补骨脂素的提取、分离 与鉴定.doc

《补骨脂素的提取、分离 与鉴定.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在工程资料-天天文库。

1、补骨脂素的提取、分离与鉴定补骨脂素、异补骨脂素的提取、分离和鉴定一、目的要求1.掌握用溶剂法提取咲喃香豆素类化合物的操作技术。2.通过补骨脂素和异补骨脂素的分离，熟悉干柱色谱法的操作技术。3.拿握香豆素类化合物的鉴定方法。二、补骨脂中所含主要化学成分的结构及性质补骨脂为豆科植物补骨脂PsoraleacorylifoliaL.的干燥成熟果实。具冇补肾助阳、温屮止泻Z功。主治肾虚阳痿、遗精遗尿及腰膝冷痛，小便频数；外用治白癫风。补骨脂中含冇数种香豆素和黄酮类成分，主要冇补骨脂素、异补骨脂素、补骨脂双氢黄酮（补骨脂甲素）、异补骨脂査

2、耳酮（补骨脂乙素）、补骨脂次素等。药理研究证明，补骨脂甲素有明显扩冠作用，补骨脂素及异补骨脂素是具吸收紫外线性质的光敏性物质，因此是抗白癫风的有效成分，制剂有祛白素，补骨脂注射液、复方补骨脂酊等。1.补骨脂素（psoralen）:C11H603,无色针状结晶（乙醇）,mpl89oC,-190oCo溶于乙醇、苯、氯仿、丙酮；微溶于水、乙醍和石油®L2.异补骨脂素（isopsoralen）:CllH603,无色针状结晶,mpl37oC,-138oCo溶于甲醇、乙醇、丙酮、苯、氯仿；微溶于水、乙醛，难溶于石油讎。1.补骨脂双氢黄酮（

3、补骨脂甲素）（bavachin,corylifolin）:C20H2004,无色结晶，mpl91oC,~192oC,[a]D为・29.1o（乙醇）。2.异补骨脂查耳酮（补骨脂乙素）（isobavachalcone,corylifolinin）:C20H2004,黄色针状结晶，mpl54oC,-156oCo3.补骨脂次素（psoralidin）:mp292oC。三、实验原理根据内酯类化合物在乙醇屮溶解度大，水屮溶解度小的性质，利用乙醇，从中药补骨脂中提取补骨脂素及异补骨脂素，并用活性炭进行脱色，最后利用两者的极性差异，用氧化铝干

4、柱层析予以分离。四、实验内容（一）提取称取补骨脂粗粉200g,放入1000ml烧瓶屮，加入50%乙醇500ml,热回流lh,过滤，回收乙醇至无醇味，放置过夜，倾去上清液，得棕黑色粘稠物。将棕黑色粘稠物加80ml甲醇溶解，加少许活性炭，回流lOmin,趁热抽滤，滤液回收甲醇至小体积，放置析晶。（二）精制将上述粗品加适量甲醇⑶100的比例）溶解,加少许活性炭，回流lOmin,趁热抽滤，滤液放冷析晶，滤取结晶，少量甲醇淋洗，80oC以下干燥即得补骨脂素精品。（三）补骨脂素和异补骨脂素的分离取色谱用屮性氧化铝40g,装于直径1.6cm

5、*30cm的色谱柱屮。取补骨脂素精品甲醇液约l-2ml,加样，以石油醛乙酸乙酯（1：2）作洗脱剂，洗脱，每20ml为一憾分，各憾份冋收溶剂后，用薄层板检查，和标准品对比，于紫外光灯下观察荧光与颜色。(%1)鉴定1.呈色反应⑴异瓮月亏酸铁反应取补骨脂素精品少量，置于试管中，加入7%盐酸梵胺甲醇溶液2滴〜3滴，再加10%氢氧化钾甲醇溶液2滴〜3滴，于水浴上加热数分钟，冷却，用盐酸调至pH3〜4,加1%三氯化铁试液1滴〜2滴，观察溶液颜色。(2)开环闭环试验取样品少许加稀氢氧化钠溶液lml—2ml,加热，观察现象；再加稀盐酸试液几滴

6、，观察所产生现象。(3)荧光取样品少许溶于氯仿中，用毛细管点于滤纸上，于紫外光灯下观察荧光与颜色。2.薄层色谱鉴定薄层板：硅胶G—CMC-Na板。点样：补骨脂素精品乙醇液、干柱色谱分得的两样品乙醇液、补骨脂素对照品乙醇液及异补骨脂素对照品乙醇液。展开剂：石油瞇一乙酸乙酯(2：3)0展开方式：上行展开。显色：在紫外光灯(365nm)H观察荧光斑点。观察记录：记录图谱，计算Rf值。五、思考题1.从中药中提取香豆素类成分还冇哪些方法？2.异耗月亏酸铁反应的机理是什么?