微生物菌种退化与其复壮保藏.ppt

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1、微生物菌种及其复壮与保藏现代微生物发酵工程研究的内容1菌种的选育和扩大2最经济地利用营养物，按需确定培养基3灭菌4微生物在最优条件下产物的大规模生产5发酵产物的提取纯化6废物的处理、再生和生产环境的净化22微生物菌种及其复壮与保藏微生物菌种及其复壮与保藏1工业生产常用的微生物及要求2菌种的退化与复壮3菌种的保藏32微生物菌种及其复壮与保藏工业生产常用的微生物及要求1.细菌:分布最广，数量最多，单细胞原核，二分裂殖….枯草芽孢杆菌----淀粉酶、蛋白酶嗜热乳杆菌----乳酸醋酸杆菌----醋酸棒状杆菌----氨基酸短杆菌----肌苷酸

2、工业生产常用的微生物42微生物菌种及其复壮与保藏2.酵母菌:单细胞真核，含糖，偏酸，腐生，出芽繁殖，假丝….啤酒酵母----酿酒、细胞色素C、单细胞蛋白、甘油、琥珀酸假丝酵母----面包、石油脱蜡、饲料类酵母----脂肪酶工业生产常用的微生物52微生物菌种及其复壮与保藏3.霉菌:丝状真菌生产菌种:根霉，毛霉，犁头霉，红曲霉，青霉等产品:酶制剂，抗生素，有机酸，甾体激素工业生产常用的微生物62微生物菌种及其复壮与保藏4.放线菌:原核生物，有机质丰富的，微碱性土壤中，无形包子或菌丝片断繁殖。生产菌种:链霉菌属，小单孢菌属，诺卡菌属等产品

3、:链霉素，红霉素，金霉素，庆大霉素等工业生产常用的微生物72微生物菌种及其复壮与保藏纯净健壮产量质量稳定2易于控制培养条件,周期短3对诱变剂敏感4抗污染力强5原料廉价,生长迅速,目的产物产量高6不是病原菌1微生物工业对菌种的要求7产物分泌型82微生物菌种及其复壮与保藏菌种退化：生产菌种或选育过程中筛选出来的较优良的菌株，由于进行一种传代或保藏之后，群体中某些生理特征和形态特征逐渐减退或完全丧失的现象。菌种的退化与复壮92微生物菌种及其复壮与保藏退化的表现产物合成能力下降产量下降发酵力或糖化力降低孢子数量变化菌落大小变化生长能力和生长

4、速度变化102微生物菌种及其复壮与保藏1.菌种退化的原因退化原因基因突变质粒的脱落培养和保藏条件的影响连续移代112微生物菌种及其复壮与保藏基因突变导致菌种退化：自发突变与回复突变10-7----10-9低产株低产株高产株高产株122微生物菌种及其复壮与保藏质粒脱落导致菌种退化：控制产量的质粒脱落或核内DNA和质粒复制不一致。连续传代加速退化的发生：大量低产突变株传代个别低产突变株132微生物菌种及其复壮与保藏不良的培养条件：如营养成分、温度湿度、pH值、通气量等和保藏条件如营养、含水量、温度、氧气等不仅会诱发低产基因型出现，而且会

5、造成低产基因和高产基因细胞的数量比发生变化。142微生物菌种及其复壮与保藏延缓退化了解退化的原因分离纯化科学保藏减少传代152微生物菌种及其复壮与保藏2.菌种退化的防止尽量减少传代162微生物菌种及其复壮与保藏1菌种经常纯化2创造良好的培养条件3用单核细胞移植传代4采用有效的菌种保藏方法172微生物菌种及其复壮与保藏3.菌种的复壮及其方法复壮原理狭义复壮：从大量退化的菌株中分离筛选到那些仍保持优良性状的个体广义复壮：在菌种的生产性能尚未退化前就经常有意识地进行纯种分离与生产性能的测试工作182微生物菌种及其复壮与保藏复壮方法平板划线

6、稀释分离涂布分离毛细管分离纯种分离淘汰法宿主体内复壮法低温等条件处理,使部分退化菌株死亡对于寄生性微生物的退化菌株,可通过接种到的昆虫或动物寄主体内以提高菌株毒性192微生物菌种及其复壮与保藏2.3菌种的保藏一.菌种保藏广义：在广泛收集实验室和生产菌种、菌株的基础上，将它们妥善保管，是指达到不死、不衰、不污染以便于研究、交换和使用的目的。狭义：防止菌种退化、保持菌种的生活能力和优良的生产性能，尽量减少、推迟负突变、防止死亡，并确保不污染杂菌。202微生物菌种及其复壮与保藏原理干燥低营养低温212微生物菌种及其复壮与保藏干燥3液体石蜡

7、2冻干4真空5液氮6斜面1微生物菌种的保藏法222微生物菌种及其复壮与保藏(一).斜面保藏法特点：简便有效，易变异，退化甚至死亡。适合：不要求长期保藏的及不适合冷冻干燥的。保存期:3个月232微生物菌种及其复壮与保藏影响保藏效果因素营养略贫乏氮源略多糖类少培养基124℃培养条件242微生物菌种及其复壮与保藏（二）.液体石蜡油保藏法保存期:2-3年，甚至5年传代一次.特别适合:在固体培养基上不能形成孢子的丝状担子菌，如大型食用真菌和药用真菌以及镰刀菌、红曲霉等.注意：保藏温度，液体石蜡需灭菌和除水252微生物菌种及其复壮与保藏（三）.

8、干燥保藏法适于:能产生孢子或芽孢的微生物沙土麦麸硅胶适合产孢子的霉菌和放线菌适合丝状真菌和酵母菌262微生物菌种及其复壮与保藏砂土沙土管菌种粒度，除钙，除铁及pH。砂和土混合比例：1：1或3：2。121℃间歇灭菌3次，每次1-1.5小