学教研室，河南新乡453003；2西南大学园艺园林学院／南方山地园艺学教育部重点实验室，重庆400715)摘要：【目的】探讨转拟南芥叶绿素酸酯a加氧酶(chlorophyllideaoxygenase，A

2、tcAo)基因烟草的耐弱光性，以明确A自CAo基因能否提高烟草对弱光的捕获能力，为其他作物的耐弱光性改良提供参考。【方法】将AfcAo基因克隆、构建表达载体后，通过农杆菌介导法导入烟草(Mco妇1a纽妇c啪L．cv．WisconsiIl38)，弱光处理后，测定叶绿素、光合速率、株高等相关指标。【结果】农杆菌介导法转化烟草后，提取抗卡那霉素(K蚰)烟草与野生烟草基因组DNA，PCR检测证明抗x舶烟草含有A自以。基因，且无农杆菌污染，说明获得了整合有AdC!AO基因的烟草植株；弱光处理后，发现转A自CA0基因烟草的叶绿素a含量增加23．5％～38．1％，叶绿素b含量增加40

3、．0％～54．3％，叶绿素总量增加26．7％~41．3％，叶绿素拍比值降低913％r11．7％，光合作用增强38．8％44．6％，除株系Tc3的叶绿素a含量、叶绿素总量增加不显著(P>0．05，下同)外，其余指标均达差异显著水平(P<0．05)，且株高比野生烟草增加7．8％~24．5％，但差异不显著。【结论】AfcA0基因显著增加了弱光下烟草的叶绿素a、b含量，增强了光合作用，且一定程度上促进了烟草植株的生长，推测其可在其他作物的耐弱光性改良上发挥作用。关键词：烟草；AfCA0基因；光合作用；耐弱光性中图分类号：S572文献标志码：A文章编号：2095—119I(201

4、5)06一0951一07ConstructionoftransgeIlictobaccocontailIingAraⅨ出啦豳缅aJja肋CAogeneandanalysisofitslowHghttolera眦eZHANGWei卜，ⅡCui—pingp，ZHANGXing—gu02，ZHANGYul(1Depanment0fBiochemistryaIldMolecularBiology，Xill】【i锄gMedicalCouege，XifI】【i粕g，Henan453003，China；2CoUegeofHonicultureandLmdsc印eArchitectur

5、e，SouthwestUnive璐ity瓜eyIabomtoryofHorticultureScienceforSoutllemM0untainousRe西ons，Chongqing400715，Cbina)Abstract：【Objective】ThelowlighttoleranceoftransgenictobaccocontainingAraMdops西majjanaChlomphyUideaoxygenasegene(AfCA0)wasinvestigatedtocoIlfi珊whetIlerAfCA0genecouldeII}Iancetobacco’sab

6、ilitytocaptIIre10wlight，inordertopmvidereferencesforimpmvinglowlighttolemceofothercmps．【Method】neclonedAfcA0genewaslinkedtoconstmctbinaryexpressionvector(pCAMBIAl302)。thenpCAMBIAl302wereintroducedintotobacco(Ⅳ而of面nafahacumL．cv．Wisconsin38)usin只A．fu脚如cj即smediatedmethod．Finally，thechlomphy

7、U，photosyntheticrateandplantheightasweUasotllerrelatedindexesof咖sgenictobaccoweredete咖inedafterlowli小tstress．IResuh】DNAextractedf而mkanamvcin—resistanttobaccoshowedthatthekanamycin—resist锄ttobaccocontainedA圯A0geneandwasnotcon枷natedwitllA．fume蠡c渤scompa工edwitIlDNAextLacted‰m