组培技术培训：茎尖培养简易流程--亚龙组培.doc

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1、组培技术培训：茎尖培养简易流程一亚龙组培茎尖培养是把茎尖的分生组织或包括有此分生组织的茎尖分离进行无菌培养的方法。在植物组织的培养屮，曾是很早以來就被应用的一种方法，茎尖培养除研究枝条的发育和花的形态形成外，也应用于无病毒植物的培养和兰花等园艺作物的营养繁殖等方血，日前此方式是生产无毒苗最基本的方法，下曲简单介绍。组培技术培训1、外植体的选取及预处理⑴外植体选取选取生长健壮、L1发芽、长势较好、无病害的生姜根状茎作为外植体。⑵材料预处理取带芽的枝条或鳞茎球茎，先用白來水冲洗，冲洗掉灰尘、虫体和虫卵等，然后扳取或用清洁剪刀剪取带芽部位（约l

2、cmXlcm人小），顶芽和腋芽、人芽和小芽分开。继续清洗10分钟（可加清洗剂如洗洁精等），清洗时需不停晃动。再用自來水冲洗干净，置空培养瓶备用。2、超净工作台无菌操作准备检杳超净工作台，是否C开机火菌，酒精灯、酒精瓶、无菌水、培养瓶放置与位置、接种器械是否齐备与放置：3、外植体消毒（1）酒精消毒75%酒精倒入装外植体的容器内，消毒外植体不超过30s,时间长短视植物材料情况而定，-般幼嫩材料和室内带菌培养材料消毒吋间短，老材料或室外材料消毒时间长。动作一-定迅速，需晃动，然后将酒将倒去。整个时间计算以酒粘倾倒开始至酒精倒出瓶外为止。（2）氯

3、酸钠消毒1%次氯酸钠溶液倒入装外植体的容器内，消毒外植体时间长短视情况而定，一•般嫩的部位消毒时间较短，老的部位时间较长，同时需晃动。（3）蒸馆水清洗丿I」毁子将外植体取出，放入另一无菌蒸僻水瓶屮清洗，反复清洗3次。4、材料的整理用灼烧冷却的铁子和剪刀对外植体进行处理，剥离外植体材料芽外部小叶片，露出尖端生长点和2-3片叶原基部分。（需在超净台中的酒粘灯前进行）5、接入培养基培养基瓶放入工作台内，将剥离的材料分别川消毒过的铁子放入培养瓶内，盖上瓶盖，置培养篮内，写上培养时间、操作人及培养品名，入培养室培养。（需在超净台小的酒精灯前进行）