园艺植物组织培养第12章.doc

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1、12种质贮存种质保存的主要R的：种质保存的主要冃的：最大限度地保持每种物种的遗传多样性。植物的遗传多样最大限度地保持每种物种的遗传多样性。性可以表现在物种的水平上，也可以表现在品种和个体的性可以表现在物种的水平上，水平上，保存这种多样性的方法有两类：水平上，保存这种多样性的方法有两类：一类是原生境保存(insiUiconserva(ion)—类是原生境保存(一类是异生境保存(exsituconservation)一类是异生境保存(原生境保存是指在自然条件下对传统的地方品种及其野生物种的保存，保存手段主要是建立自然保护区。在保护生物种的保存，

2、保存手段主耍是建立自然保护区。区内，野生种自我繁衍，并有可能与地方品种天然杂交，区内，野生种自我繁衍,并有可能与地方品种天然杂交，从而形成一个植物育种家难以模拟的进化系统。从而形成一个植物育种家难以模拟的进化系统。异生境保存则是指人工创造的环境条件下对种子或离体的植物细胞、组织和器官的保存，其中种子保存是种质保存植物细胞、组织和器官的保存，的一种传统方式。的一种传统方式。自1975年Henshaw和Morel首次提岀离体保存1975年Henshaw和Morelff次提岀离体保存(conservsfioninvitro)®物种质的策略以來，该

3、项技术vitro)植物种质的策略以来植物种质的策略以来，受到植物界的高度重视。常用的离体保存方法有组织培受到植物界的高度重视。养保存法(tissue养保存法(tissuecultureconservation)^!超低温保存法conservation)和超低温保存法(cryopreservation)。前者适合中短期保存,(cryopreservation)o前者适合屮短期保存，后者用于长期保存。期保存。12.1组织培养保存法利用组织培养技术保存种质资源的理论基础是植物细胞具有全能性的学说。该技术只适合丁试验材料、有全能性的学说。该技术只适

4、合于试验材料、育种材料等的短期保存，一般采用正常生长的途径，期保存，一般采用正常生长的途径，也就是将带有腋芽的茎段接种在MS半固体培养基上或液体培养基的滤纸上，接种在MS半固体培养基上或液体培养基的滤纸上，然后放在半固体培养基上或液体培养基的滤纸上20〜25°C的条件下培养，并适时进行继代培养，一般60〜90d繁的条件下培养，并适时进行继代培养，一般60〜90d繁殖一次。按组织培养技术保存种质的原理，殖一次。按组织培养技术保存种质的原理，可将该保存方法分为常温继代保存法(room为常温继代保存?i(roomtemperaturesubcul

5、turecon—con一servation)和缓慢生长保存法servation)和缓慢生长保存法(slowgrowthconservation)o和缓慢生长保存法(slowconservation)o12.1.1常温继代保存法指在常温条件下，每隔一段时间，指在常温条件下，每隔一段时间，将植物细胞或组织进行新一轮的继代培养，以达到保存种质的冃的。进行新轮的继代培养，以达到保存种质的冃的。洋芋无根试管苗在MS+BA洋芋无根试管苗在MS+BA8mg/L+NAA0.2mg/L+8g/L琼脂的培养基中,可在常温下保存370d,苗存活率达92%。的培养

6、基中，可在常温下保存370d,苗存活率达92%12.1.2缓慢生长保存法缓慢生长保存，是指通过在培养基中加入化学物质缓慢生长保存，或采用一些物理方法，限制或延缓培养物的生长，使组织或采用一些物理方法，限制或延缓培养物的生长，或细胞的生长速率降至最小限度，但不死亡,或细胞的生长速率降至最小限度，但不死亡，从而达到延长继代培养吋间的Fl的。限制细胞生长速度的途径主耍有：长继代培养时间的冃的。限制细胞生长速度的途径主耍有：改变培养物最适生长温度；调整培养基养分水平；应用渗改变培养物最适生长温度；调整培养基养分水平；透性化合物或生长抑制剂；降低培养

7、环境屮氧含量等。透性化合物或生长抑制剂；降低培养环境中氧含量等。(1)降低培养温度降低培养温度是植物组织培养物缓慢生长保存最常用的方法。较低温度可以减缓植物的生长速度，在一定温度范围内试较低温度可以减缓植物的生长速度，管苗的存活率随保存温度的降低而提高，这种方法适合于保存管苗的存活率随保存温度的降低而提高，中短期的种质材料。一般用1〜9°C低温保存外植体，但热带、中短期的种质材料。一般用1〜9°C低温保存外植体，但热带、亚热带植物在10-25°CZ下也能延缓外植体的生长。亚热带植物在10-25°CZ下也能延缓外植体的生长。此法已在众多无性繁

8、殖的园艺植物上应用，如葡萄、草莓、苹果和一些众多无性繁殖的园艺植物上应用，如葡萄、草莓、茄属植物等。茄属植物等。兰芹英等(2004)在12°C、18°C和24°C条件下对蒙自凤仙