中草药对大肠杆菌体外抑菌试验.pdf

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1、＊中草药对大肠杆菌体外抑菌试验路振香时维静杨用光（安徽技术师范学院，安徽凤阳，233100）选用27种不同的中草药制剂（煎剂、挥发油、蒸馏液，以平板稀释法和纸片法对一株肉鸡源的大肠杆菌进行体外抑菌试验。结果表明，有14种中药对此株大肠杆菌有不同程度的抑制作用。试验还表明中药制剂的配方工艺不同，其抑菌的效果亦有不同。关键词：中药；大肠杆菌;抑菌作用中兽医学有着悠久的历史和丰富的应用经验，在抗生素使用以前，对保障家畜健康起着重要作用。随着科学技术的不断发展，西药以其方便快捷的优势逐渐在临床应用中占据主导[1]地位，但由于西药抗生素类的广泛使用，使得病原菌的抗药性日趋增强，中草药作为替代[2-3]

2、抗生素解决抗药性和药残的重要方案，越来越受到重视，尤其是近年来肉食品中的抗生素残留问题已经被提到了一定的高度，而大肠杆菌又属于多血清型和变异型强的细菌，极易产生抗药性，笔者用不同种类和浓度的中药制剂分别用平板稀释法和纸片法对大肠杆菌进行体外抑菌试验，以期筛选出具有临床应用价值的中药制剂，为畜牧业生产服务。1材料方法1.1材料1.1.1试验菌株肉鸡源大肠杆菌（安徽技术师范学院动科系预防兽医教研室提供）。1.1.2培养基普通营养琼脂、麦康凯琼脂。按常规方法配制。1.1.3单味中药银花、防风、板兰根、白芷、连翘、杏仁、射干、辛夷、贯众、羌活、荆芥、藿香，每ml相当于1g生药量。中草药的煎制与蒸馏由

3、安徽技术师范学院中药实验室完成。1.1.4复方中药银射煎液、麻杏射防煎液、羌藿连防煎液、辛芷荆煎液、辛芷荆蒸馏液、银射蒸馏液、羌藿连防蒸馏液、麻杏射防蒸馏液，每ml相当于1g生药量。1.2方法[4]1.2.1大肠杆菌对中药（单味、复方）敏感性的体外试验——平板稀释法。1.2.1.1取1ml原药液为第一支试管；在第二只试管中分别加入0.5ml原药液和0.5ml生理盐水以倍比稀释法稀释至第四支试管；第五支试管为无药对照，每支试管中均含有1ml不同浓度的药液。先把药液倒入无菌的平皿中，然后倒入60℃左右的无菌的普通营养琼脂或麦康凯琼脂，并迅速混合均匀，制成平板。然后以无菌的涂布棒蘸取细菌均匀涂布于

4、平板表面，置37℃培养箱内培养24h后观察结果。1.2.1.2在第一支试管加入8ml原药液，第二支试管加入4ml原药液，第三支试管加入2ml原药液，第四支试管加入1ml原药液，第五支试管为无药对照，在第二支试管至第五支试管中分别加入4ml、6ml、7ml及8ml生理盐水；按照1.2.1.1的方法制成平板，涂布细菌后＊项目基金：安徽技术师范学院稳定人才基金资助（批准号：YRC200316）置37℃的培养箱中培养24h后，观察并记录结果。[5]1.2.2大肠杆菌对中药（单味、复方）的敏感性试验—纸片法把通过前两步筛选出的对大肠杆菌有明显抑制作用的复方、单味中药制剂分别制成药敏纸片，测定抑菌圈的大

5、小。方法为：取直径为0.6cm的灭菌滤纸片在原药液中浸泡40min，取出备用。在已制备好的平板中，无菌操作放置药敏纸片，每种药物贴6片，然后将平板置37℃温箱中培养24h后测定抑菌圈的大小，取其平均值。２结果2.1平板法抑菌试验结果当用平板稀释法检测大肠杆菌对中草药（单味、复方）的敏感性时，在低浓度下，银射煎液、麻杏射防煎液、新防风挥发油羌藿连防煎煮液辛芷荆煎煮液、银花蒸馏液、板兰根煎煮液及贯众煎煮液都有不同程度的抑菌作用；而连翘水煎液、辛夷煎煮液、射干煎煮液、羌藿煎煮液、藿香煎煮液、连翘挥发油在高浓度下对大肠杆菌的生长才有明显的抑制作用。在低浓度下无抑菌作用的中药有：银花挥发油、辛芷荆蒸馏

6、液、银射蒸馏液、羌藿连防蒸馏液、白芷挥发油、连翘水煎液、杏仁煎煮液。在高浓度下无抑菌作用的有：麻杏射防蒸馏液、荆芥煎煮液、白芷煎煮液。2纸片法测定中草药对大肠杆菌生长的抑制作用结果见表1，从表1可以看出，单味中草药银花、贯众煎煮液、连翘水煎液、射干煎煮液、藿香煎煮液均有较强的抑菌作用，而防风挥发油煎煮液、辛夷煎煮液、板兰根煎煮液、羌活煎煮液的抑菌作用次之。4种复方辛芷荆煎煮液、羌藿连防煎煮液、麻杏射防煎煮液及银射煎煮液都具有抑菌作用。３小结与讨论3.1通过平板稀释法所筛选出的14种中草药（单味、复方）对大肠杆菌都具有不同程度的抑制作用。因此，当用此14种中药进行纸片法药敏试验时都有抑菌圈出现

7、，之所以未对平板稀释法的结果进行详尽阐述是因为其结果不易量化，评定时往往带有主观性，易产生误差而影响结果的准确性。在此，笔者只把平板稀释法当作定性试验来筛选有抑菌作用的中草药，而把纸片法当作定量试验来具体判定中草药抑菌作用的大小。从结果可以看出，单味中药银花蒸馏液、贯众、连翘、射干、藿香对大肠杆菌有明显的抑制作用，而其它单味中药对大肠杆菌的抑制作用较弱。4种复方中药对大肠杆菌具有明显的抑制作用，说明药物配伍适